Session d`examen du 20 juin 2003

Master 2 R et P : Spécialité MRESTE
Méthodes de Recherche en Environnement - Santé – Toxicologie - Ecotoxicologie
Mention ISM, Ingénieries pour la Santé et le Médicament
Responsable : Pr Anne MAITRE : TIMC-EPSP, UJF/UFR Médecine, CHU Grenoble
Référent Toxicologie et Modélisation : Dominique BICOUT : TIMC-EPSP, UJF/VETAGROSUP Lyon
Référent Ecotoxicologie : Muriel RAVETON : LECA-P3E, UJF/UFR Biologie
SUJET DE STAGE N°6
Numéro et type de labellisation du laboratoire d’accueil : UMR CNRS 5553
Ecole doctorale de rattachement : EDISCE
Nom du laboratoire : Laboratoire d’ECologie Alpine(LECA), Equipe P3E.
Adresse du laboratoire : BP 53, 2233 Rue de la Piscine, 38041 Grenoble Cedex 9.
Co-encadrement : Stéphane Reynaud et Muriel Raveton.
Nom du responsable du stage et coordonnées (tél, fax, email) :
Stéphane Reynaud -Tél : 04 76 51 46 80 ; Fax : 04 76 51 44 63 ; Mail : [email protected]
TITRE DU SUJET
Etude des effets génotoxiques du benzo[a]pyrène et du triclosan chez le xénope (Xenopus tropicalis)
PROBLEMATIQUE
Les amphibiens sont à la fois prédateurs pour de nombreux insectes et proie pour une gamme étendue
d’animaux (reptiles, oiseaux, mammifères). Du fait de cette position particulière dans les écosystèmes, le
déclin de leur population a des effets délétères sur l’ensemble des communautés. Les polluants organiques
persistants (POP) pourraient fortement contribuer au déclin et à la constante augmentation des malformations
observés chez ces animaux. Bien qu’il soit aujourd’hui évident que les HAPs soit des polluants
particulièrement génotoxiques chez de nombreuses espèces aquatiques, les effets de ces substances sur
l’ADN des amphibiens sont quasiment méconnus. Nous avons choisi une espèce modèle d’amphibiens, le
xénope tropicalis.
OBJECTIFS
Le but de ce stage est d’évaluer en laboratoire les effets génotoxiques du Benzo[a]pyrène seul ou en mélange
avec le triclosan (antimicrobien présents dans les produits d’hygiène) sur le xénope. Les effets génotoxiques
potentiels seront évalués au travers de la mesure d’adduits à l’ADN ou encore à l’aide du test « comète ».
L’ensemble de ces résultats seront mis en relation avec le dosage de métabolites spécifiques du BaP.
PRINCIPES DU PROTOCOLE
Les xénopes seront contaminées par du BaP seul ou en mélange. Le suivi des effets génotoxiques sera
réalisé dans différents organes cibles du BaP (foie, rein, vessie, ovaires…). La méthode des comètes
permettra de visualiser par microscopie les cassures de l'ADN dans les cellules sanguines individuellement.
La quantification des adduits à l'ADN se fera après une étape d'extraction de l'ADN des organes puis
hydrolyse en monomère. Les adduits sont quantifiés par chromatographie liquide associée à la spectrométrie
de masse.
MOTS CLES (5 max) : AMPHIBIENS, GENOTOXICITE, BENZO[A]PYRENE, TRICLOSAN
DOMINANTE DU SUJET :
1) expérimentale de laboratoire,
Précisez la(les) dominante(s) :
2) expérimentale de terrain,
3) épidémiologie de terrain,
4) traitement de données.
(1)
Secrétariat pédagogique : [email protected]
UFR de Médecine – Domaine de la Merci – 38706 La Tronche cedex – France - Tél : (0)4.76.63.75.01 – Fax : (0)4.76.63.75.02