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FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES
DEPARTEMENT
DE BIOUKIE
VEGETALE
TZiESE DE DOCTORAT DE TROISIEME CYCLE
DE BIOLtMXE VEGETALE
TITRE
ETUDE DE LA BIOLOGIE DE LA REPRODUCZ?TONETDE LA
VWBILITE
GENETIQUE CHEZ LE JUWBIER
(ZIZIPHUS ïl#MlRlMA
LAMi )
Présentéeet soutenuepubliquementle 29 juin 2002 à 9 heures
Par
Ifma’~ DIALLO
Chercheurà l’Institut Sénégalaisde RecherchesAgricoles (ISRA)
CentreNational de RecherchesForestières(CNRF)
Prkidente : Yaye Kene GASSAMADIA
M#mbres : Amadou Tidiane BA
PapaIbra SAMB
PapaNdiengou SALL
3asskou souGolJFv4RA
Maître de Conférences
ProfesseurTitulaire
Directeur ENSA / Thiès
SecrétaireExécutif FNRAA
Direction Eaux et Forêts
Directeur de Thèse : Professeur Amadou Tidiane BA
Sou#sanaLaahi - Wal Hadouli Laahi - WaLaa Ilaaha Illal Laahou - Wdaahou Akbar
Votre amouret votre chaleurm’ont été d’un grand secoursdansla réalisationde
ce travail. Que DIEU vous bénisse,vous protègeet vous prête longue vie.
A Mm Pqw et ma Maman
Vos prièreset vos conseilsne m’ont jamais fait défaut.Puissele DIVIN
CREATEUR vous pr&er longue vie et bonne santé.
Ton affection et tes prièresquotidiennesme marquentprofondément.Que le
TOUT PUISSANT t’accorde longuevie et bonne sante
A mesfrères et suws
Je saluevotre soutienconstantqui m’a permis de transcenderbien des
contingences,
A toys FWSmdtres
Pour les enseignementsdispenséset les conseilsprodigués.
PuisseDIEU vous rétribuer pour vos conseilset encouragementsconstants.
ii
Remerciements
5
1. IIYTRODUCTDN GENERALE .. . ..‘...*...,.....,,...,.......,..,..........~............,...‘.,..,...........
7
2. CrUNNE@i B~BLIOGRAPWIQUES........................................................................
..............................................................................................
2.1. Présentationde l’espèce
2.2. Ecologiede l’espèce...................................................................................................
2.3. Impom
de l’espèce..............................................................................................
2.4. Biolo@ede la reproductionsexuée.............................................................................
2.5. variabilitégénétique..................................................................................................
.............................................................................................
2.6. Stratbgied’amélioration.
3. Materiel let r&bdes
. ...~.~....‘*...*.....................*....................*...................*...........
12
12
13
.15
17
.18
22
24
........24
3.1. Site d’étude............................................................................................................... .24
3.2. biologiede la reproduction......................................................................................... 26
3.2.1. hivi phhofogique ....................................................................................... 26
3.2.2. hnamique d‘ouverture des fleurs ............................................................ 26
32.39. Les grah de paNen ................................................................................ 27
32.32. La &ceptivite stigmatique ...................................................................... 29
3.2.4, Contr&e de la pollinisath ......................................................................... 29
32.5. Insectes intervenant dans la poHinisation ................................................ 31
3.3. variabilitémorphologique........................................................................................... 33
33.1. tes frtJHx3........................................................................................................ ..33
Poids ##Pop th.3 fnrits .......................................................................................... 33
Dlrmenislon cf%sfrvfts ............................................................................................... 33
Forme et ornementation de /‘endocarpe ............................................................ 33
DynmWpe de k p*aminat~@n ......................................................................... 34
33.3. Las jmme8 phnts .......................................................................................... 34
......................................................................................................... 34
Les tm~ons
L%s fk@%% ................................................................................................................ 34
3.4. variabiif5 g&&ique ................................................................................................... 35
3.4.1. @faction de I’ADN ...................................................................................... 35
34.2. I+mage de I’ADN ............................................................................................ 36
34.3. Amplification des amorces .......................................................................... 36
34.4. ~paration et révhtion des bandes ......................................................... 38
34.5. Amorc%-st%s
............................................................................................. 38
34.6. Eistimation des distances g&Miques ........................................................ 38
4. F~~E~uLTATs.........................................................................................................
41. Biulogiede la reproduction.........................................................................................
41.2. @orpbologie florale ........................................................................................
41.3’1. Ouverture des fleurs ................................................................................
41.3P. Matunte des grains de pollen ................................................................
40
40
41
43
45
41.33. Rkceptivité du stigmate .......................................................................... 46
41.4. Reproduction sexuk chez le jujubier ...................................................... .46
41.411,Mode de reproduction ............................................................................. 46
4i.42. Mode de pollinisation ............................................................................. 48
4.2.Variabiitemorphologique.......................................................................................... .50
42.1. Poids moyen des fruits ................................................................................. 50
42.2. Forme et ornementation du noyau ............................................................. 50
42.3. @menstOns du fruit ....................................................................................... 51
42.4. Forme des gralnes et nombre par fruit ...................................................... 53
42.5. Dynamique de la germination des graines ............................................... 54
............................................................................................... 55
42.6. Lies eoty~ns
42.7. Lbs feuilles ...................................................................................................... 55
42.8. Croissance des jeunes plants.. .................................................................. .56
............................. 59
Figure 12: Vitessed’apparitiondesquatrièmesfeuillespar provenance
Tableau 3 : synthèse de la vitesse d’apparition des feuilks ........................ .6 1
42.9. Teneur en sucre de fa pulpe ....................................................................... .61
4.3. Variabilittégénétique.................................................................................................. 62
5. Oiscussions .........................................................................................................
66
51. Biologiede la reproduction......................................................................................... 66
52. Variabilitémorphologique........................................................................................... 69
53. Variabilitégénétique................................................................................................... 73
6. Conclusion g&Wale et perspectives . .. ... . .. .. .. ... .. ...***........................................
74
. .. .. .. .. ... .. .. .. .. .. .. .. .. .. ..‘.“........................................~.~....................
76
7.lktwamAWiE
Liste des Abr&iations .,.......*.‘,............................*..*.....................*.........,....,“,.,......
87
LISTE DES FIGURES .. ...~.............~,...~......................................~.......~...,..~,.,,..~,..,,*,., 88
Liste des photos . . .. ... . ... ..‘..~...~.......~.........................................................................
89
!HI
Lis@ des fabieaux ... ..~........~..................~..~..~.................~~.~..~”.~~...~........................~.
91
AWEXES *......~.,~........‘..~.~~...........~*.....~.....**..........‘..~....~~........~....................,.~~.,.~...,
l?A$mmé
. ..“....*.................**...*.*.....*.....,..~...*..............*....‘...~...........,,...‘.............~.......,........*
98
Les travaux qui ont abouti à la réalisation de ce document, s’inscrivent dans le cadre
du Plan Stratégique de l’Institut Sénégalais de Recherches Agricoles (ISRA) en
partenariat avec le Département de Biologie végétale de l’Université Cheikh Anta
DIOP de Dakar et le Centre de coopération internationale en recherches
agronomique pour le développement (CIRAD). Au cours de nos travaux, nous avions
bén&icié de l’appui financier du Programme d’Appui au Développement Forestier
(PAbF), à travers le Programme National de Semences Forestières (PRONASEF),
et du Fonds National de Recherches Agricoles et Agro-Alimentaires (FNRAA) à
travers le projet sur la « Domestication et fa valorisation de quelques espèces
fruitières forestiéfes au Senégal ».
Nous tenons ainsi a remercier :
Le professeur Amadou Tidiane BA, chef du Département de Biologie vegétale, pour
avoir accepté de diriger cette thèse malgré ses nombreuses responsabilités. Ses
critiques et suggestions ont permis d’améliorer ce document. Sa rigueur scientifique
nous a beaucoup fasciné.
Madame Yaye Kene GASSAMA épouse DIA, ,Maître de conferences, pour ses
conseils, son goût du travail bien fait et sa grande disponibilité. Elle a toujours
accepté de mettre à notre disposition, avec une spontanéité rare, sa culture
scientifique.
Monsieur Papa Ibra SAMB, Directeur de I’ENSA de Thiès qui a bien voulu juger ce
travail. Sa disponibilité, sa rigueur et ses conseils nous été d’un grand secours dans
l’amelioration du document.
Monsieur Bassirou SOUGOUFARA, Ingénieur des Eaux et Forêts, pour avoir
accepté de juger notre travail. Son humilité et ses conseils nous ont profondément
marqué.
Monsieur Papa Ndiengou SALL, Secrétaire Exécutif du FNRAA, qui nous a appris le
goût du travail bien fait et la rigueur envers soi. Sa simplicité et sa disponibilité nous
ont beaucoup aidé dans nos travaux.
Monsieur Kandioura NOBA, Maître de Conférences, pour avoir accepté de juger ce
travail. Qu’il trouve ici l’expression de notre profonde gratitude.
Nous remercions Monsieur Papa Abdoulaye SECK, Directeur Général de I’ISRA
pour ses pr6cieux conseils et encouragements.
Monsieur Abibou GAYE, chef du CNRF, pour la rigueur scientifique qu’il nous a
toujours imposée dans le cadre de nos travaux. Sans sa compréhension et les
facilités accordées, nous aurions eu du mal à achever ces travaux.
5
Madame Marie-Helène CHEVALLIER, chercheur au CIRAD-Forêt, pour avoir
accept6 de nous accueillir dans son Laboratoire et de corriger notre travail. Ses
précieux conseils nous ont permis d’améliorer ce document.
C’est pour nous un grand plaisir de témoigner notre profonde gratitude a tous ceux
qui d’une manière ou d’une autre ont contribué à la conduite et à la finalisation de
ces travaux, particulièrement Abdou Sacor SARR, Momar WADE, Heusmane
COUtlBALY et Ibou SENE.
Nous remercions tout le personnel technique et de recherche du CNRF,
singulièrement Maguette KAIRE, Massamba THIAM, Abdoulaye DIARRA, Ibrahima
THOMAS, Astou SENE, Samba Arona Ndiaye SAMBA, Ousmane DIAGNE,
Thérence MANGA Ibou COLY, Moussa SANE et Ibrahima GUEYE.
Nous remercions également le personnel administratif et comptable du CNRF, en
particulier Madame FALL, Younouss SANE, Arphang NGOM, Issa DIOP, Ndeye Awa
FALL, Penda SARR, Mamadou Moctar CISSE, Marne Anta DIALLO , Malikc SAMB
et Coumba SECK.
Nous remercions tous les enseignants et le personnel du Département de Biologie
végétale et la scolarité de la Faculté des Sciences et Techniques pour leur
inestimable collaboration.
Nous Remercions spécialement notre frére Ibrahima LY dont la disponibilité et la
spontanéité ne nous ont jamais fait défaut pendant les moments les plus difficiles.
Nous lui @moignons toute notre gratitude.
Nous remercions également le Docteur Mamadou WBAYE et le Doyen Aly NDIAYE
qui nous ont toujours encouragé pour la réalisation de ce travail.
Nous remercions Limalé DEME et Michel GOMIS pour leur soutien constant et leurs
encouragements.
Nous remercions Demba CISSOKHO et famille, Lanseyni NDONG et famille, Kéba
WILANE, Mamadou Lamine DABO, El Hadj Malick NDIAYE, Abib KA, Racky DIALLO
et Demba TRAORE.
Nous remercions spécialement Mohamed SALL pour son sens élevé des relations
sociales et sa grande g&&osité. Puisse le TOUT PUISSANT lui accorder longue
vie ‘et bonne santé.
6
1. INTRODUCTIEON
GENERALE
Depuis plusieurs décennies, le Sénégal est confronté à un déficit pluviométrique qui
a serieusement affecté les grands équilibres écologiques. Cette situation est
amplifiée par une pression anthropique de plus en plus forte sur les ressources
forestières. A l’échelle du pays, on assiste à
une degradation des formations
forestières et de leur potentiel de production. Cette degradation peut se mesurer tant
au plan quantitatif que qualitatif.
Au plan quantitatif, les surcharges animales dans les pâturages et l’émondage
abusif des arbres, les feux de brousse et surtout, les prélèvements de combustibles
ligneux avaient déja, en 1980, occasionné une surexploitation du potentiel évaluée à
2 millions de mètres cubes (m3) chaque année (DEFCCS, 1993). Ce volume de bois
represente environ 100 000 hectares de savanes boisées en zone soudanosahélienne ou 200 000 à 250 000 hectares de savanes arborées, soit environ 1 à 2
% des ressources ligneuses forestières du pays (DEFCCS, 1993).
Au plan qualitatif, la dégradation des ressources ligneuses, principalement liée aux
facteurs climatique et anthropique, s’est traduite par une forte mortalité des espèces
tes moins resistantes et une modification de la strate ligneuse. En conséquence, on
assiste, dans bien des cas, à la disparition d’espèces ou tout au moins la diminution
du nombre d’individus, d’où une érosion génétique de plus en plus importante.
la dégradation des écosystèmes est variable en fonction des zones écologiques.
Par exemple, dans la Vaike du Fleuve Sénégal, on assiste à une disparition
progressive des peuplements à Acacia Moka
var. tomenfosa. Par contre dans la
zone sylvo-pastorale, les peuplements de Pferocarpus lucens, Sclerocarya birrea et
DaEbergiamelanoxflon ont fortement régressé au fil du temps.
Le processus de dégradation est aggravé par un contexte de baisse des productions
agricoles. En effet, les populations s’orientent de plus en plus vers l’exploitation et la
commercialisation des produits et sous produits forestiers.
7
Les populations rurales ont toujours prélevé dans leur environnement naturel
immediat une partie de leurs besoins en nourriture, en matériaux de construction, en
produits pharmaceutiques ou énergétiques (Bergeret et Ribot, 1990). Les formations
forestières participent
de façon déterminante à la satisfaction des besoins
alimentaires et énergétiques des populations (FAO, ‘i993).
Dès lors, il est urgent et nécessaire de définir des stratégies susceptibles d’infléchir
la tendance de dégradation des ressources forestières afin de restaurer les
ecosystèmes.
La réhabilitation des écosystèmes forestiers passe, entre autres, par la définition de
stratégies basées sur la réintégration d’espèces forestières à usages multiples dans
les systèmes d’utilisation des terres. Ces systèmes apparaissent comme les plus
aptes à promouvoir une agriculture durable et rentable en contribuant au maintien et
a la restauration de la fertilite des sols (Gassama, 1996). Le matériau bois a toujours
été privilégié par rapport aux produits dits “secondaires” de la forêt (Booth et
Wickens 1986). Mais avec l’importance de plus en plus accrue des produits non
ligneux dans l’économie de l’exploitation, l’on commence à leur accorder une
importance toute particulière. Ainsi, les produits forestiers non ligneux commencent
CI être pris
en compte dans les plans d’aménagement des forets et le
développement de programmes d’amélioration et de domestication des espèces les
plu$ importantes ( Simons, 1997).
Parmi les espèces forestières importantes à usages multiples, figure le jujubier
(Ziziphus mauntiana)très utilisé dans l’alimentation des populations et la médecine
traditionnelle (Kérharo et Adam, 1974 ; Maydel, 1990). C’est ainsi que dès 1989, le
Gouvernement du Sénégal avait inscrit le jujubier parmi les espèces prioritaires
dans le domaine de la recherche forestière. Aussi,
certains organismes
internationaux comme le CORAF, le CILSS et I’ICRAF, estiment que le jujubier doit
btre considéré comme une espéce importante pour l’économie des régions
désh&itées dont la production fruitière a besoin d’être améliorée.
8
Le jujubier est une espèce très utilisée dans les technologies agroforestières (haies
vives, banques fourragères,. ..). Cependant, son principal rôle réside dans sa
production de fruits, largement consommés par les populations et faisant l’objet d’un
commerce actif. En effet, la vente de jujubes par les populations de la zone sylvopastorale du Sénégal représente près de 50 % des revenus tirés de la forêt
(Anonyme, 1991). Dans des conditions de faible pluviométrie en Inde (100 à 125
mm), le jujubier peut produire entre 10 et 15 kg de fruits par arbre et par an
(Vashishtha, 2001). Lorsque les conditions pluviométriques deviennent plus
favorables (300 à 500 mm), cette production atteint 30 à 50 kg (Vashishtha, 2001).
La pleine production commence généralement entre 10 et 12 ans, et se poursuit
jusqu’à 30 ans environ (Munier, 1973).
La récolte et la commercialisation locale des fruits, au Sénégal, sont des activités
dévolues aux femmes et aux enfants et s’étalent sur plus de quatre mois dans
l’année.
Le fruit du jujubier est une drupe dont la pulpe est très riche en vitamines A et C, en
phosphore et en protéines ( Maydel, 1990). Les fruits sont souvent de petite taille et
la pulpe parfois peu sucrée. Ainsi, pour satisfaire une demande sans cesse
croissante du marché national, on assiste à une surexploitation des peuplements
naturels. Ces peuplements se caractérisent par une forte variation inter annuelle et
intra annuelle de la production, et une faible régénération naturelle liée
principalement aux feux de brousse et à la divagation animale. Pour réduire la
pression sur les peuplements naturels et augmenter les revenus des populations, il
apparaît important d’améliorer qualitativement et quantitativement la production
fruitière du jujubier. C’est dans ce contexte que I’ISRAKNRF a initié, en 2001, un
projet sur la “Domestication et la valorisation de quelques fruitiers forestiers au
Sénégal” parmi lesquels figure le jujubier.
Dans cette perspective de domestication du jujubier, l’exploitation de la variabilité
naturelle de l’espèce dans son aire de distribution apparaît importante. Cette
variabilité pourra être enrichie par l’introduction de variétés performantes du point de
vue production fruitière.
9
Une telle option d’amélioration de la qualité fruitière repose, entre autres, sur une
bonne connaissance de la biologie de I’espéce. En effet, la maîtrise de la biologie de
la reproduction d’une espèce permet de créer des hybrides intra spécifiques
performants pour les caractères ciblés (Sedgley et a/., 1992). Au Sénégal les
principaux travaux réalisés dans ce domaine ont porté sur : Acacia senegal ( Diallo,
1994) Faidherbia albida (Gassama, 1996), Balanites aegyptiaca (Ndoye, 1999)
Borassus aethiopum (Thione, 2000), Saba senegalensis (Traore, 2000) et
I’anacardier (Niang 2002). Ailleurs en Afrique les travaux ont porté sur : les espèces
du genre Acacia (Tybirk, 7989 et Buitelaar , 1993), Ziziphus mucronata (Zietsman
(1997) et Tamar;in&s indica (Diallo, 2001).
A partir de la connaissance de la biologie de l’espèce, il est possible d’exploiter la
variabilité naturelle existante au sein des populations dans un programme
d’amélioration. Les caractères morphologiques ont longtemps éte à la base des
programmes d’amélioration, puisqu’ils fournissent des renseignements sur la
variabilité des populations. En effet, la variabilité inter eVou intra annuelle obsewee
s’est d’abord appuyée sur des paramètres morphologiques. Les considérations
morphologiques sont souvent complétées par des analyses qui font appel au
génome. Les techniques d’analyse moléculaires, telles que les RAPD (Random
Amplified Polymerase DNA), peuvent être utilisées sur quasiment tout type de
matériel végétal (Hadrys et al., 1992). Ces marqueurs permettent de mettre en
exergue fa part du génome dans la variabilité observée. II faut cependant signaler
que les études de diversité génetique utilisant les marqueurs ne sont pas
nombreuses pour les espèces des zones sèches.
A la lumière de toutes ces considérations, notre étude va dans un premier temps
aborder les questions relatives à l’amélioration des connaissances sur la biologie du
jujubier à travers (i) la détermination des phénophases et la dynamique d’ouverture
des fleurs, (ii) les périodes de maturité des organes reproducteurs et le mode de
pollinisation, (iii) et la maîtrise des techniques de transfert manuel des grains de
pollen indispensable dans la création d’hybrides performants pour les caracteres
ciblés.
10
Sur la base de la connaissance de la biologie de l’espèce, nous allons, dans la
deuxième partie de notre étude évaluer la variabilité naturelle existante au sein des
populations et entre populations. Pour ce faire, nous ferons appel dans un premier
temps à des marqueurs morphologiques. Les principaux paramètres morphologiques
ciblés sont, les fruits, les graines, la vitesse de germination des graines, la vitesse
de croissance des jeunes plants.
Dans le troisiéme volet de notre étude, t’analyse des marqueurs morphologiques va
être complétée par celle des marqueurs moléculaires. Les marqueurs moléculaires,
en offrant l’avantage de révéler la diversité non sujette aux conditions du milieu
permettra de mieux appréhender la variabilité génétique au sein des populations et
entre popuMons.
11
.
i
-.->. .,. .^__.r
2. DONNEES BIBLIOGRAPHIQUES
2.1. PRESENTATION DE L’ESPECE
Ziziphus maurifiana est une espèce appartenant à la famille des Rhamnaceae qui
renferme environ 170 espèces réparties d’une manière générale dans les régions
tropicales et subtropicales (Liu and Cheng, 1995).
Rencontrée dans la zone sahélo-soudanienne, l’espèce est abondante dans toute la
moitie nord du pays et existe parfois en peuplements dominants. Elle se présente
généralement comme un arbuste de 4 à 5 m de haut (Photo 1) et pouvant atteindre
une dizaine de mètres parfois.
Photo 1: jujubier ilgé de 7 ans (photo prise dans la station de Dahra : échelte
fBoi#
En général, l’écorce est grise et les rameaux sont tombants. Les feuilles sont
alternes et présentent une morphologie très variable. La feuille comporte 3 nervures
principales qui divergent à partir de la base. Les feuilles sont souvent à l’aisselle
d’une paire d’épines dont l’une est droite et l’autre recourbée vers le bas (Maydel ,
1990 )*
13
Les fleurs sont petites et axillaires ou groupées en cymes 4 l’aisselle des épines. Le
calice est formé par 5 sépales soudés à leur base, tandis que la corolle est formée
de 5 pétales. Les sépales sont alternes avec les pétales.
L’androcée est composé de 5 étamines tournées vers l’axe de la fleur et insérées à
la périphérie du disque nectarifère. Le pistil est formé d’un ovaire surmonté d’un
long style terminé par un stigmate. L’ovaire, enveloppé par le disque nectarifère,
comporte 2 à 4 carpelles.
Le fruit est une drupe avec une pulpe acidulée, sucrée et riche en vitamines.
La floraison s’étale de juillet en novembre, tandis que la fructification commence en
septembre et s’estompe en décembre -janvier généralement.
2.2. ECOLOGIE DE L’ESPECE
C’est une espèce dont l’origine est toujours controversée. Certains auteurs estiment
que l’espèce est originaire d’Afrique (Chevalier, 1947) ; tandis que d’autres pensent
qu’elle provient d’Asie centrale (Mot-ton, 1987). Elle occupe une aire géographique
allant de l’atlantique jusqu’en Somalie (Aubreville, 1950). Le jujubier est également
rencontré en Arabie et à Madagascar.
Le jujubier est une espèce dotée d’une plasticité écologique lui permettant de
pousser dans des zones à différences climatiques marquées. C’est ainsi qu’il se
rencontre dans une gamme pluviométrique comprise entre 150 et 1000 mm de
pluviométrie.
En outre, le jujubier supporte les grandes chaleurs et sécheresses (Maydell,l990),
même s’il préfbre les régions modérdes avec une température comprise entre 20 et
35 o C (Vashishtha, 1’997). II peut se développer sur tous les types de sols et peut
supporter une inondation temporaire (Maydel, 1990). Cependant, il préfère les sols
sableux profonds bien drainés présentant un pH neutre ou légèrement alcalin (FAO,
1983).
Au Sénégal, le jujubier se rencontre du nord au su& soit à l’état isolé soit en
association, soit en peuplements purs. II constitue l’un des fruitiers forestiers les
plus recherchés par les populations.
13
L’espèce semble présenter une relative r&istance aux feux de brousse. En effet,
des études ont montré que seulement 10% des jeunes repousses ne survivent pas
après le passage d’un feu (Grice, 1997). Les plants reprennent généralement leur
vigueur 4 mois après le passage du feu. Par contre, il a été démontré que le feu
diminuait la viabilité des semences de l’année (Grice et Brown, 1996).
Des résultats ont montré que le taux de germination des graines avec endocarpe ne
dépasse pas 10 % (Grice, 1996). C’est dire que dans les conditions naturelles, on
ne peut pas espérer un meilleur taux de germination. Par contre, lorsque les graines
sont extraites de l’endocarpe, on obtient un taux de germination de plus 90% (Grice,
1996). L’élimination de l’endocarpe favorise donc une bonne germination des
graines.
Quant aux prétraitements utilisés, Prins et Maghembe (1994) estiment que plus de
80% des graines germent après trempage dans l’eau. Ces résultats confirment ceux
obtenus par Murthy et Reddy (1989). Ces auteurs estiment que non seulement le
trempage dans l’eau permet une meilleure germination, mais affirment que cette
méthode permet une meilleure branchaison et une plus grande croissance des
arbres apr& plantation.
Il a été démontré également que la germination des graines est sensible à la salinité
(Jain et a/., 1988). Cependant, cette sensibilité diminue au cours du développement
v@étatif de la plante.
Des tests d’inoculation effectués avec des champignons mycorhiziens, ont montré
une amélioration de la qualité des feuilles et de la croissance des jeunes plants
(Mathur et Yvas, 1996). Pour sa part, BA (2001) a montré que l’effet de l’inoculation
de champignons
_...- à 4.e~. jujubiers en pépinière se maintenait 20 mois après la
planta&. .’ ”
Au Sénégal, on rencontre une autre espèce appelée Ziziphus mucronata (Sidem
Bouki) qui n’est pas comestible. Les fruits sont généralement de couleur rouge et le
goût de la pulpe est très âcre. On signale également la présence de Ziziphus lotus
(ou jujubier de Berbérie) en Mauritanie et en Afrique du nord (Aubreville, 1950). Les
fruits de cette espèce font aussi l’objet d’une exploitation sous forme de cueillette
par les populations.
14
2.3.
RTANCE DE L’ESPECE
Le jujubier apparaît comme l’un des fruitiers spontanes qui supportent le mieux les
fortes températures et les longues périodes (de 6 a 12 mois parfois) sèches
(Depommier, 1988). Très rustique, le jujubier se rencontre dans des stations
pluviométriques de 100 mm parfois (Chevalier, 1952). II joue un rôle important dans
la conservation des sols a cause de son abondance et de son enracinement profond
(Depommier, 1988). Sa plasticité écologique, lui confère un intérêt accru surtout
pour les pays sahéliens confrontés à un processus de désertification qui prend de
plus en plus de l’ampleur.
Le bois, très résistant aux termites, sert de piquets, manches d’outils, ustensiles de
cuisine et charbon de bois ou bois de feu ( Roussel, 1995). Les performances du
charbon obtenu à partir du bois de jujubier peuvent atteindre 4 900 kcal/kg (Khoshoo
et Subrahmanyam, 1985).
Les feuilles sont utilisées dans l’alimentation humaine (Kadzere, 1998) et constituent
un excellent fourrage pour les petits ruminants (Maposo and Chisuro , 1998). En
effet, Sena et a/, (1998) signalent que les feuilles de jujubier sont importantes en
période de famine au Niger car elles constituent une excellente source d’acides gras
{acide linoléique) et de métaux (fer, calcium, magnésium et zinc).
Dans la médecine traditionnelle, les infusions de racines sont utilisées contre les
maladies vénériennes, les hépatites, etc. (Maydel, 1990). En outre, la poudre de
feuilles est utilisée pour mûrir les furoncles (Kerharo et Adam, 1974).
Les fruits sont consommés frais ou séches et la farine extraite offre une bonne
boisson (Cuedraogo et Nikiema, 1997). Ils contiennent 14 à 16 % de sucre et 160
mg de vitamine C pour 100 g de pulpe (Vashishtha, 1997). Des auteurs ont montré
que le fruit de jujubier était plus riche en calcium, phosphores et fer que la pomme
ou l’orange (Jawanda et Bal, 1978). En outre, les fruits peuvent être conservés
pendant près de 6 mois , tout en conservant quasiment la même quantité de
vitamines A et C (Baumer, 1995). Au Zimbabwe, la pulpe @$t utilisée pour la
fabrication de confiture et de boisson (Coates Palgrave, 1990).
15
’
La production fruitiere est estimée à plus de 5 000 fruits par arbre et par an (Grice,
1996). Dans des conditions d’aridité de Barani au Pakistan, la production de
biomasse de l’espèce est très réduite et ne dépasse guère 2 kgjarbrelan (Shah et
Noor, 1994). Par contre, dans les conditions arides du nord de l’Inde, la production
de biomasse de I’espece atteint Il ,6 kg/arbre/an (Toky and Bisht, 1993).
II a eté démontre en Chine, que la croissance de l’espèce est plus importante (50%
de la croissance totale annuelle), entre juin et août (Vu, 1994). Le développement du
systeme racinaire est également plus important pendant cette période.
Des travaux sur la gestion arboricole ont montré l’effet de la période et de l’intensité
de taille sur la production fruitière. Ainsi, Kundu et a/. (1994) ont montré que les
arbres de la variété Umran élagués le 30 mai produisaient beaucoup plus de fruits
que ceux élagués le 15 mai ou le 15 juin.
Pour leur part, Mukherjee et Soni (1993) estiment que la production de fruits est plus
importante lorsque le sixiéme des branches secondaires des arbres est coupé
(61,82 kg) a,pres deux années consécutives.
En outre, l’espèce est très utilisée dans les technologies agroforestiéres telles que
les haies vives défensives et cultures associées (Djimde, 1997). Des expériences
ont montré que l’utilisation de l’espèce en association avec les cultures permettait
une augmentation de la production de 25 à 30% (Bhati ef a/. 1997). En outre, Khan
(1993) a montré que la plus value de l’association entre le jujubier et le blé est tres
importante pour les paysans. Verinumbe (1991) estime que meme si tes effets sur
les rendements des cultures sont positifs, il n’en demeure pas moins que des
attaques parasitaires ont été notées sur les semences des arbres (28% d’infestation)
avec un taux de survie des jeunes plants assez faible.
Dans le souci de capitaliser les acquis d’autres programmes de recherches, une
variété indienne (variété Gola) a été introduite au Sénégal par le CNRF et multipliée
par microgreffage sur porte greffe local (Tour& 2001). Une étude comparative, sur
les plans physiologique et phénologique, de différents porte-greffes du genre
Z~z@husa été faite par Aw (2002). L’objectif visé est la mise à disposition des
populations de plants performants sur le plan de la production fruitière.
16
24. $IQLOGlE DE LA REPRODtJCTl6N SEXUEE
Les etudes sur la biologie de la reproduction des espèces des zones arides et semi
arides ne sont pas nombreuses (Tybirk, 1991).
Dune manière générale, la période de reproduction des arbres tropicaux n’excède
pas quelques mois. II n’existe pas de période de dormante entre l’initiation florale et
la pollinisation pour la plupart des arbres tropicaux (Owens et Blake, 1985). Des
études ont montré que la production florale d’un arbre augmente avec l’âge
(Poupon, 1976). Cependant, malgré une abondante floraison, le taux de fructification
ne depasse guère 1,3% (Bajpai et a/., 1968).
Le mode de potlinisation est en rapport avec la présence ou non de la glande
nectarifère, la forme du pollen ou le type de fleur (Robbertse, 1974). Si pour
certaines espèces on note une fluctuation de la floraison @une année à l’autre
(Acacia nilotica var. adansonii, Combrefum aculeafum,...), d’autres par contre, ne
sont pas sensibles aux variations des facteurs climatiques (Ziziphus mautiiana,
Gui$ra senegalensis,. . .) (Grouzis, 1991).
La Gonnaissancede la biologie florale des espèces constituent une étape importante
dans fa mise au point des techniques de pollinisation croisée (Buitelaar, 1993). La
maîtrise des techniques de potlinisation contrôlée suppose une connaissance de la
phyeiologie des organes reproducteurs.
Plusieurs méthodes sont actuellement utilisées pour déterminer la période de
maturité des grains de pollen et de réceptivité du stigmate.
La viabilité des grains de pollen peut être déterminée par les methodes
histochimiques comme le test fluorochromatique Heslop-Harrison et a/. (1984). Ces
tests mettent en evidence l’action enzymatique de I’exine dans le clivage du
diabétate de fluorescéine. II existe aussi une méthode basée sur la germination in
vifru des grains de pollen. D’une manière générale, le milieu de germination utilisé
est celui de Brewbaker et Kwacks (1963). Cette méthode permet également
d’apprécier la capacité germinative des grains de pollen et de suivre la croissance
du tube pollinique.
17
Cependant, fa viabilité du pollen dépend de la période de collecte et des conditions
de conservation (Shivanna et Johri, 1985).
Si les tests de viabilité du pollen sont nombreux, force est de reconnaître que très
peu de données existent quant aux techniques de collecte et de conservation chez
les Ggneuxtropicaux d’une manière générale (Owens et a/., 1991).
La receptivite stigmatique peut être determinee par pollinisation manuelle (Thomson
et Barret, 1981) ou par révélation de l’activité estérasique du stigmate (Bernhardt,
1983). La réaction estérasique est basée sur l’existence de secrétions du stigmate
en p&iode de réceptivité.
L’interaction pollenlpistil dépend de la viabilité des grains de pollen, de la réceptivité
du stigmate et de la relation génétique des partenaires basée sur le système d’autoincompatibilité (Dafni, 1992). En effet, le grain de pollen ne peut germer que lorsque
le stigmate est réceptif. Dans le cas d’auto-incompatibilité, le pollen soit ne germe
pas même si le stigmate est réceptif, soit il germe mais un bouchon de callose se
forme à l’extrémité du tube pollinique soit le rejet a lieu au niveau de l’ovaire. Selon
les cas, on parle d’incompatibilité sporophytique ou gamétophytique.
2.5. VARIAWTE
GENETIQUE
Elle peut être évaluée par (i) les essais de provenances et de descendances, et (ii)
les marqueurs biochimiques et/ou moléculaires.
Les essais provenances/descendances multilocaux sont une méthode pratique
d’évaluation de la variabilité génétique des espéces forestières. En effet, ils
permettent de renseigner sur les performances des provenances etlou des individus
pour les critères cibles. Ces tests permettent également de déterminer la part du
milieu et du génome dans les variations observées.
A terme, ces essais peuvent être des sources de semences de meilleure qualité
génétique et physiologique (après éclaircies selectives). Dans ce cadre, le CNRF a
mis en place des essais provenances etlou descendances pour quelques espéces
forestières importantes telles que Acacia senegal, Ziziphus mauntiana, Anacardium
occidentale, Acacia raddiana, etc.
18
Lorsque le marqueur est directement lié à I’ADN, on parle de marqueur moléculaire
(Chevallier, 1998). Lorsqu’il est exprimé sous forme d’iso-enzymes ou de protéines,
il est qualifie de marqueur biochimique.
D’une manière générale, un marqueur genétique idéal doit être :
e polymorphe et multiallélique
e représentatif de l’ensemble du génome
o codominant : I’hétérozygote doit presenter les caractères des deux parents
homozygotes et donc se distinguer des homozygotes parentaux
*
non épistatique: il n’existe pas d’interactions inter tocus. Le génotype du
marqueur est indépendant du génotype aux autres locus
*
neutre: les substitutions alléliques au locus marqueur n’ont pas d’autres effets
phénotypiques que ceux qui permettent de déterminer son génotype. C’est l’une
des caractéristiques les plus intéressantes des marqueurs moléculaires
*
insensible au milieu: le génotype exprime le même phénotype quelque soit le
milieu dans lequel il se trouve
*
reproducttible
*
facile à mettre en œuvre et à coût modéré
Les marqueurs motéculaires ou biochimiques répondent en général à ces différents
criteres.
La méthode d’analyse par électrophorese iso-enzymatique est basée sur le
caractère amphotère des protéines (Pasteur et a/., 1987); c’est-à-dire leur propriété
à se charger électriquement quand elles sont en solution. Il est donc possible, à
partir de cette méthode, de caractériser quelques types moléculaires possédant la
même activité catalytique.
le nombre de locus susceptibles d’etre analysés par la méthode iso-enzymatique
reste limité, ce qui rend la discrimination des génotypes parfois délicate (Tobolski et
Kemety, 1992).
Cette méthode a été utilisée chez Acacia senegal (Diallo, 1992), des espèces du
genre Acacia (Chevallier, 1996) et complexe Acacia nlofica (Ndoye, 1996).
19
Les marqueurs moléculaires sont classes selon trois critères principaux (Chevallier,
1998) : génetique, moléculaire ou technique.
*
Sur le plan génétique, les marqueurs sont soit spécifiques de locus et
codominants, soit non spécifiques de locus et dominants.
e Sur le plan moléculaire, les marqueurs représentent un polymorphisme de
séquence, d’insertion-délétion ou du nombre de répétitions dans les ADN
répetés.
Sur le plan technique, il existe principalement deux catégories, la premiére est
l
basée sur la PCR ciblée ou non (Polymerase Chain Réaction
: amplification
enzymatique in vitro d’une séquence d’ADN à partir d’une paire d’amorces
oligonucléotidiques spécifiques à l’aide d’une ADN polymérase thermostable), la
deuxième n’utilise pas la PCR.
Dans le cas des marqueurs RAPD, le principe de l’analyse repose sur une réaction
PCR et l’utilisation d’amorces de séquence arbitraire. II y a hybridation à chaque
fois que l’amorce rencontre dans I’ADN une séquence complémentaire. II y a
amplification lorsque les sites d’hybridation sont de sens opposé et proches. Par
exemple, il y a amplification entre sites d’hybridation 2 et 4, 3 et 5 chez l’individu 1
(Figure 1). Par contre, il n’y a pas d’amplification entre les sites d’hybridation 2 et 4,
les amorces étant mal orientées ni entre 1 et 4, la distance étant trop grande et le
site a disparu.
La méthode RAPD permet de caractériser les individus par la présence ou l’absence
d’un fragment d’ADN, sans toutefois renseigner si l’individu est homozygote ou
héterozygote pour le fragment trouvé (Williams et a/. , 1990). Elle offre cependant
l’avantage de pouvoir être utilisée sur quasiment tout type de matériel végétal
(Hadrys et a/. , 1992).
20
.
.
Figure 1: Principe du polymorphisme
d&tecté avec /es
amorces ar&itfaifes RAP5
Chez les arbres forestiers c’est la technique FWPD qui est la plus utilisée. Elle a
I’avantage d’être simple, rapide, relativement peu coûteuse et ne nécessite ni
radioactivité ni technicité particulière. Mais la RAPD présente un inconvénient
majeur de reproductibilité et de dominante des marqueurs.
21
Selon les conditions techniques de PCR et le thermocycleur utilisé, le nombre de
fragments produits peut varier
(Chevallier, 1998). Une bande dans un gel peut
correspondre à plusieurs locus pour une amorce donnée. A cet effet, il est souvent
difficile de comparer les résultats obtenus dans des laboratoires différents. Dans
notre cas, toutes les analyses ont été effectuées avec le même thermocycleur dans
le même laboratoire.
Un moyen de pallier cet inconvénient consiste à rendre spécifique les marqueurs
RAPD les plus intéressants (lorsqu’ils sont liés à un caractère quantitatif par
exemple). Le fragment est découpé dans le gel, cloné et son ADN est séquence. Les
amorces spkifiques d’une vingtaine de bases sont alors définies. II s’agit de la
technique SCAR (Sequence-Characterized Amplified Region ou caracterisation du
produit d’amplification).
Les études de variabilité génétique utilisant les marqueurs ne sont pas nombreuses
pour les espèces africaines des zones sèches. On peut citer parmi celles-ci les
travaux reaiisés par Chevallier (1996) dans l’étude des relations taxinomiques dans
le genre Acacia et par Dîallo (2001) sur la diversité génétique de Tamarindus indka.
Toutes les approches en matière d’étude de la variabilité génétique sont
complémentaires en cela que chacune presente un avantage certain par rapport à
l’autre. A ce titre, il est important de faire un choix en fonction de l’objectif vise.
2.6, STf?ATEGIE D’AMELKBRATkON
Si la conservation des ressources génétiques existantes et leur utilisation
rationnelle pour les besoins des populations sont importantes, leur amélioration en
fonction des moyens disponibles apparaît indispensable. A cet effet, l’amélioration
peut se .situer à deux niveaux principalement (î) l’évaluation et l’exploitation de la
variabilité naturelle, et (ii) la création d’une variabilité par les recombinaisons
genétiques.
o L’évaluation et l’exploitation de la variabilité naturelle comprend (i) la variabilité
inter spécifique qui est évaluée à travers les tes@ de comportement d’espèces
en vue de sélectionner les mieux adaptées aux aondîtîons du milieu, et (ii) la
variabilité intra spécifique.
22
La variabilité intra spécifique se situe au niveaux (i) inter populations (variabilité de
provenances) qui permet de sélectionner les provenances les plus adaptées,
stables et productives dans des conditions données, et (ii) intra populations
(variabilité de descendances) qui se fait à partir d’arbres “plus” phénotypiquement
supérieurs identifiés dans les meilleurs peuplements à graines. Les tests de
descendances peuvent aboutir à la sélection d’arbres élites génétiquement
superieurs.
!JBLes recombinaisons génétiques s’appuient sur la connaissance de la biologie de
fa reproduction de l’espèce et la mise au point des techniques de pollinisation
contrôlée.
L’amélioration s’appuie également sur des outils tels que, la multiplication végétative
(horticole ou in vitro) qui permet de cloner le matériel végétal amélioré mis au point.
tl est évident que, compte tenu des coûts parfois très elevés, l’amélioration ne devra
Hre envisagée que pour des espèces pour lesquelles les perspectives de gain
génétique sont favorables et se justifient. Elle permettra alors de mettre en place des
vergers à graines et parfois des vergers à clones dont les graines sont
génétiquement plus performantes que celles des peuplements naturels
Les
plantations qui seront issues de ces graines génétiquement supérieures seront plus
productives que les autres situées dans les mêmes conditions pédoclimatiques.
Cette stratégie d’amélioration est un élément du processus de la domestication des
espèces qui se justifie plus chez les fruitiers forestiers. Compte tenu de l’importance
des espèces fruitières forestiéres dans l’économie de l’exploitation et l’économie
nationale leur domestication procurera aux populations des revenus substantiels. En
effet, les populations accepteront plus facilement de mettre en place des vergers de
production de jujubiers ou de tamariniers par exemple, comme elles le font pour les
manguiers et autres, si tant est que l’amélioration a permis le raccourcissement de la
période de la Premiere fructification.
23
3. MATERIEL ET METHODES
3.1. SITE D’!ETUDE
La biologie de la reproduction a été étudiée dans les parcelles du Centre de
Recherches Zootechniques (CRZ) de Dahra situé dans la zone sylvo-pastorale
(Figure 2 : carte des zones éco-geographiques) ; alors que la morphologie
comparée des jeunes plants a été étudiée à la pépinière centrale du CNRF à Hann.
La variabilité génétique a été étudiée au laboratoire de génétique du CIRAD-Foret à
Montpellier (France).
La station de Dahra.est située à 15’20’ latitude Nord et 15’28’ longitude ouest. La
pluviométrie moyenne annuelle est de 250 mm et la saison des pluies dure
généralement 3 mois (juillet - septembre). Les températures maximale et minimale
sont de 41” et 22°C au cours du mois le plus chaud (mai) et de 31” et 14°C pendant
le mois le plus frais (Janvier). L’évapotranspiration potentielle est en moyenne de
2031 mm/an. La pluviométrie moyenne annuelle correspond approximativement au
dixième de I’évapotranspiration potentielle, ce qui implique un déficit pluviométrique
important.
Le sol appartient au groupe des sols « Diéri » qui sont brun-rouges, faiblement
évolués, formés sur un matériau sableux pauvre en argile (Maignien, 1965). Les
teneurs moyennes en sable et argile sont respectivement de 90 % et 6 %. Le sol est
généralement profond et homogène jusqu’à une profondeur de 4 m (Maignien,
1965). La nappe phréatique se situerait à environ 40 m. II s’agit donc de sols
relativement pauvres avec une faible rétention hydrique.
L’étude de la biologie de la reproduction du jujubier a été menée dans une plantation
équienne de 8 ans d‘âge avec un écartement de 5 m sur 5 m. La hauteur moyenne
des arbres ne dépasse pas 25 mètres. Les arbres présentent une branchaison
importante, ce qui augure d’une bonne fructification.
24
Pendant la saison des pluies, les arbres sont associés à des cultures telles
que
le
béréf, le nihbé et le mil.
Le site offre l’avantage d’être clôturé, donc à l’abri des perturbations liées à la
divagation animale.
Sowce : Eres Data Center (19113)
Figsrre 2 : canle des mnat
25
biques du Sbégal
3.2, ~BIOLOGIEDE LA REPRODUCTION
3.2.1. Suivi phénobgique
La ph&nologie a été suivi dans la population équienne de jujubier située dans
l’enceinte du CRZ de Dahra. Au total 50 arbres ont été retenus pour l’étude de la
phénoiogie. Les observations ont port& essentiellement sur la floraison et la
fructification, même si la durée relative de la feuillaison a été déterminee dans la
même période. Chaque phase a été divisée en plusieurs stades de manière à
faciliter le suivi. Ainsi, pour des raisons de commodité 3 stades principaux ont été
retenus pour chaque phase. Chaque stade mentionné correspond à celui qui est
dominant sur l’arbre.
Flurabson (FI) :
Stade 1 : boutons floraux
Stade 2 : fleurs épanouies
Stage 3 : chute ou fanaison des fleurs
Fructification (Fr) :
Stade 1 : Fruits verts
Stade 2 : Fruits mûrs
Stade 3 : Chute des fruits
Le suivi a été effectué sur deux années pluvieuses consécutives et les observations
sont faites tous les 10 jours. A chaque date d’observation, le numéro de l’arbre et
son stade phénologique sont notés.
Les observations ont permis de déterminer les durées relatives de la floraison et de
la fructification dans le site d’étude.
3.2.2. Dynamique d’ouverture des fleurs
Pour déterminer la morphoséquence d’ouverture des fleurs, des boutons floraux ont
été marques puis suivis de 6 heures à 20 heures. A chaque observation, le stade
floral est noté ainsi que la couleur du périanthe (sépales et pétales). Ceci permet de
* Suivre le changement de couleur du périanthe du stade bouton floral jusqu’à
l’ouverture des fleurs ;
26
e Déterminer le moment le plus favorable pour obtenir l’ouverture des fleurs dans
les 24 heures pour les besoins du transfert de pollen ;
l
Déterminer la séquence d’ouverture des fleurs sur un arbre et dans un
peuplement.
3.2.3. Etude des organes reproducteurs
La maîtrise des techniques de pollinisation contrôlée suppose une bonne
connaissance de l’interaction poilenlstigmate.
32.31. Les pains de pollen
Forme du grain de pollen
Afin de déterminer la forme du pollen, des fleurs ont été récoltées dans un flacon
contenant du glutaraldéhyde en solution à 4 % tamponné au cocodylate de sodium à
pli 7,2. Après fixation et déshydratation, les fleurs ont été passées au point critique
puis métallisées à l’or. Les observations ont été faites au microscope électronique à
balaryage.
PMiode de, maturité des grains de pollen
Elle a été étudiée sur le terrain par suivi de la séquence d’ouverture des anthères.
En effet, des boutons floraux ont été étiquetés, puis suivis régulièrement jusqu’à
l’ouverture des fleurs. A ce moment, des fleurs sont récoltées toutes les heures puis
observées à la loupe pour déterminer le moment où les anthères s’ouvrent pour
fiberer les grains de pollen. L’ouverture des anthères correspond à la maturité des
grains de pollen.
27
VbbiM
das grains de pollen
La viabilite a été mesurée par le test fluorochromatique et par la méthode de
transfert direct du pollen dès l’ouverture des anthéres.
*
Le principe du test flourochromatique repose sur la fluorescence des parois
exiniques des grains de pollen viables. Ainsi, dès l’ouverture des anthères, 5
fleurs sont récoltées toutes les heures et les grains de pollen sont déposés sur
une lame de microscope contenant une solution de diac&ate de fluorescéine.
Après 5 minutes dans la solution, les grains de pollen sont observés au
microscope à fluorescence à la lumière bleue (495 nM).
La paroi de l’exine des grains de pollen viables apparaît fluorescente (couleur
vert jaunâtre). Ceci est dû au fait que le diacétate de fluorescéine qui a pénétré
dans le pollen est clivé par les enzymes estérasiques. La fluorescéine libéree
est retenue par I’exine donnant ainsi une couleur vert jaunâtre au microscope à
fluorescence.
Par contre, les grains de pollen non viables ne sont pas
fluorescents car il n’y a pas de clivage du diacétate de fluorescéine.
La solution de diacétate de fluorescéine est composée de 1 ul de diacétate de
fluorescéine (2 mg de diacétate de fluorescéine dans 1 ml d’acétone) et de 1 ml
de tampon Tris 0,05M à pH 6,5 contenant 15% de saccharose.
*
La méthode de transfert direct du pollen a également été utilisée pour déterminer
leur viabilité. Pour se faire, des fleurs sont récoltées toutes les heures dés
l’ouverture des anthères. Chaque lot de fleurs récoltées est badigeonné
directement sur des fleurs dont les stigmates sont en période de réceptivite. La
formation de fruits à partir de fleurs badigeonnées renseigne sur la viabilité des
grains de pollen utilisés pour la pollinisation.
28
Conservation des grains de pollen
Des fleurs sont récoltées à partir du moment où les anthéres sont ouvertes. Les
fleurs sont ensuite placées dans une boîte de Pétri à température ambiante pour les
besoins de la conservation. Toutes les 24 heures, des grains de pollen en
conservation sont badigeonnés sur des fleurs dont les stigmates sont réceptifs afin
de déterminier leur viabilit6.
En outre, un lot de grains de pollen est également testé toutes les 24 heures par la
méthode fluorochromatique.
La réceptivité du stigmate a été déterminée par la méthode directe de transfert du
pollen toutes les heures depuis l’ouverture des anthères. La période pendant
laquelle des fruits ont été obtenus, suite au transfert manuel de pollen, correspond à
ta période de réceptivité du stigmate. Le pollen ne germe sur le stigmate que lorsque
celui-ci est en p&iode de réceptivité.
3.2.4. Contrôle de la pallinisaüon
Pour contrôler le transfert de pollen et déterminer le mode préférentiel de
pollinisation chez le jujubier, des poches de pollinisation ont été utilisées. Ces
poches sont des sachets en plastique micro perforés de dimension 205 x 405 mm,
avec une épaisseur de 1,s mm et de 0,4 mm de diamètre pour les perforations. Les
sachets offrent l’avantage d’empêcher, d’une part l’accès des insectes aux fleurs et,
d’autre part de permettre des échanges gazeux avec le milieu extérieur.
Les boutons floraux sont ensachés au moment où la couleur des piéces protectrices
sépales et pétales) devient jaunâtre. En effet, les premières observations ont permis
de se rendre compte que lorsque la couleur des pièces protectrices devient jaunâtre,
les fleurs s’ouvrent dans les 24 heures qui suivent. C’est ainsi que les transferts de
polten suivants ont été effectués :
*
Pollinisation au sein d’une Mme fleur ;
o Pollinisation entre fleurs du même arbre, et
8 Pollinisation entre fleurs d’arbres différents et distants de 100 m environ.
29
Des boutons floraux ont également été étiquetes puis suivis afin de déterminer
t”efficacité de la pollinisation naturelle.
Pour chaque type de transfert de pollen, les opérations suivantes ont été réalisées:
* Poflinisation au niveau de la même fleur : 50 fleurs individuelles ont eté isolées
puis ensachées au stade bouton floral. A l’ouverture des fleurs, les sachets sont
regulièrement secoues dans la journée de manière à favoriser le dépôt du pollen
sur les stigmates. Les sachets ne sont retirés qu’à la formation des fruits ou à la
chute des fleurs.
m Pollinisat,ion entre fleurs du même arbre : les sachets posés au stade bouton
floral sont retirés, dès l’ouverture des fleurs, juste le temps de prélever du pollen
sur d’autres fleurs du même arbre et de les badigeonner sur celles qui sont
ensachées. Au bout de 10 à 15 jours de suivi, les sachets sont retirés pour le
comptage des eventuels fruits fortis.
e Poflinisation entre fleurs d’arbres différents : des fleurs choisies comme parents
femelles sont ensachées au stade bouton. Des leur ouverture, les étamines sont
sectionnees pour éviter toute contamination avec l’auto pollen, puis des fleurs
épanouies sont récoltées sur les arbres identifiés à environ 100 m et
badigeonnées sur les fleurs ensachées afin de déposer le pollen sur les
stigmates des fleurs émasculées. Les sachets sont également retires au bout de
10 à 15 jours pour compter les éventuels fruits formés.
En ce qui concerne la pollinisation anémophile, des lames de microscope entourées
de ruban adhésif ont été suspendues sur des branches isolees de manière à
capturer les grains de pollen qui seraient transportés par le vent. Les lames sont
retirées au bout de 10 jours et les éventuels grains de pollen sont observés au
microscope après coloration au bleu de méthylène.
30
32.5. Insectes intervenant dans la pollinisation
Les insectes qui butinent les fleurs de Ziziphus mau~iana ont été observ6s de 7
heures à 19 heures. Des captures ont été effectuées à l’aide d’un filet placé à
I’exWmité d’une longue perche. Les insectes capturés sont rapidement tués en les
plongeant dans un flacon contenant de l’acétate d’éthyle ce qui permet de conserver
le maximum de pollen sur leur corps. Les grains de pollen récupérés sur les corps
des insectes renseignent sur les principaux insectes intervenant dans la pollinisation
des fleurs du jujubier.
Pour récupérer tes grains de poilen transportés, les insectes sont plongés dans un
flacon contenant de l’alcool 70”. Les flacons sont secoués de maniére à décrocher
les grains de pollen. Les flacons sont ensuite centrifugés à 2000 trs/mn pendant 30
minutes. Le culot renfermant les grains de pollen est déposé sur une lame de
microscope pour observation et comptage. II faut préciser que cette opération est
effectuée sbparément pour chaque insecte capturé. De ce fait, il est possible d’avoir
une idée sur la charge pollinique des différents insectes intervenant dans la
potlinisation.
L’identification des insectes a été faite au laboratoire d’entomologie de I’IFAN.
31
Figure 3 : R4partition gbogmphique des provenances sénégalaises
32
3.3. VARIAEBILITEMORPHOLOGlQUE
L’étude a été menée sur les semences de sept provenances (Sénégal 5, Gambie 1
et Tchad 1). Les provenances du Sénégal sont (Figure 3) : Dahra, Colomba, Ibel,
Keur Serigne Touba et Sessène. Les 2 provenances étrangères sont utilisées dans
le but de les comparer avec celles du Sénégal. D’une manière générale, les
analyses statistiques ont été effectuées avec le logiciel STAT-ITCF
L’étude a porté sur les caractères morphologiques des fruits et des graines ainsi que
des jeunes plants issus de germination,
33.1. Les fruits
Le poids moyen a été déterminé en utilisant 100 fruits dépulpés avec 4 rispétitions
pour chacune des provenances étudiées. Les fruits ont été tirés au hasard dans
chaque lot.
Dimension des fruits
Pour chaque provenance, 4 lots de 30 fruits ont été tirés au hasard afin de
déterminer la variation de longueur du grand axe et du petit axe.
Forme et or7?emenfation de /‘endocarpe
Afin de déterminer les différences morphologiques pouvant exister entre les
différentes provenances, la forme et l’ornementation de l’endocarpe du fruit
débarrassé de sa pulpe ont été observées pour des lots tirés au hasard.
Tefleur en sucre
Des tests ont été effectués pour déterminer la quantité de sucre total de la pulpe des
fruits pour chaque provenance. Pour ce faire, la pulpe de 10 fruits par provenance a
été récupérée par broyage. Une petite quantité de pulpe est ainsi déposée sur le
refractometre pour déterminer la teneur en sucre. Pour chaque provenance,
l‘analyse a été répétée 4 fois. Les teneurs moyennes ont alors été déterminées.
33
33.2. Les graines
Forme des graines et nombre de graines par fnrit
Après concassage de l’endocarpe, le nombre de graines a été compté pour 4 lots de
30 graines de chaque provenance et leur forme a également été decrite.
Dynamique de la pt6germinatM
Avant le semis en pépiniere, les graines ont été soumises à une prégermination à
t’étuve à 30%. Un prétraitement à l’acide sulfurique concentre par trempage pendant
3 minutes a été effectue pour lever la dormante tégumentaire des graines. Pour
chaque provenance, un lot de 30 graines a été utilisé avec 4 répétitions. Ceci a
permis d’apprécier la dynamique de la prégermination des lots de graines.
33.3. Les jeunes planta
Trois jours après semis en pépinière et émergence de la tigelle, les cotylédons des
plantules des différentes provenances ont été comparés. Ainsi pour chaque
provenance, la longueur du grand axe et du petit axe a été mesurée sur les 30
individus de chaque provenance.
Le8 feuilles
Les observations ont été faites sur les jeunes plants élevés en pépinière. La vitesse
d’apparition des feuilles a été notée jusqu’à la cinquième. Pour chaque feuille, le
jour d’apparition et le nombre pieds concernés sont notés.
34
3.4, VAFWMLITE GENETWE
Les études ont été menées sur des feuilles récoltées sur les arbres des
provenances suivantes : Bandia, Keur Serigne Touba, Dahra, Sinthiou Koèl et Niger.
Les provenances sont mises en place dans la station de recherche forestiere de
Bandia (longitude 17”l’ W et 14”37’ N). Pour chaque provenance, 200 g de feuilles
ont été prélevées sur chacun des 25 individus. Les feuilles ont été séchées en les
plaçant dans un sachet plastique contenant du silicagel. Les feuilles ont été utilisées
pour les extractions d’ADN. Pour une bonne qualité d’ADN, il est conseillé de
récolter des feuilles adultes (ni trop jeunes ni trop âgées).
3.4.1. Extmution de I’AW
Trois méthodes ont été testées pour l’extraction de I’ADN : (i) la technique de
Bousquet et a/. (1990), (ii) le Coussin de saccharose et (iii) le Mini Kit QIAGEN. Le
protocole de chaque méthode peut être consulté en annexe 1.
L’extraction de I’ADN se fait à partir de 100 mg de feuilles sèches. Les feuilles sont
broyées dans de l’azote liquide pour favoriser la lyse des cellules. Le tampon
d’extraction (1,s ml) est ajouté au moment du broyage. Le mélange obtenu est
recupéré dans des micro-tubes qui sont placés au bain-marie à ~O”C, sous agitation
lente pendant une demi-heure environ. L’ADN de la solution obtenue est précipité
par addition d’alcool. Les débris et autres composés chimiques et biochimiques
(protéines, sels minéraux et lipides) sont éliminés par centrifugation. L’ADN purifié
est alors récupéré dans le surnageant. Pour le dosage, I’ADN est dissout dans de
l’eau distillée stérile.
La méthode Bousquet et a/. (1990) n’a pas permis d’obtenir une bonne qualité
d’ADN du fait de la présence de beaucoup de métabolites secondaires et d’hydrates
de carbones. Par contre, les deux autres méthodes ont permis d’obtenir des culots
d’ADN translucides. En conséquence, les analyses ultérieures ont été faites à partir
d’extraits d”ADN obtenus par la méthode utilisant le coussin de saccharose ou par
celle du mini-Kit QIAGEN.
35
34.2. Dosage de I’ADN
Le dosage de I’ADN est effectué au fluorimètre TD-700 suivant le protocole décrit en
annexe 2. Après étalonnage de l’appareil, les valeurs de la concentration en acides
nucléiques sont directement lues au spectrophotomètre (ng/uI). La qualité de I’ADN
est contrôl&e par migration sur gel d’agarose.
34.3. Amplification desi amorces
La technique RAPD utiliséte pour estimer la diversité génétique des provenances de
jujubiers étudiées est basee sur le principe de la PCR (Polymerase Chain Reaction),
La PCR est une méthode d’amplification exponentielle d’un fragment d’ADN.
Le rôle de l’amorce est de s’hybrider chaque fois qu’elle trouvera dans le filament
d’ADN une séquence complémentaire favorisant l’extension et l’élongation du
fragment à amplifier.
L’amplification est réalisée sur une micro plaque de 96 puits à l’aide de 3 appareils :
Techne cyclogene, Techne Touchgene et Perkin-Elmer Gene Amp PCR System
9600. Chaque puits de microplaque contient :
o 5 ul d’ADN matrice à 2nglul et
*
20 ul d’un mélange réactionnel composé de : 12,5 pl de tampon 2 X (contenant
MgC1220 mM ; Tris-HC1 670 mM ; (NH4)* SO4 166 M et MercaptoéthanolO,7%) +
0,14 ul d’amorce 100 um + 7,16 ul d’eau + 0,2 ul de Taq polymérase 5Wul.
La Taq est en fait une enzyme thermostable qui catalyse la synthèse d’ADN ; d’où la
n&essité de l’ajouter au dernier moment.
Pour chaque appareil, les conditions d’amplifications sont précisées.
36
Appareil 1 et 2 : Techne cyclogene et Techne Touchgene :
e 1 cycle de dénaturation préliminaire de I’ADN à 94°C pendant 4 minutes
I) 35 cycles des trois étapes suivantes
-
dénaturation de la double hélice à 92°C pendant 45 secondes
-
fixation des amorces à 40°C pendant 45 secondes, et
-
extension des fragments à 72°C pendant 1 minute 45 secondes
e 1 cycle d’extension finale et de terminaison des amplifications à 72°C pendant 10
minutes
Appareil 3 : Termocycleur Perkin-Elmer :
e 1 cycle de dénaturation préliminaire de I’ADN à 94°C pendant 4 minutes
0 45 cycles des trois étapes suivantes :
-
dénaturation de la double hélice à 92°C pendant 1 minute
-
fixation des amorces à 36°C pendant 1 minute, et
-
extension des fragments à 72°C pendant 2 minutes.
m 1 cycle d’extension finale et de terminaison des amplifications à 72°C pendant 10
minutes.
A la fin de l’amplification, 5 ul de bleu de bromophénol sont ajoutés dans les puits de
la plaque PCR.
37
34.4. Séparation et rév(blation des bandes
Le gel d’agarose à 1,8% (Annexe) a été utilisé pour la séparation des bandes par
migration. Un volume de 12 ul de la solution contenue dans les puits de la plaque
PCR est transféré dans les puits du gel. Une solution étalonnée, le ladder Mix (Gene
Rule? DNA 0,4mg/ml), est déposée dans un puits de chaque ligne de peignes dans
le but déterminer la taille des bandes obtenues.
Au bout de 5 heures de migration, les gels sont trempés dans une solution de
Bromure d’Ethidium (BET) à la concentration initiale de 125 mgll pendant 7 à 10
minutes avant d’être rinces dans un bain d’eau déminéralisée. Les bandes color6es
par le BET sont visualisées à l’aide d’un transilluminateur à lumière ultra violette.
Les gels sont ensuite photographiés avec un film Polaroïd 665.
Les bandes révélées sont lues en terme de présence (1) ou d’absence (0) pour
chaque amorce testée. Chaque bande colorée correspond à un fragment d’ADN. Les
bandes migrent par ordre decroissant en fonction de la taille des fragments d’ADN.
Chaque puits correspond à un individu avec plusieurs bandes horizontales.
34.5. Amorces testées
Parmi les amorces testées, seules celles qui ont fourni les profils les plus
polymorphes et ont permis une amplification de tous les individus sont retenues.
Ainsi, après criblage 8 amorces ont été retenues : Y02, Y06, Y07, YlO, R15W06,
W07 et WIO.
34.6. Estimation ‘des distances génhiques
L’analyse de la matrice de données permet de classer les individus les uns par
rapport aux autres en utilisant les indices de similarité. Ces indices permettent de
comparer les individus 2 à 2. Ainsi, la méthode de Neighbor Joining Tree, basée sur
le critère de voisinage relatif, a été utilisée pour calculer la matrice de similarité par
la méthode UPGMA. Le logiciel Darwin 3.5 a permis de transformer les matrices de
similarités en matrices de dissimilarit& sur lesquelles les distances génétiques ont
été calculées et traduites sous forme d’arbres phénétiques.
38
Pour les marqueurs dominants, les indices de Jaccard (1908) et de Sokal et
Michener (1958) sont les plus couramment utilises (Perrier, 1998). L’indice de
Jaccard ne prend en compte que les doubles présences, alors que celui de Sokal et
Michener prend en compte les doubles présences et les doubles absences de
bandes.
L’indice de Dite (1945) accorde un poids 2 fois plus élevé à la double présence de
la bande.
Mesures de la diversité génétique au niveau intra-population ou intra-espèce:
A : le nombre moyen d’allèles identifies dans la population
P : le taux de polymorphisme est le nombre de locus polymorphes par rapport
a’u nombre de locus étudiés.
HB: la diversité génétique de Nei exprime la probabilité pour que deux genes
tirés au hasard dans une population soient différents. Elle est définie par N
= 1 - I$i” , où pi est la fréquence de I’allèle i au locus considéré, HBest
équivalent à I’heterozygotie théorique sous l’hypothèse de HardyWeinberg.
H,,: Proportion de locus hétéroaygotes observés par individu
Elles varient de 0 à 1. Lorsque la distance est égale à zéro, cela signifie que tous
les individus ou populations sont identiques. Par contre lorsque la distance est égale
à 1, les individus ou populations n’ont aucune bande en commun. Les distances
suivantes ont eté utilisées :
*
Distance de Néi (1978) : m (i>j)= a + d
m = nombre total de bandes
a = nombre de bandes présentes chez les individus i et j
*
Distance de Jaccard (1908) : D (i,j) = 1 - a / a + (b + c)
b = nombre de bandes présentes chez i , absentes chez j
c = nombre de bandes absentes chez i , présentes chez j
*
Distance de Sokal et Michener (1958) : D = 1 - a / a + 2(b + c)
a Distance de Dite (1945) : D = 1 - 2a / a + 2(b + c)
39
4. RESULTATS
41, BtOlOG1E DE LA REPRODUCTION
tes techniques de pollinisation contralée permettent de mettre au point des hybrides
intra-spécifiques performants pour les caractères ciblés.
41.1. Suivi phbmbogique
Au cours des deux saison d’observation, la floraison a commencé au mois de juillet.
Plus de 50 % des arbres suivis portaient des fleurs à cette période. C’est au courant
du mois d’août que tous arbres sont en floraison. La quantité de fleurs est variable
d’un arbre à l’autre en fonction de l’importance de la branchaison. Cette floraison se
poursuit jusqu’à la fin du mois d’octobre début novembre, avec cependant une faible
intensité.
Par contre, la fructification commence généralement au mois de septembre environ
25 % de l’arbre. A cette période, plus de 75 % des arbres sont en fructification. La
maturation des fruits intervient entre octobre et novembre.
Pendant la période d’observation, tous les arbres suivis ont produits des fruits dont
la quantité varie d’un arbre à l’autre et d’une année à l’autre.
40
Temps en heures
2
4
6
8 10 121 14 161 18 20 22 24
I
1
t
I, _” ~...^
Fleurs
du._,matin
. .._
.^._
._. .”
.^..^” ,,
1-ouverture
2
4
6
8 10 12 14 16 18
1
1
2
1
r
t
des boutons floraux
2-ouverture des anthères (libération
grains de pollen)
3-viabitite des grains de pollen
-l-ouverture
des boutons floraux
2-ouverture des anthères (libération
des grains de pollen)
3-viabilité des grains de pollen
4-réceptivité
du stigmate
Figure 4 : Dynamique journalière
rkepfivité
des stigmates.
d’ouverture
des fleurs de Z. mauritlana,
de maturité
des grains de pollen et de
Les zones en grisé indiquent les périodes où la pollinisation entre fleurs du matin et fleurs de l’après-midi est possible, la période 1
correspond à la pollinisation des fleurs du matin par le pollen des fleurs de l’après-midi et la période 2 correspond à la pollinisation des fleurs
de l’après-midi par le pollen émis par les fleurs du matin.
44
41.32. A#atu(ft~ des gmins de pollen
Les observajions faites sur le terrain et rassemblées dans la Figure 4 montrent que,
pour les fleurs qui s’ouvrent le matin, la déhiscence des anthéres, qui correspond à
la maturité des grains de pollen, a Iieu entre 9 heures et 10 heures. Quant aux fleurs
de i’après-mi&, leurs anthères s’ouvrent entre 14 heures et 15 heures.
Les essais de transferts de pollen effectués pendant des intervalles de temps, ont
confirmé les bériodes de maturité des grains de pollen.
La viabitité des grains de pollen fraîchement récoltés révélée par le test
Ruorochromdtique est de 92% environ. Ceci est en phase avec la fructification
obtenue pari transfert manuel de pollen juste après l’ouverture des anthères. Par
contre, le tebt effectué à partir d’anthères récoltées 3 heures après ouverture ne
sont négatifs! car celles-ci ne contenaient plus de grains de pollen.
Les grains de pollen conservés à température ambiante perdent rapidement leur
viabilité qui q’est plus que de 30 % au bout de 24 heures.
Les observations en microscopie électronique à balayage ont montré que la forme
des grains d$ pollen de Ziziphus maurifiana est subovaie (Photo 5).
En germinatibn, on observe la présence d’un seul tube pollinique. II n’a pas été
possible de c/éterminer le nombre de grains de pollen par anthère compte tenu du
fait qu’ils se @kentent sous forme de poudre.
45
Tableau f : bollinisation contrôlée et pollinisation naturNe chez le jujubier
1. EntreR~U+ du matin
L’absence db fructification, après pollinisation contrôlée entre fleurs d’un même
arbre, montre que l’auto-pollinisation n’a pas donné de fleurs. Par contre, des fruits
sont obtenus dans le cas de poliinisation entre arbres dont les fleurs s’ouvrent le
matin et arbres dont les fleurs s’ouvrent l’après midi.
La pollinisatron croisée (allogamie) entre pieds différents semble être la règle chez
le jujubier. En outre, la manipulation des fleurs lors des transferts de pollen pourrait
justifier la diminution du pourcentage de fruits arrivés à maturité.
47
i41.42. A&x#ede poilinkation
L’utilisation du ruban adhésif n’a pas permis de capturer des grains de pollen
transportés dar le vent. Le vent n’interviendrait pas dans le transport du pollen chez
le jujubier.
Les observa/ions faites sur le terrain, ont montré que les insectes qui visitent les
fleurs de jujubier jouent un grand rôle dans le transport du pollen. Les captures
effectuées sur les arbres ont montre que les Hyménoptères (abeilles, guêpes) sont
les principaux transporteurs de pollen, en particulier ceux appartenant aux genres
Apis et Cypfionomyx (Photo 7). On rencontre également beaucoup de coléoptères
du genre Lycus et Mylabtis. Le comptage de grains de pollen sur les insectes
capturés a permis de déterminer la charge pollinique relative pour chaque type
(Tabieau 2).:
A la lumière de ces résultats, il apparaît que la pollinisation chez le jujubier est
essentielle+nt
entomophile.
Tableau 2 : Charge poIlinique relaiive des insectes intervenant dans la
Genre Espke
Nombre d’insectes Quantité
pokn
C@WbS
4
Pompifidae j Cypnonomyx Croceicomus
de
trsarurpo~
17
!
Apis melfifrca
Lycidae
: Lycffs semiaplexus
t
9
65
32
26
13
9
3
7
I
Sphscidae _ Amrnophilacyanipennis
1
Sampogonmdampygus
48
4.2.VARlAW&lTE MORPHOtOEIQUE
42.1. Poids moyen des fruits
L’analyse st#istique montre des différences significatives entre les provenances
(Figure 5).
40
cl
a
Il
b
30
7
d
E
-
d
-
10
0
i
I
nba
Tchad
Sessène Dahra
Abel
Provenances
Gambie
KST
KST = Keur Ser$pe fouba
Fîgm? 5 : Ponds moyen de loi? fruîts
Ainsi le test de Newmans-Keuls au seuil de 5% fait ressortir 4 groupes homogènes
(a, b, c et d). La provenance de Colomba possède les fruits les plus lourds (43,359 f
i ,19). Elle est suivie des provenances du Tchad (39,95g & 1,69) et de Sessene
(38,8Og -1.2,5”1).Les fruits les plus légers sont rencontres dans les provenances de
Keur Serigne Touba (22,Ol g f 0,Sl) et de Gambie (23,71 g I!I 1,59).
42.2. Forme et ornementation du noyau
D’une manière générale, pour l’ensemble des provenances, le noyau est tantôt
arrondi, tant@ ovale ou subovale (Photo 8).
Photo 8 : Cknementation du noyau chez le jujubier (Echelle il / 3)
Cependant, les provenances de Sessène, Colomba et de Ibel présentent un noyau
crevassé; alors que celles de Dahra et de Gambie ont un noyau dont les sillons sont
moins profonds. Par contre, le noyau des provenances de Keur Serigne Touba et du
Tchad présente une surface moins fugueuse. La surface du noyau est variable en
fonction desprovenances.
42.3. Dimensions du fruit
Les résultats montrent que les fruits de la provenance de Dahra présentent une
longueur grand axe ( 10,09 mm P 0,03) supérieure à toutes les autres provenances
Tandis que la plus faible longueur (7‘60 mm +0,12) est rencontrée au niveau des
fruits de la provenance de Keur Serigne Touba. Le test de Newman-Keuls au seuil
de 5 % a donné des différences significatives (Figue 6).
51
De meme, les mensurations effectuées sur le petit axe, font ressortir un premier
groupe homogène de 3 provenances : Sessène (8,49 mm + 0,13), Colomba (8,47
mm k 0,ll)
et Tchad (8,14 mm + 0,28). Ce groupe est suivi d’un second avec des
longueurs petit axe plus faibles
Gambie (7,21 mm k 0,31), Keur Serigne Touba
(7,16 mm + 0,09), Dahra (7,08 mm zt 0,06) et Ibel (6,30 mm -t 0,34). Il ressort de ces
résultats que les fruits de la provenance Dahra sont plus ovales alors que ceux de ta
provenance Abelsont arrondis.
Cl Longueur grand axe
Cl Longueur petit axe
T
I
Color@ba Dahra
I
7
11
Gambie
b
/
Ibel
KST
Provenances
&ST = Keur SerigneTouba
Figure 6 : Dimemium des fmits
52
7
b
c
Sessène
Tchad
.
42.4. Forme des graines et nombre par fruit
tes graines des différentes provenances présentent toutes une face aplatie et une
face opposég connexe (Photo 9).
Photo 9 : Formes des graines en fonction des provenances
te comptage du nombre de graines par fruit a montré que tous les fruits de fa
provenance du Tchad possèdent 2 graines (Figure 7).
L-
OI gr.
cl2 gr.
Co$mba
Dahra
Gambie
Ibel
KST
Sessène
Tchad
Provenances
KST= Keur SqrîgneTouba
Figure 7 : VL@ation du nombre de graines par fnrit et par provenance
53
Les fruits de toutes les autres provenances ont une ou deux graines. Parmi celles-ci,
la provenance Gambie renferme plus de fruits à une graine. Les provenances de
Sessène, lb& et Colomba ont plus de fruits à 2 graines que de fruits à une graine.
La provenance de Keur Serigne Touba est la seule à avoir le même nombre fruits à
une graine qu’à 2 graines.
Le nombre de graines par fruit est variable en fonction des provenances. Il n’a pas
été rencontrd de fruits n’ayant pas de graine.
42.5. Dynamique de la germination des graines
48h
72h
Temps (heures)
KST= KeurSqigne Touba
Figure 8: H@sse de la gwminatim
des graines par provenance.
Une graine ht considérée comme ayant germé lorsque les cotylédons s’écartent
pour laisser I+Iradicufe émerger (Côme, 1970). Les comptages effectués ont permis
de tracer la courbe (Figure 8) de la dynamique de la germination pour chaque
provenance et de comparer les provenances entre elles.
L’observation des courbes montre que toutes les graines de la provenance de Dahra
germent au bout de 48 heures d’incubation. La provenance de Colomba vient en
deuxième position avec plus de 80 % de graines ayant germe dans le même temps.
Les plus faibles taux de germination obtenus au bout de 48 heures ( moins de 20
%) * sont rencontrés avec les graines des provenances de Gambie, Sessène et Keur
Serigne Touba.
Après 72 heures d’incubation, toutes les graines de toutes les provenances ont
germé. Les graines des provenances de Dahra et Colomba germent plus vite que
celles des autres provenances.
:42.6. tes cotylédons
Les mesures effectuées sur le grand axe ont montré que la provenance de Colomba
présente la plus grande longueur de cotylédon (1,71 cm f 0,16 ), alors que la plus
petite longueur a été rencontrée au niveau des provenances de Ibet (1,29 cm k
0,16) et de Keur Serigne Touba (1,29 cm k 0,21). L’analyse statistique effectuée, à
partir des valeurs obtenues sur le petit axe des cotylédons, révèle l’existence de
deux groupe@homogènes (test Newman-Keuls au seuil de 5 % ). Le premier groupe
comprend IeS provenances de Dahra, Colomba, Sessène, Tchad et Gambie et le
second groupe comporte les provenances de Ibel et Keur Serigne Touba.
Les résultats ont montré qu’au stade jeune plant, les feuilles présentent toutes une
triple nervation partant de la base en divergeant vers le sommet. Elles sont toutes
situées à l’aisselle d’une seule épine. Toutefois, la forme et la couleur présentent
des variationp d’une provenance à l’autre.
55
.
:,.
42.8. Croissance des jeunes plants
Apparition des premières feuilles
Pour toutes les provenances, les premikes feuilles apparaissent 6 jours après les
semis en pépinière. Les différences apparaissent au niveau du nombre de plants
potiant les feyillesU(Figure 9).
6
7
8
KST= KeurS$rÎgneTouba
Figure 9 : Vïfesse d’apparifion des premières feuilles par provenance
Les provenances de Dahra et du Tchad possèdent le nombre le plus élevé de plants
(plus de 80 ‘%) portant les premières feuilles au premier jour de leur apparition.
Toutes les autres provenances n’ont pas plus de 30 % des plants qui portent ces
feuilles. Cependant, au bout de 3 jours, tous les plants de toutes les provenances
portent les pkmières feuilles.
56
Apparifion t$es deuxièmes feuilles
Les deuxièmes feuillent comment à apparaître au onzième jour (Figure IO), c’est-àdire
2 jours après les premières feuilles. On constate que, quasiment tous les plants
de ia provenance du Tchad portent les deuxièmes feuilles dès le premier jour de leur
apparition. Les plants de la provenance de Dahra portent tous les deuxièmes feuilles
au deuxième jour de leur apparition. Toutes les autres provenances ne sont pas à
plus de 50 % de plants au deuxième jour. Au 13 éme, tous les plants de toutes les
provenances portent les deuxièmes feuilles. Les deuxièmes feuilles apparaissent
plus tôt chez les provenances du Tchad d’abord puis de Dahra.
0
11
12
KST= Keur S@igneTouba
Fîgwe 10: Vitesse dFappantion des deukiémes feuilles par provenance
13
Appafifion des froisiémes feuilles
Les troisièm+3 feuilles apparaissent au bout de 22 jours après semis, c’est-à-dire
plus d’une semaine après l’apparition des deuxièmes feuilles. Pour les provenances
de Dahra et du Tchad, tous les plants portent les troisièmes feuilles au premier jour
de leur appar’ition(Figure Ii). Au premier jour, toutes les autres provenances sont à
moins de 50 % de plants. Au vingt quatrième jour, tous les plants de toutes les
provenances ,portent les troisièmes feuilles.
0
0
22
23
KST= Keur S&igne Touba
Figure 71: Vitesse d’apparition des troishhes
feuilles par provenance
24
ApparHfm &s quaff%mes feuilles
Pour
toutes les provenances, les quatrièmes feuilles apparaissent 4 jours après les
troisièmes feuilles, c’est-à-dire au 2Qéme jour
(Figure 12). Au premier jour
d’apparition, tes provenances de Dahra et du Tchad sont presque à 100 % de
plants, alors’les autres sont à moins de 50 %. Deux jours après, tous tes plants de
toutes les provenances portent les quatrièmes feuilles.
KST= Keur S#=igneTouba
FKSURE12: Vitesse d’
59
‘tien des quatr@hes feuilles par provenance
Apparition des cinquièmes feuilles
Pour l’ensemble des provenances, les cinquièmes feuilles ont commencé à
appara’itre deux semaines aprés les quatrièmes feuilles, c’est-à-dire au 4qgeme
jour
après semis (Figure 13). Seules les provenances de Oahra et du Tchad sont à 100
9%de plants portant les cinquièmes feuilles. Trois jours après leur apparition, tous
les plants de toutes les provenances portent les cinquièmes feuilles.
KST= Keur SerigneTouba
Figure 73: V&esse d’apparition des cinquièmes feuilles par provenance
60
Tableau 3 : synthèse de la vitesse d’apparition des feuilles
42.9. Teneur en sucre de la pulpe
La lecture de la teneur en sucre effectuée au réfractomètre a donné les valeurs
suivantes pour les différentes provenances étudiées.
Tableau 4 : teneur en sucre de la pulpe s6ch6e
Provenances
Dahra
Keur Serigne Touba
Niger
12 +0,6
L
La teneur moyenne de sucre pour l’ensemble des provenances est de II ,3. Les
tests de gustation effectués ont montré que la pulpe des fruits des provenances de
Keur Serigne Touba et du Niger est plus sucrée que celle des autres provenances.
Les distances génétiques calculées, montrent que la diversité intra population varie
de 0 à 0,92 pour un total de 30 locus étudiés.
La distance génétique de Nei (1978) a permis de constater que le nombre d’allèles
obtenus est compris entre 1,47 et 1,81. Le nombre d’allèles le plus faible est
observé chez les individus de la provenance de Bandia (Tableau 5).
Tableau 5 : vaniabilité génétique des provenances au niveau individuel
Les provenances de Sinthiou Koèl et du Niger ont plus de locus polymorphes. Ce
qui se traduit par un pourcentage de polymorphisme plus élevé au sein de ces
provenances. La provenance Bandia présente le plus faible taux de polymorphisme.
Ceci est en rapport avec le faible nombre d’allèles observés au niveau des individus
de la provenance. La diversité génétique la plus faible est rencontrée au niveau de
la provenanoe de Bandia (0,16).
Les mesures de ressemblances et dissemblances calculées sur les moyennes des
populations ont permis de déterminer les distances génétiques et les similarités
entre provenances (Tableau 6).
63
Tableau 6 : Simi!arit& et distances génétiques de Nei des provenances
I
I
Dahra
+----
Siimilarités
1
Keur Serigne Touba
+
I
Bandia
Sinthiou Koèl
Niger
I
X-.
0,9398
0,9309
Dahra
0,9424
I
_-
Keur
Serigne
0,07$6
0,9737
Touba
1
.-
Bandia
0,0621
Sinthiou Koèi
0,0593
0,0444
1
0,0267
Niger
0,1459
0,1294
+------
0,9592
0,8642
----l
0,8786
0,9325
0,0699
0,1541
Distances g&Wiques
-b
I\
Les distances génétiques calculées par la méthode de Néi (1978) montrent que la
plus faible distance génétique est entre la provenance de Sinthiou Koèl et celle de
Keur Serigne Touba (0,0267). Pour les provenances sénégalaises, la plus forte
distance génetïque se situe entre les provenances de Dahra et de Keur Serigne
Touba (0,0716). Les similarités sont plus fortes entre les provenances sénégalaises
par rapport à celles avec la provenance du Niger.
f
SîîhiouKa&l
Figure 74 : Dendrogtamme des distances génétiques de Nei calculées à partir
d&sm%rquwmRApD
64
I
I
Les valeurs de distances génétiques, calculées sur les moyennes des populations,
entre provenances sont représentées par le dendrogramme de la Figure 14. La
provenance du Niger semble génétiquement plus éloignée des provenances
sénégalaises. A son tour, la provenance de Dahra est plus éloignée des autres
provenances du Sénégal.
Par contre, l’arbre phénétique obtenu à partir de l’indice de Dite, calculé sur les
individus pris 2 à 2, montre que la provenance de Dahra est plus homogène que
celle de Keur Serigne Touba par exemple (Figure 15). Toutes les autres
provenances présentent une distri bution hétérogène.
-.
,-
,j
“.
._
.
‘.
.I
6 = Bandian , D = Dahra, N = Niger, S = Sinthiou Koèl, K = Keur Serigne Touba
M = 2 individus de Montpellier
C = 2 individus de Colomba
Figure 15 : Arbre phén&ique obtenu à partir de I’lndice de Dite.
65
_
..
..
LI
5. DISCUSSIONS
51. BIOLOGIE DE LA REPRODUCTK)N
Morphologie florale et Morphoséquence d’ouverture des fleurs
les fleurs de Ziziphus mauritiana sont hermaphrodites complètes et pentamères.
L’existence de fleurs qui s’ouvrent le matin et d’autres qui s’ouvrent l’après midi a
également notée chez Zizîphus spina- chrisfi (Galil et Zeroni; 1967) et Ziziphus
mucronata (Ziesteman; 1990). Four d”autres espèces, Acacia senegal (Diallo,l997),
Acacia albida (Gassama, 1996) et Acacia nilotica (Tybirk, 1989) les fleurs basales
des inflorescences s’ouvrent avant les fleurs médianes et terminales.
II a été démontre chez Ziziphus maunbana que les organes mâles arrivent à maturité
avant les femelles : on parle alors de protandrie. Le même phénomène a été
observé chez Ziziphus mucronafa (Ziestman, 1990) et la plupart des Mimosaceae
(Arroyo, 1981 ; Kenrick et Knox, 1982); a l’exception des Acacia australiens qui sont
protogynes pour la plupart (Sedgley et Harbard, 1983). En outre, on note que la
séparation des organes reproducteurs est temporelle
plutôt que
spatiale,
conformément aux résultats de Ziestman (1990) sur Z. mucronafa. On est en
présence d’une dichogamie intraflorale. En l’absence de recouvrement entre la
disponibilité des grains de pollen et la réceptivité du stigmate des fleurs s’ouvrant en
m8me temps, la dichogamie est dite complète d’après Lloyd et Barret (1996). Chez
le jujubier, il existe un décalage entre la maturité des grains de pollen et de
réceptivité du stigmate. Ce résultat s’oppose à ceux obtenus chez Acacia senegal
(Diallo, 1994) et Acacia nilotica (Tybirk, 1989) dont la maturité des grains de pollen
est synchrone avec la réceptivité des grains de pollen et la réceptivité du stigmate.
Aussi, des travaux ont montré que les acacias australiens sont généralement
protogynes (Sedgley et Harbard, 1983). La duree de viabilité des grains de pollen ne
dépasse généralement pas 24 heures à température ambiante.
66
En conditions de germination, le grain de pollen ne donne naissance qu’à un seul
tube pollinique; alors que ce nombre est variable chez les grains de pollen de la
plupart des espèces du genre Acacia. De même, le stigmate réceptif ne reçoit qu’un
seul grain de pollen. Un résultat similaire a été obtenu sur Acacia albida
fGassama,1996), Acacia senegal (Diallo, 1997), Balanifes aegypfiaca (Ndoye I%I),
Saba senegalensis (fraoré, 2000) et Anacardium occidentale (Niang, 2002). En
effet, la présence de plus d‘un grain de pollen est un phénomène rare chez les
piantes supérieures.
Mode de reproduction et insectes intervenant dans la pollinisation
La présence chez le jujubier d’arbres dont les fleurs s’ouvrent le matin et d’autres
dont les fleurs s’ouvrent l’après midi constituent un moyen efficace pour l’espèce de
rentabilisé l’investissement mâle. En effet, on constate une importante production de
fruits chez le jujubier
La pollinisation controlée a permis démontrer que le mode de pollinisation est
allogame car s’effectuant entre fleurs du matin et fleurs de l’après midi portées par
des arbres differents. Le même résultat a été obtenu chez Ziziphus spina-chrisfi
(Galil et Zeroni, 1967) et Ziziphus mucronafa (tietsman, 1990). Cette pollinisation
allogame a également été mise en évidence chez certaines espèces telles que
Aacaia senegal (Diallo, 1997), Acacia a/bida (Gassama, 1996) et Anacardium
occidentaIe (Niang, 2002). Pour ces espèces, les auteurs ont montré également
l’existence d’une auto-pollinisation au sens large. L’allogamie offre un grand
avantage dans les programmes d’amrHioration génétique, en favorisant le brassage
de gènes entre individus d’une même population ou de populations différentes. En
effet, par son biais, il est possible de rassembler au sein d’un même individu des
caractères sélectionnés sur deux individus en contrôlant le transfert de pollen.
67
Dans les conditions naturelles, le transfert du pollen est assuré par des agents
vecteurs. Chez Ziziphus maurifiana, les r&ultats ont montré que la pollinisation est
essentiellement assurée par les insectes (abeilles et gutEpes). C’est le cas pour
Ziziphus mucronata (Zietsman , 1990), Acacia albida (Gassama, 1996) et Acacia
nilofica (Tybirk, 1989). D’après Kevan et Baker (l983), le seul élément d’attraction
des insectes chez Ziziphus mucronata est la couleur jaune des fleurs fraîches. Cette
couleur attirerait préférentiellement les Diptéres. Le changement de couleur
permettrait aux insectes de distinguer «les récompenses» offertes par la fleur en
réceptivité ou non.
Le dégagement d’odeur par les fleurs est perçu par certains insectes telle que les
abeilles butineuses. A cet effet, Renner (1990) note que l’émanation d’odeur joue
un rôle important dans les premiers rapports plante / pollinisateur. Ainsi, les abeilles
et les guêpes, en particulier les esp8ces des genres Apis, et Cyphonomyx, sont les
principaux insectes qui interviennent d:ans la pollinisation des fleurs chez Ziziphus
maurifiana. La présence des abeilles au niveau des fleurs renseigne sur la nature du
nectar. En effet, d’après Willner (1983) et Corbet (1990), les abeilles préférent du
nectar concentré riche en sucres. L’importance des abeilles dans la pollinisation des
fleurs a également été signalée par Bernhardt (1989).
Parmi les coléoptères qui fréquentent les fleurs de jujubier, I’espéce Lycus
semiaplexus est la plus présente en terme d’effectif et de durée de présence. Margr4
leur faible mobilité, ces coléoptères jouent un rôle dans le transfert des grains de
pollen contrairement à ceux rencontrés sur Acacia senegal( Diallo, 1997).
On n’a pas rencontré de pollen étranger sur tes insectes qui ont été collectés sur les
fleurs de Ziziphus mawitiana : on parle alors de constance florale comme cela a été
observé chez Ziziphus mucronata (Zietsman, 1990). En conclusion on peut dire que
la régénération des peuplements naturels de Ziziphus mauritiana ne devrait pas
constituer une contrainte majeure, du fait que les pollinisateurs de l’espèce sont bien
présents présageant ainsi une production fruitière importante,
68
52. VARIABSLITEWIORPHOLOGIQUE
Les différents parametres étudiés ont permis de deceler une variabilite au sein des
provenances. En effet, les fruits dépulpes des provenances de Colomba, Sessène et
du Tchad sont plus lourds que ceux des autres provenances. Parmi les provenances
du Sénégal, il n’existe pas a ptioti de corrélation entre le poids des fruits et l’origine
géographique. La provenance de Dahra, située dans la zone sytvopastoraie,
caractérisée par une pluviométrie refativement faible (en moyenne 250 mm),
possède des fruits plus lourds que ceux de la provenance de Keur Serigne Touba,
située dans le sud du bassin arachidier (Sokone), avec une pluviométrie moyenne
annuelle de 500 mm. En outre, tes fruits de la provenance de Ibel, à l’est du pays
avec plus de 900 mm de pluie par an, sont beaucoup plus légers que ceux de
Sesséne recevant près de 400 mm de pluie.
Les observations faites sur la forme et l’ornementation de l’endocarpe ont montre
une différence entre les provenances du Sénégal. Les provenances de Dahra et
Keur Serigne Touba présentent les endocarpes les moins crevassés contrairement
aux autres provenances. Toutefois, on note l’absence de corrélations entre la forme
de l’endocarpe et l’origine géographique. Les provenances étranger-es présentent un
endocarpe moins rugueux comparativement à la plupart des provenances
sénégalaises. Du point de vue de la forme de l’endocarpe, il n’existe pas de formes
particufières. D’une maniére générale au sein de chaque provenance plusieurs
formes sont rencontrées.
L”analyse des résultats, relatifs à la forme du fruit, montre que la provenance de
Dahra présente les fruits les plus allongés. Par contre les fruits des provenances de
Colomba, Sessène et du Tchad sont légèrement ovales avec un rapport grand axe
sur petit axe assez faible. La provenance de Keur Serigne Touba présente la rapport
grand sur petit axe le plus faible. Aussi, il ne semble pas exister de corrélation entre
ta dimension du fruit et l’origine géographique.
69
Quant à la forme des graines et au nombre de graines par fruit, les provenances
senégalaises présentent une grande variabilité. En effet, pour les provenances
situées dans des zones relativement pluvieuses (Ibel, Colomba et dans une moindre
mesure Sessène), le nombre de fruits possédant deux graines est de loin plus
important. Seule la provenance de Keur Serigne Touba présente le m$me nombre
de fruits à deux graines qu’à une graine. En conséquence le nombre de graines par
fruit pourrait être un facteur à prendre en compte dans la recherche de paratitres
de discrimination entre provenances, du moins pour ce qui concerne les
provenances sénégalaises.
II n’existe pas de relation étroite entre le poids des graines et te nombre de graines
par fruit. Les fruits de la provenance Ibel sont parmi les plus légers, mais possèdent
quasiment le même nombre de fruits à deux graines que la provenance Colomba qui
a pourtant les fruits les gros. La provenance du Tchad se caractérise par de gros
fruits qui possèdent tous deux graines.
On note que la vitesse de germination varie d’une provenance à l’autre. En effet, la
provenance de Dahra située dans la zone la moins pluvieuse présente la vitesse de
germination la plus grande avec un poids moyen de fruit. tl est à noter aussi que, la
vitesse de germination la plus faible est rencontrée au niveau de la provenance de
Gambie. A la différence des résultats de Wrzesniewski (1982 b) et de Ly (1998), il
n’y a pas de corrélation entre le poids de la graine et la vitesse de germination.
La même conclusion a été tirée par Guèye (1997), qui estime que l’influence du
poids sur ta prégermination varie en fonction des espèces. Bonner (1987) affirme
que les grosses graines présentent un avantage partiel sur les petites, du fait de la
présence de gros embryons et de cotylédons. A l’opposé, Gonzates (1993) estime
que la taille de la graine n’est pas un bon paramètre de prédiction de la
germination..
les résultats ont montré que la germination n’était pas corrélée avec la pluviométrie.
En effet, on constate que les taux de germination les plus élevés, après 48 heures,
ont été obtenus avec les provenances de Dahra (recevant environ 250 mm de pluie
par an ) et de Colomba (recevant environ 700 mm de pluie par an) qui sont situées
dans des zones géographiques diff&entes.
70
Les mensurations effectuées sur les cotylédons ont permis de constater l’existence
d’une corrélation entre la longueur du grand axe et le poids des fruits. D’une
manière générale, les longueurs les plus grandes sont rencontrées chez les fruits
les plus lourds.
En ce qui concerne la vitesse d’apparition des feuilles, les provenances de Dahra et
du Tchad se distinguent nettement des autres. De la première à la cinquième feuille,
ces deux provenances sont les premières à porter chaque feuille. Généralement,
tous les pieds des deux provenances portent les feuilles au premier jour
d’apparition. Pour toutes les autres provenances, c’est au troisième jour que tous les
pieds portent les feuilles concernées. Pour chacune des feuilles, toutes les
provenances se retrouvent au meme niveau trois jour après l’apparition. Dés lors, on
peut dire que la croissance juvénile est plus importante pour les provenances de
Dahra et du Tchad, tout au moins jusqu’à l’apparition de la cinquième feuille.
Ainsi, on constate que la provenance de Dahra, qui a présenté la meilleure vitesse
de germination, a conservé cet avantage en terme de croissance juvénile. Par
contre, la provenance de Colomba qui avait une bonne vitesse de germination ne
pr&ente pas une bonne croissance juvénile.
A la lumière de ces constations et conformément aux résultats obtenus par Gu&ye
(l997), if apparaît clairement qu’il n’existe pas de corrélation entre la taille des
cotylédons et la croissance des plantules, contrairement aux r&ultats de Howe et
Richter (1982). Ces auteurs estiment que d’une manière générale, les grosses
graines ont beaucoup plus de nutriments pouvant influencer positivement le
développement des plantules. Les auteurs Lindgren (1982), Campbell et Sorensen
(1984), estiment toutefois que la sélection des graines suivant leur taille va réduire
de façon certaine la variabilité génétique existant au sein des espèces. C’est dire
avec Kuser et Ching (1981) que les facteurs génétiques et environnementaux
méritent d’être pris en compte dans ces analyses.
Dans le souci de conserver toutes les potentialités des espèces, en vue d’une part
de la préservation de la biodiversit6, et d’autre part de leur exploitation dans un
programme d’amélioration adapté, il apparaît indispensable
maximum de variabilité en leur sein.
71
de maintenir le
Les graines Mant souvent issues de pollinisation croisée, du moins pour beaucoup
d’espèces des zones sèches, elles offrent l’avantage d’emmagasiner la diversité
g&étique des populations de l’espèce considérée. En conséquence tes critères
morphologiques méritent d’être complétés par des critères génétiques pour une
meilleure évaluation de la variabilité de l’espèce dans une aire de distribution
donnée.
La provenance de Keur Serigne Touba a la pulpe plus sucrée que toutes les autres
provenances. Comparativement aux résultats obtenus en Inde (Vashishtha, 1997), la
pulpe des fruits provenances sénégalaises est cependant moins sucrcle (entre 10 et
123 % contre 14 à 16 % en Inde). La comparaison entre la teneur en sucre de la
pulpe et ie poids des fruits révèle que les fruits de la provenance de Keur Serigne
Touba étaient les pius petits. On constate alors que la pulpe des fruits de petite taille
est relativement plus sucrée que celle des fruits plus gros.
72
53. VAWA&&dTE OENETIQUE
Toutes les provenances étudiées possèdent une moyenne de plus de 50 % de
locus polymorphes. Hormis la provenance de Bandia, toutes les autres provenances
se caractéri$ent par une diversité génétique importante. La variabilité intra
provenance semble importante chez le jujubier à l’exception des individus de la
provenance de Dahra qui apparaissent regroupes dans l’arbre phénétique. En effet,
les distances de Dite renseignent mieux sur fe niveau de variabilité individuelle des
provenances. Sina (1998) qui a travaillé sur les iso-enzymes, a montré que les
populations de Parkia biglobosaétaient très polymorphes. Ce polymophisme est
cependant inférieur à celui trouvé par Joly ef a/. (1992), à partir des iso-enzymes,
chez Acacja albida.
Les distances génétiques ont révélé une forte différenciation entre les provenances
du Sénégal et celle du Niger. La différenciation est plus faible entre les provenances
s&nf!fgalaises.
La variabilite inter provenances est importante entre les provenances sénégalaises.
Ceci laisse penser l’existence d’échanges de matériel génétique à travers les
mouvements des populations humaines. Hamrick et a/. (1992) estiment que la
répartition géographique constitue le facteur le plus important dans la différenciation
génétique inter populations. En conséquence on peut dire que la variabilité intra
provenance est du même ordre que la variabilité inter provenances. Les distances
génétiques ne semblent pas btre en corrélation positive avec les distances
géographiques en ce qui concerne les populations sénégalaises. En effet, la
distribution des individus des provenances observée dans l’arbre phénétique a
révéle une grande hétérogénéité au niveau de toutes les populations exception faite
de celle de Dahra.
L’augmentation du nombre d’échantillon de manière à couvrir toute l’aire naturelle
de dispersion de l’espèce pourrait permettre une meilleure connaissance des flux de
gènes entre populations, et partant les centres de différenciation.
73
6. CONCLUSION GENERALE ET PERSPECTIVES
Le jujubier est une espèce protandre dont les fleurs de certains arbres s’ouvrent le
matin et d’autres l’après midi. De ce fait, la pollinisation a lieu entre grains de
pollen de fleurs s’ouvrant le matin et stigmates de fleurs s’ouvrant l’après midi et
inversement. On est en présence d’une pollinisation allogame. En effet, aucun fruit
n’a
été
obtenu après pollinisation entre fleurs du meme arbre ou au sein d’une
même fleur. Les grains de pollen matures restent viables pendant environ 24
heures à température ambiante. De meme, la réceptivité stigmatique dure environ
20 heures. Le stigmate réceptif ne peut recevoir qu’un seul grain de pollen.
Dans les conditions naturelles, la pollinisation est rendue possible grâce aux
abeilles et guêpes essentiellement. Les coléoptères jouent un rôle moins important
dans le transfert du pollen compte tenu de leur faible mobilité.
La maîtrise des techniques de pollinisation contrôlée, permet d’envisager la création
d’hybrides intra spécifique chez le j;ujubier par recombinaisons génétiques. Les
croisements avec les variétés indiennes introduites peuvent permettre de mettre au
point des individus présentant de gros fruits dont la pulpe peut être consommée
conformément aux habitudes alimentaires des populations
sénégalaises.A ce titre,
les croisements génétiques permettent d’exploiter la variabilité existante dans les
peuplement+5naturels.
L’évaluation de la variabilité a montré qu’il existe bien des différences entre les
provenances du point de vue des paramètres morphologiques. En effet, ta
provenance de Keur Serigne Jouba présente les plus petits fruits mais aussi les plus
sucrés. La $rosseur
du fruit ne semble pas en correlation positive avec des facteurs
,:
climatiques telle que la pluviométrie. II en est de même de la taille des cotylédons et
du nombrede graines par fruit. La croissance juvénile n’est pas toujours corréfée à
la taille des fruits. Elle pourrait constituer cependant un bon critère de discrimination
entre provenances.
74
La variabilité génétique révélée par les marqueurs RAPD a permis de constater une
diversité génétique importante pour toutes les provenances. Les paramètres
génétiques tels que le nombre d’allèles polymorphes, le nombre d’allèles observés
et le pourcentage de polymorphisme varient d’une provenance a l’autre. La
variabilité intra provenance est aussi forte que la variabilité inter provenances. Les
distances génetiques ne sont pas en corrélation positive avec les distances
géographiques en ce qui concerne les provenances sénégalaises. Ces provenances
sont cependant toutes éloignées génétiquement et géographiquement de la
provenance nigérienne. Aussi, les similarités sont plus fortes entre les provenances
sénégalaises qu’entre celles-ci et celle du Niger.
Sur la base de la maîtrise des techniques d’hybridation contrôlée et de la forte
variabilité absentée, tant au sein des provenances qu’entre tes provenances, d’une
part et compte tenu des acquis capitalisés dans d’autres pays, notamment
asiatiques, d’autre part, un schéma d’amélioration du jujubier devrait pouvoir
s’articuler autour des axes suivants :
*
la sélection d’individus, en rapport avec les populations locales, présentant des
critères intéressants (bonne production de fruits, qualité de la pulpe,...) dans
toute l’aire de répartition de I’espéce au Sénégal,
0 le clonage {greffage horticole etlau microgreffage) d’individus et/ou de variétés
performantes (telle que la variété Gola d’Inde) dans le but de réduire la pression
sur les formations naturelles et satisfaire les besoins des populations,
*
les recombinaisons génétiques entre les variétes introduites et les meilleurs
individus locaux de maniére à mettre au point des génotypes performants et
adaptés aux besoins des populations.
Ces actions constituent des étapes importantes dans le processus de domestication
du jujubier. Cette domestication débouchera sur une utilisation, par les populations,
du jujubier dans les vergers de production à l’image des agrumes et manguiers.
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LISTE DES ~AA3REVIATlONS
ADPI : Acide Désoxyribonucléique
BET : Bromure d’Etidium
CILSS: Comité Inter-Etat de Lutte Contre la Sécheresse au Séhel
CIRAD :Centre pour la coopération Internationale et la Recherche Agronomique
pour le Développement
CNRF : Centre National de Recherches Forestières
C@?AF : Conseil Ouest et Centre Africain pour la Recherche Agricole et le
Oliveloppement
CRZ : Centre de Recherches Zootechniques
DEFCCS : Direction des Eaux, Forêts, Chasses et Conservation des Sols.
FAO : Organisation des Nations Unies Pour l’alimentation et l’Agriculture
IFAN : Institut Fondamentale d’Afrique Noire
KWW : International Council for Research in Agroforetry
W4.A : Institut Sénégalais de Recherches Agricoles
PCR : Polymerase Chain Reaction
RAP0 : Random Amplified Polymeraae DNA
87
LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Principe du polymorphisme détectéavec les marqueurs arbitraires RAPD
Figure 2 : Carte des zones écogéographiques du Sénégal
Figure 3 : Répartition des provenances sénégalaises de jujubier
Figure 4 : Dynamique journalière d’ouverture des fleurs
Figure 5 : Poids moyen de 100 fruits
Figure 6 : Dimension des fruits
Figure 7 : Variation du nombre de graines par fruit et par provenance
Figure 8 : Vitesse de germination des graines par provenance
Figure 9 : Vitesse d’apparition des premi&es feuilles
Figure 10 : Vitesse d’apparition des deuxièmes feuilles
Figure 11 : Vitesse d’apparition des troisièmes feuilles
Figure 12 : Vitesse d’apparition des quatrièmes feuilles
Figure 13 : Vitesse d’apparition des cinquièmes feuilles
Figure 14 : Dendrogramme des distances génétiques de Nei
Figure 15 : Arbre phénétique obtenu à partir de l’indice de Dite
88
LISTE DIES PHOTOS
Photo 1 : Jujubier $9é de 7 ans
Photo 2 : Etamines disposées en un cycle de 5
Photo 3 : Anthère B deux loges
Photo 4 : Style terminé par un stigmate fourchu
Photo 5 : Fru;itssecs de jujubier
Photo 6 : Grain de pollen
Photo 7 : Insectes intervenant dans la pollinisation chez je jujubier
Photo 8 : Ornementation du noyau chez le jujubier
Photo g : Formes des grainss en fonction des provenances
Photo 10 : recherche du polymorphisme moléculaire
Photo II : Polymorphisme moléculaire
89
LISTE DBS TA5LEAUX
Tableau 1: Potlinisation Contrôl&e et poflinisation naturelle
Tableau 2 : Charge poliinique relative des insectes intervenant dans la pollinisation
Tableau 3 : Synthèse de la vitesse d’apparition des feuilles
Tabl$au 4 : Teneur en sucre de la pulpe
Tableau 5 : Variabilité génétique des provenances au niveau individuel
Tableau 6 : Distances génktiques de Néi et similarités des provenances
90
A##NEXES
ANNEXE
1: METHODES
D’EXTRACTION
DE L’AND
Mbhode Bouquet et a1
Méthode Coussin
(1990)
saccharose
PREPARATION
DU
?REPARATION
Méthode KIT QIAGEN
DES
Mettre le bain-marieà +~O”C
Mettre le tampon AP1 à 64”~
I?EMPON
TAMPONS
Mettre le bain-marieà +65”c
‘vlettrele bain-marieà 465”~
s’il y a descristaux
Sortir le tampon d’extraction Sortir le tampon d’extraction
LYSE DES CELLULES
3e la chambre froide et le ie la chambre froide et le 1. Peser 20 mg de feuilles
mettre à réchauffer. Ajouter nettre à +65”c pour que le
sèches (choisir les plus
0,2% de 2-mercapto&hanol.TAIl3sesolubilise
vertes)
Placerla préparationau bain- Calculerla quantiténécessaire2. Ajouter de l’azote liquide et
marie.
EX’IRACTIQN
1. Peser 1OOmg de feuilles
pour tous échantillons à
Placerla préparationau bain-
AP1 (le tampon peut congelé
marie
si le mortier est trop &oid
Calculerla quantitéde coussin
auquel cas
le saccharosenécessairepour
décongélation)
vertes).
2. Ajouter de l’azote liquide
et broyer
3. Ajouter 1,5 ml de tampon
d’extraction
4. Transfker dans des tubes
de 2 ml
5. Laisserincuber30 mn sous
agitationaubain-marie
6. Récupérer les tubes el
ajouter 700 1.11
du mélange
91
3. Ajouter 400~1 de tampon
extraire
séchées(choisir les plut
(24 : 1) chloroforme/alcoo
broyer
;OU~ les
attendre la
échantillons + 4. Transférer dans un tube de
Iuelquesml de sécurité
1,5ml
Mettre ce volume dans un 5. Ajouter 4yl deRNAse
becherpuis ajouter la quantité6. Mélangetrès fort au vortex
rie PVP nkcessaire pour une 7. Laisserincuber 10 mn à 65’~
concentrationde 1%
(mélanger2 à 3 fois)
Après dissolution du PVP, PRECIPITATION
distribuer 5rnJ de ce tampor PROTEINES,
dans lestubesflacon (50ml)
POLYSACCBARIDES
Placerun tamissur chacunde5 DDETERGENT
tubespuis mettre le tout da
E’I
douce
ELIMINER
DES DEBRIS ET
1l.Centrifuger 5 mn à vitesse
pour une concentrationde 1%
12.Verserle surnageantdans la
colonneviolette
récupéré d’acétate
13Centrifùger 2 mn à vitesse
sodium
II .CompLeterle tube avec de
1. Peser 100 mg de feuilles
séchées(choisir les plus 14.Transférerle fïltrat dansdes
l’isopropanolglacé
12.Mélanger doucement par
retournementsdestubes
13.Laisserau congélateur(20’~ pendantle repas)
rpm à +4Oc
2. Ajouter de l’azote liquide
et broyer
ZORincerle culot par 700~1
flacon
5. Rincer les mortiers avec 2
ml
au
speedvac
10
mn
1KReprendre le culot par
50~1d’eau
tampon
15.Ajuster 0,5
volume de
tampon AP3 et 1 volume
d’éthano1100”
1O.Mélanger par aspîrationsrefoulements
verser le volume dans les CHRoMAToGRAPHIE
tamis
17.Déposer
volume
un
Ne pas hisser les broyats
d’échantillon
daas les tampon plus de 30
maximum sur une colonne
mn
blanche
19.LaisserIe culot dissoudre
au bain-marie
de
d’homogéneisation puis
refoulements
températuremédium
CHROMATOGRAPHIQUES
tamis placéssur les tubes
d’éthanol par aspirations-
à
DES
AJUSTEMENT
4. Verser le broyat dans les
versant
environ
estimerle volumerecueilli
3. Ajouter 5ml de tampon CONDLTLONS
15.Eliminerle surnageanten
17S&er
tubesde 1,5 ml à la pipetteet
vertes)
d’homogénéisation
14,Centn‘fuger15 mn à 6000
maximale
6. Centrifuger 10
4000rpmà 4Oc
mn
de
650~1
a 18.Centrifùger1 mn à vitesse3
6000g
7. Eliminer Le surnageanten 19.Eliminer le liquide du tube
f
92
volume 1 65Ou1,passer le
quelquesjours ou à -20°C
restant sur ta même colonne
ml de tampon d’extraction
pour pluslongtemps
2O.Placerles colonnes sur de
9. Transférer ces
nouveaux tubes de 2 ml
volunxs
fournis(jeter les anciens)
dansdestubesde 2 mm
lO.Laisser incuber au bainmarie 30 mn sousagitation
sur chaquecolonne
22.Centrifùger 1 mn à vitesseZ
dansdes tubes de 2 ml en
versant
puis y replacerla colonne
24.Remettre 5OOpl de tampor
700~1
13.Ajouter
de
çhloroforme/alcool
AW sur chaquecolonne
25Centrilkger
koamylique
à
vitesse
maximale; la colonne doi
14.Remuer5 mn par agitation
sécher
douce
26.Retirer précautionneusemen
15.Centrifuger15 mn à 15300
les colonnesdes tubes san
température
que la membranene touche1
rpm
à
ambiante
16.Récupérer
liquideet les replacersur de
la
phase
supérieureà la micropipette
tubesde 1,5ml
ELUTION
(PlOOO) et la transférer
27.Ajouter 1OOulde tamponA
dansdestubesde 1,5 ml
17.Ajouter l/lO du volume
récuperé d’acétate
sodium
de
à 65"~ sur chaquecolonne
2KLaisser au minimum 5 mn
* 65% au bain-marie(attentio
à ce que les gouttes n
29CentrifFbger1 mn à vitesse2
19.Mélanger doucement par
retournements
3O.Récupérer l’éluat et s’en
Laisser au congélateur à -
servir pour une seconde
20% si la pelote n’est pas
élution(répéter lesopératioxz
pour quelquesjours ou à 21.Eliminer le surnageauten
22,Rincer le culot par 700$
d’&ha.nol par aspiration-
23.Sécher
au
environ
10
mn
à
tempérrature
mkdium
24.Reprendre le culot par
80@d”eau
Si le culot n’est pas dissout
hisser au bain-marie B 60’~
25.Conserverla solutionà 4°C
pour quelquesjours ou à 20”~ pour plus longtemps
94
20% pour pluslongtemps
REACTIFS ET SOLUTIONS UTILISEES DANS LES METHODES D’EXTRACTION
MéthodesBousquet et at (1990)
Tampond’extraction:
Tris 1OOmM
NaCI 1,4M
EDTA 20mM
CTAJ32% (ph)
Méthode coussinsaccharose
Tampond’homogénéisation
:
Tris-HC15OmM; pH 8
EDTA 5OmM; pH 7,2
D-(+) Saccharose
0,6M
Tamponcoussinde saccharose:
EDTA 50mM ; pH 7,2
D-(+) Saccharose
IM
Tris -HC15OmMpH8
Tampond’extraction:
Tris 1OOmM
NaC11,4M
EDTA 20mM
CTAB % (p/v)
95
ANNEXE 2 : DOSAGE DE L’ADN
Waetifs et solutionsutilisés dans le dosage
’
TamponTNE;pH7,3
TrkbaselOmM
’
NaCl IM
’
EDTA Naz,2H@ 1 mM
’
Colorant HQECHST 33358 1 @ml rajouter 1 ml d’eau dans le flacon d’origine
(conserverà l’abri de la lumière)
’
SolutionHOECHST 2OOr&nl soit 2Oj.&nl
’
Solutiond’ADN CALF THYMUS 1 mgknl (1OOOng/ul)
Aprèsle dosage,desdilutionsà 2ng/@ont été faitespour chaqueextrait.
Méthode de qbsagede I’ADN
Le dosagede I’ADN extrait a étéeffectuéaufluorimètreTII-700 selonle protocole suivant:
f . Sortir le tamponTNE (Tris SodiumEthylènediaminetétraacétiqueacide)
2. Allumerle fluorimètre(il met 10 minutespour sestabiliser)
3. Sortir leseehantillonsà doserdu congélateur
4. Risposerunefeuillede papierbenchklotesur le plan de travail
5. Déterminerla quantitéde colorant(HOECHST) diluénécessaire
au dosage
6. Mesurer la quantitérequisede TNE puis filtrer et verser dans la bouteilleréservéeà cet
effet
7. Ajouter la quantitéde colorantnécessaire
pour la quantitéde tampon(soit 20~ de colorant
dilue?
pour 100ml de tampon)
8. Etalonnerl’appareil(mettre 3 ml de solutionde coloration dansune cuve en quartz puis
ajouter 3 ~1de la solutionétalonpuishomogénéiser
par retournement)
9. Insérerla cuve(toujoursdansle mêmesens)dansle porte-cuvede l’appareil)
IOBosagedes échantillons(mélanger3 ml de la solution de cokytion et 3 ~1de la solution
d’ADN dansunecuveen quartzpuisinsérerpour la lecture).
96
ANNEXE 3 : GEL DE MIGRATION
r
r
Concentration d’agarose
Unve horivontal
Igarose
098 g
192 g
1744g
ranyon TBE 0,s x gel
80 ml
80 ml
80 ml
lYampon
TBE 0,5 x cuve
700 ml
700 ml
700 ml
292 g
333g
hmpon TBE 0,5 x gel
220 ml
220 ml
220 ml
TamponTBE 0,5 x cuve
200@ml
2000ml
2000ml
3g
4s g
594g
TamponTBE 0,5 x gel
300 ml
300 ml
300 ml
TamponTBE 0,5 x cuve
2000 ml
2000ml
2000 ml
Grand Cuve 26)-25cm
Agwose
3%
g
Maxi gel,cuve 20-25 cm / gel
20x30cm
Agarose
Préparatioa tampon TBE (Tris Borate EDTA)
Pour 1000ml
: TBE 10
H20 QSP
97
50 ml
compléterà 1000ml
Nom : DIALLO
Prénom : Ismaîla
TITRE DE LA THESE : Etude de la biologie de la reproduction et de la varùzbilité
gém!tiqaedujajtibier (Ziziphs mwitiana Lam.)
Maître de Conférences
: YayeKeneGASSAMADIA
: AmadouTidianeBA
ProfesseurTitulaire
Directeur ENSA / Thiès
PapaIbra SAMB
PapaNdiengouSALL
Secr&.ire Exécutif FNRAA
BassirouSCWGWFARA
Direction Eauxet Forêts
Date de soute-e
: Bji& 2002
Lieu:A
5 : %acultédesScienceset Techniques- Universitéde B&ar
Mots ~16s: Biologie, pollinisation,variabilité,morphologie,marqueurs,génétique,Ziziphus
maurif iana.
Prksidente
Membres
RESUIIaE
Cette étudea permisd’approfondirles connaissances
sur la biologiede la reproductionchezle
jujubierau Sénégalet d’évaluerla variabilitégénétiqueà travers lesmarqueursmorphologiques
et moléculaires(RAPD). Chezle jujubier il existedes arbresdont les fleurs s’ouvrentle matin
et d’autresdont lesfleurs s’ouvrentl’aprèsmidi. Les grainsde pollenarrivent à maturité avant
lesstigmates.La pollinisationest allogame.Aucunfruit n’a été obtenuaprèspollinisationentre
pollenet stigmatede la mêmefleur. Les grainsde pollen ont une viabilitéinitiale de près de
92% et la réceptivitéstigmatiquedure environ20 heures.Les abeilleset les guêpessont les
principauxinsectesqui interviennentdansla polhnisationdesfleurs.
L’étude de la variabihtémorphologiquea montré que la provenancede Dahra (zone semiaride) se caractérisepar des fruits plus gros et allongéset une bonnecroissancejuvénile. A
I’opposé,Ia provenancede Ibel (zone soudano-guinéenne)
présentedes huits moins lourds et
ovaleset unecroissancejuvénileplus faible.Il n’y a pas de corrélationpositiveentre le poids
desfruits et la vitessede germination.Les tiuits desprovenancessénégalaises
renfermentsoit
une grainesoit deux graines.Par contre, ceux de la provenancedu Tchad sont tous à deux
graines.La provenancede Keur SerigneTouba(Zone soudano-sahélienne)
a les fruits lesplus
petits maisplus sucrés.La teneurmoyenneen sucreest légèrementinférieure(11,3 %) à celle
trouvéesur certainesvariétésindiennes(15 %>.
La variabilitégénétiqueréveléepar lesmarqueursRAPD a montré quetoutes lesprovenances
présentaientune bonne diversité génétique.Le nombre d’alleles polymorphes,le nombre
d’alIèlesobservéset le pourcentagede polymorphismevarient d’uneprovenanceà l’autre. La
variabilité intra provenanceest du même ordre que la variabilité inter provenances.Les
distancesgenétiquesne sont pasen corrélationpositive avecles distancesgéographiques
en
ce qui concerneles provenancessénégalaises.
Cesprovenancessont éloigneesgénétiquement
et géographiquement
de la provenancenigérienne.De fortes similaritésont été trouvéesentre
lesprovenancessénégalaises.
Sur la basede cesconsidérations,un schémad’améliorationdu
jujubierdevrait sebasersur (i) la sélectiond’individus,(ii) le clonage(greffagehorticole et/ou
microgreffige) d’individus et/ou de variétés performantes et (iii) les recombinaisons
génétiquesentre les variétésintroduiteset lesmeilleursindividuslocaux de manièreà mettre
au point desgénotypesperformantset adaptésaux besoinsdespopulations.
PrhSm : Jismaïla
Nom : DXALLO
: YayeKeneGASSAMAIDIA
Membres
: AmadouTidiane&A
PapaIhra SAh4I3
PapaNdiengouSALL
BassuousouGouFARA
Rufe deso*uuuce i 29ju& .2002
Présidente
Lieu : ~~~~~e
Maître de Conférences
ProfesseurTitulaiie
Dhwteur ENSA / T@%
SecrétaireEx~ut~~
DirectionEauxet Forêts
5 : Faculté desScienceset Teckniqws - Universitéde wa
Mots clés: Biologie, pollinisation,variabilité,morphologie,marqueurs,gknetique,Zizi’Rti.~
~a~i~~~~~.
Cette etudea permisd’approfondirlesconnaissances
sur la biologiede la r~roduction chez.le
jujubierau Senégalet d’évaluerla variabilitégénetiqueà traverslesmarqueurs~~holog~ue~~
et mol&ulaires(RAPD)” Chezle jujubier il existedesarbresdont les fleurs s’ouvrentle ma&
et d’autresdont lesfleurs s’ouvrentl’aprèsmidi. Les grainsde pollenarrivent $ maturiteavant
lesstigmates.La pollinisationest allogame;Aucunfiuit n’a été obtenuaprèsbéton
entre
pollenet stigmatede la mêmefleur. Les grainsde pollen ont une viabilitéini$alede près de
92% et la rkeptivité stigmatiquedure environ20 heures.Les abeilleset les guêpessont les
principauxinsectesqui interviennentdansla motion
desfleurs.
L’étude de la variabiit6 mo~hologique a montre que la provenancede Dahra (zone semiaride) se caractérisepar des fruits plus gros et allongéset une bonnecrois&oe juv&ile.
urds et
l’opposé,la provenancede Ibel (zone ~~-~~~~
prtssentedes tits mo
ovaleset une croissancejuvénileplus fàible.Il n’y a pas de corr&tion positiveentre le aidé
desfruits et la vitessede germination.Les fîuits desprovenancesScsnégalaises
aenfermentsoit
une grainesoit deux graines.Par contre, ceux de la provenancedu Tchad sont tous à deux
graines.La provenancede Keur SerigneTouba(Zone ~0~~~~~~~
a lesfruits les plus
petitsmaisplus &cr&. La teneur moyenneen sucreest 16gèrement
inf&ieure (il 1,3 %) à oeil:
trouvéesur certainesvariétésindiennes(15 %).
La variabilitégénétiquerévéléepar lesmarqueursRAPD a montréquetoutes lesprovenue
présentaientune bonne diversité génétique.Le nombre d’al&les polymorphes,le nourri
d’allèlesobservéset le pourcentagede polymorphismevarientd’uneprovenarkeà l’autre. L;i
variabiliteintra provenanceest du même ordre que la variabilité inter provenances.Les
diiances génétiquesne sont pasen corrélationpositiveavec les distancesg~~~~qu~s cri
ce qui concernelesprovenancessénégalaises.
Cesprovenancessontéloigné&~~~tiquern~~~
et géographiquement
de la provenancknigérienne.De fortes similaritésont etvt&
trouvéesentrti
lesprovenancessénégalaises.
Sur la basede cesconsidérations,un schémad’~~omtio~ du I
jujubierdevrait sebasersur (i) la s&ction d’individus,(ii) le cionage(grefkgg horticoleet./~
microgrefige) d’individus et/ou de variétés performantes et (iii) les .r~ornb~so~s
génetiquesentre les variétésintroduiteset lesmeilleursindividuslocauxde maniereà mettre
aupoint desgénotypesperf’ormautset adaptésaux besoinsdespopulations.