Exemple de surveillance de la fourche à la fourchette des
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Exemple de surveillance de la fourche à la fourchette des
Exemple de surveillance de la fourchette à la fourche des produits à base de viande de porc • Laboratoire AFSSA site de Ploufragan (22) • Unité Hygiène et Qualité des Produits Avicoles et Porcins • Etudes en collaborations avec le CTSCCV et l’ITP • Financées par la DGAl Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Listeria monocytogenes Zoonoses • • • • • Fréquence faible : 3,1 cas/million en 2001 Gravité (méningites, mortinatalité...) 29 % de mortalité, séquelles graves Populations à risque Origine alimentaire : fromages, légumes, et ... Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Epidémies de listérioses • • Italie : 1989, 1990 : saucisses (2 cas) Suède : 1993 : saucisses (1 cas) • France 1992 : 279 cas / 22 avortements / 63 morts : – L. monocytogenes 4b (2389/2425/3274/2671/47/108/340) – 45% des cas : langue de porc en gelée • France 1993 : 38 cas / 9 avortements / 2 morts – L. monocytogenes 4b (2671/108/312) – 37 cas : rillettes / 1 cas : lardons • France 1999-2000 : 36 cas – L. monocytogenes 4b – 30 cas langue de porc en gelée, 6 cas rillettes • France 2002 : 9 cas – L. monocytogenes 4b – consommation de « tartinette » Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Contamination par Listeria monocytogenes AQS-99 CTSCCV/AFSSA Produits : avant cuisson ou fermentation : Sites E1 E2 E3 E4 Total % Matières premières 5/6 0/2 23/39 20/42 48/89 54 Produits 7/13 4/13 5/8 11/14 27/48 56 Proportion de contamination « produit » importante Même proportion pour la matière première Si l’une diminue… Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Ecologie de la contamination en transformation • Facteurs physico-chimiques – Surfaces “résines, matière organique, pH neutre, humides et froides” Chasseignaux (2002) • Microbiologie, présence de L. monocytogenes – associée à présence d’une flore psychrotrophe > à 5 log (AQS 99 et Chasseignaux 99) – associée à la présence de Enterococcus sp. (AQS 99, Chasseignaux 99 et Frank 94 (Lait)) Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Origine des souches en transformation (AQS-99) • Circonstances associées à la détection de L.monocytogenes • en cours de production • zones de réception • présence de matières organiques fraîches • Traçabilité (PFGE) des souches : • origine directe ou très majoritaire à partir des matières premières • Typage : 9 sérotypes isolés • 1/2a (60%) + 1/2c (23%) +1/2b (9,7%) 93% des isolats • 4b (5%) Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Abattage – découpe de porc Environnements Source : I. Corrégé VPC18(6)275-282 La proportion de sites positifs augmente : * avec le process de préparation de la carcasse * et avec le temps depuis la dernière opération de nettoyage et désinfection Préparation externe / Habillage/ Ressuage 5.6% / 4.5% / 30% 2 heures 0.0% / 19% / 30% 4 heures 13% / 33% / 43% 6 heures 33% / 39% / 57% N&D Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Traçabilité des souches en abattage et découpe de porc • Souchier (ITP 95 / AFSSA 96) – 5 entreprises, – prélèvements en activité / en ND – campagnes séparées de plusieurs mois • 19 génotypes différents (sur 287 isolats) – 1 représente 65% des isolats • Présence de souches “résidentes” • 4 sérotypes identifiés – 1/2a (75%), 1/2c (15%), 3a (6%) et 3c (3%) Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Listeria monocytogenes dans les élevages de porcs • Skovgaard et Norrung (1989) fèces d’animaux abattus 3 + sur 172 • Etude AFSSA Ploufragan (1992) : 228 éch. sur animaux et environnement : 12 + (10 L.m. 4b) • Adesiyun and Khrishnan (1995) : 139 écouvillons rectaux : 10 + (9 L.m. 4b) • Etude AFSSA Ploufragan (2000) : 32 élevages 4 + (1 L. m. 4b). Incidence faible à l’élevage mais Listeria monocytogenes 4b Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Les facteurs de risques de contamination des porcs charcutiers en élevage • Moyens Beloeil et al. 2003 – 98 élevages naisseurs engraisseurs • Entre décembre 2000 et octobre 2001 – 5 chiffonnages de 3 porcs en fin d’engraissement – Questionnaires intégrant 180 variables Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Résultats • Microbiologie – 98 élevages =>13 détections de L. monocytogenes (14%) – 145 visites (bandes) =>18 détections (12,4%) – 5 visites renouvelées => 2 persistances Les élevages positifs montrent au moins 1/2a ou 1/2b mais on isole le sérogroupe 4 dans 5 élevages (dont 4b) Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Associations quantifiées RR : Risques relatifs selon Fourichon et Beaudeau (98) • Alimentation : – Soupe RR 3,7 (CI 90%1.1-13.7) vs alimentation granulée sèche • Fréquence de désinfection des bottes : – Moins d’une fois par semaine RR 3,8 d’une fois (IC 90%1.4-11.4) vs plus • Durée du vide sanitaire dans la salle d’engraissement – Salle vide et nettoyée pendant moins de 1 jour RR 2.8 (CI 90%1.1-6.7) vs plus d’un jour. Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Associations quantifiées RR : Risques relatifs selon Fourichon et Beaudeau (98) • Spécifiques d’élevage alimentant soupe – entretien du circuit de distribution de l’aliment • Aucun RR = 1 RR = 4,1 (IC • Rinçage à l’eau 90% 1.4-40.6) • Avec eau et désinfectant moins d’une fois par mois RR = 8,7 (IC 90% 1.4-61) • Avec eau et désinfectant plus d’une fois par mois RR = 9,9 (IC Analyse des risques et Listeria monocytogenes 90% 2.0-59.6) 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Bilan Listeria monocytogenes filière porcine • Hiatus entre élevage et transformation : – FEn élevage de 1/2 et 4b – FEn abattoir 1/2 – FEn transformation : 1/2 et 4b – Origine des 4b? Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Listeria monocytogenes 4b en élevage de porcs M Analyse des risques et Listeria monocytogenes T- Herd { { Profils de différentes souches de Listeria monocytogenes obtenus par PFGE ApaI T- : souches 4b épidémiques M : marqueur de poids moléculaire RaoulTm 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Travaux en cours … • Diffusion de souches de sérotype 4b? Etudes en abattoir pour caractériser l’apport • Méthodologie ciblée sur ce sérotype • Application à la recherche de souches de L. monocytogenes 4b dans les cases d’attente d’un abattoir Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Résultats • Echantillonnage large permet de détecter des L. monocytogenes dans les cases d’attente • Une diversité est mise en évidence dès le stade sérotype • Dans toutes les travées des isolats de sérotype 4b sont identifiés Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Répartition des isolats de L. monocytogenes de sérotype 4b II IV Homogènes récurrents Analyse des risques et Listeria monocytogenes I III Hétérogènes C1 C2 rares 5ème Conférence Internationale C3 ASEPT 17-18 mars 2004 Localisation par pulsotype Prélèvement pulsotypées types retrouvés (nombre de souches) Eviscération 1 C1 (1) Saignée 7 C1(3) C3 (2) C4 (1) C14 (1) Restrainer 5 C1 (5) Travée 1 16 C1 (15) C2 (1) Travée2 10 C1 (8) C9 (1) C14 (1) Travée 3 12 C1 (4) C2 (1) C4 (2) C9 (3) C17 (1) C18 (1) Travée 4 10 C1(4) C4 (3) C5 (1) C7 (2) Travée 5 6 C1 (2) C4 (2) C5 (1) C3 (1) Travée 6 8 C1 (2) C3 (3) C4 (2) C5 (2) Travée 7 5 C1 (5) Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Transmission des L. monocytogenes 4b dans l’abattoir • Moyens : lien avec le tapis de saignée : – 2 chiffonnages quotidiens – pendant 8 semaines consécutives – Recherche et caractérisation des isolats de sérotype 4b Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 Lien avec le tapis de saignée Travée 1 Travée2 Travée 3 Travée 4 Travée 5 Travée 6 Travée 7 16 10 12 10 6 8 5 C1 (15) C2 (1) C1 (8) C9 (1) C14 (1) C1 (4) C2 (1) C4 (2) C9 (3) C17 (1) C18 (1) C1(4) C4 (3) C5 (1) C7 (2) C1 (2) C4 (2) C5 (1) C3 (1) C1 (2) C3 (3) C4 (2) C5 (2) C1 (5) Contamination du tapis de saignée (nb de pulsotypes détectés) C13 C13 3 2 C13 C13 1 Analyse des risques et Listeria monocytogenes 3 4 5 6 7 10 5ème Conférence Internationale 8 Semaine ASEPT 17-18 9mars 2004 Conclusions • Grande variabilité d’isolats 4b dès l’amont de la production • Existence d’un groupe clonal dans l’abattoir… ou dans le bassin de production • Dynamique des populations de souches possible • Avec la stratégie méthodologique développée, il doit être possible de faire le lien avec les élevages. Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004 • Merci aux membres des unités –HQPAP –EPAQ • Merci au CTSCCV et à l’ITP • Merci à la DGAl • Merci pour votre attention Analyse des risques et Listeria monocytogenes 5ème Conférence Internationale ASEPT 17-18 mars 2004