suivi de chaleurs beaune

07/02/12
Comment déterminer le bon moment de l’accouplement Suivi de chaleurs : quoi de neuf Philippe MIMOUNI Xavier LEVY Centre de Reproduction des Carnivores du Sud-­‐Ouest www.vetreproduction.com CRECS
BEAUNE 4 fevrier
Chienne Rottweiler de 3 ans ¡  Amenée à la saillie en Allemagne au 12 éme jour de chaleurs ¡  Saillie correctement ¡  Restée vide BEAUNE 4 fevrier
BEAUNE 4 fevrier
Pourquoi est ce compliqué? ¡  50 à 80 % des cas d’infertilité sont liés à une mauvaise détermination du moment de la saillie ou de l’IA ¡  Nécessité du suivi de chaleurs. BEAUNE 4 fevrier
BEAUNE 4 fevrier
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Pourquoi est-­‐ce compliqué? ¡  LES CHIENNES SONT Signal hormonal= pic d’hormone LH Les ovocytes ovulés sont immatures et doivent mûrir environ 48 heures •  Ovulation 48 heures après Les ovocytes dégénèrent plus ou moins vite 2 jours de fertilité optimale sur l’ensemble des chaleurs FECONDEES: § 2 à 4 JOURS APRES L’OVULATION BEAUNE 4 fevrier Durée de Gestation BEAUNE 4 fevrier
Regina, chienne Berger Allemand de 4 ans Durée apparente (accouplement-­‐mise bas): >57 à 70 jours ¡  A produit 2 chiots, nés le 28 octobre ¡  Une seule saillie, le 23 août ¡  Question: a-­‐t-­‐elle été saillie au bon Durée réelle (ovulation-­‐mise bas): > 62 à 64 jours (63 en moyenne) ¡  DG= 64 j moment ? intervalle fécondation -­‐mise bas: 59 à 61jours >(60 en moyenne) BEAUNE 4 fevrier
Tania, chienne Staffordshire Bull Terrier de 2 ans BEAUNE 4 fevrier
Thalie, chienne Berger Allemand de 2 ans ¡  A produit 1 chiot, né le 15 décembre ¡  Deux saillies, les 18 et 19 octobre ¡  Question:a-­‐t-­‐elle été saillie au bon ¡  A produit 2 chiots, nés le 13 février ¡  Deux inséminations , les 14 et 15 décembre ¡  Question: a-­‐t-­‐elle été saillie au bon ¡  DG=58 j ¡  DG=60 -­‐61j moment ? BEAUNE 4 fevrier
moment ? BEAUNE 4 fevrier
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ATTENTION AUX IDEES FAUSSES ¡  Une chienne n’est pas forcement « prête » entre le 10 ème et 15 ème jour de ses chaleurs ¡  L’acceptation du mâle n’est pas un bon critère BEAUNE 4 fevrier
BEAUNE 4 fevrier
Critères subjectifs ¡  Nombre de jour de chaleurs §  Variations de 5 à 30 jours ¡  Acceptation du mâle par la chienne §  2 jours avant ovulation ( pic LH) ¡  Acceptation de la chienne par le mâle ¡  Taille de la vulve ¡  Aspect des écoulements BEAUNE 4 fevrier
BEAUNE 4 fevrier
Critères objectifs ¡  Frottis vaginaux ¡  Mesure de la résistivité vaginale ¡  Aspect endoscopique du vagin ¡  Bandelettes réactives ¡  Dosage de progestérone ¡  Dosage de LH ¡  Échographie ovarienne BEAUNE 4 fevrier
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Frottis vaginaux ¡  Modifications des cellules vaginales sous l’influence des hormones ¡  Kératinisation des cellules ( coloration de Harris Shorr) ¡  Nécessité de faire un suivi ¡  Frottis atypiques BEAUNE 4 fevrier
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Evolution du Frottis vaginal BEAUNE 4 fevrier Les frottis vaginaux ? ¡  Les frottis vaginaux … ne permettent pas de détecter l’ovulation …permettent de savoir période dépassée Dosage de la LH chez la chienne ¡  Kit semi quantitatif de détermination du pic LH ( 48 heures avant ovulation) test Witness LH ¡  Péremption très courte ¡  Intérêt: chienne stérilisée??? ¡  Hormone peptidique peu stable ( dosage dans les 48 heures ) BEAUNE 4 fevrier
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Mesure de la résistivité du mucus vaginal ¡  LH
peak
Ovulation
¡  Aussi fiable que frottis vaginal ¡  Nécessite rigueur et répétition Dosage de Progesterone ¡  … ne permet pas de déterminer le jour exact de l’ovulation CRECS
Progestéronémie chez la chienne Indications •  Détermination de la date d’ovulation •  Kystes lutéaux ou tumeurs gonadiques •  Détermination du part •  Aucun intérêt dans le diagnostic de gestation •  Suivi de gestation (insuffisance lutéale) •  Détermination du stade du cycle ( basal en anoestrus) BEAUNE 4 fevrier Dosage de Progestérone Période préovulatoire Ovulation vers 7-­‐10 ng/ml ( 4-­‐8 selon labos) Période post ovulatoire Les différentes méthodes Évolution de la progestéronémie Impossible de dire qu’une chienne est fécondée à un taux précis de P BEAUNE 4 fevrier 8
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Interprétation du dosage 1ng/ml=3,18 nmol/l Anoestrus < 1ng/ml Tube sec ou hépariné Proestrus augmentation dans les derniers jours Œstrus : Prélèvements •  Pic LH 2-­‐3 ng/ml •  Ovulation : 5 à 10 ng/ml Metoestrus : 15 à 80 ng/
ml Mise bas imminente < 2 ng/ml BEAUNE 4 fevrier semi-­‐quantitatif / Quantitatif ? Volume min 200 µl plasma ou sérum Conservation •  8 jours •  4° C 2 semaines •  -­‐20°C 1 an BEAUNE 4 fevrier Techniques de Dosage Laboratoires ( RIA, Chimiluminescence, Immuno enzymologie) à étalonner Kits de dosages semi quantitatifs •  Discordances de 10 à 47% des cas!! •  Pb de péremption et réalisation technique •  Une coloration par tranche ( inf à 3 ng/ml, entre 3 et 8 ou sup à 8) •  Ovucheck Premate , ovulation test ( BVT) BEAUNE 4 fevrier ATTENTION AUX UNITES Progestéronémie: 2 étapes 1 ng/ml 3 nmol/l BEAUNE 4 fevrier
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Début d’augmentation de la progestéronémie Ovulation
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Progesterone ng/mL
>England 2002: §  La progestéronémie atteint 2 ng/ml: §  le jour du pic de LH -­‐ §  dans les 24 heures qui suivent le pic de LH Varie peu à l’ovulation 18
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9
6
3
0
-10 -9
-8
-7
-6
-5
-4
-3
BEAUNE 4 fevrier Varie beaucoup à la fécondation (saillie) -2
-1
Days
0
1
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3
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Début d’augmentation de la progestéronémie Pg
Progesterone plasmatique (ng/ml)
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Progesterone ng/mL
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Ovulation
15
12
9
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14
Ovulation
Délai
variable
12
10
Pg
8
6
4
2
0
9h00 21h00 9h00 15h30 13h45 20h00 15h00 20h00 9h00 14h30 20h30 9h30 15h00 19h00 17h00 20h00 10h30
3
30/10
31/10 02/11 03/11 04/11
05/11
06/11
07/11
08/11
09/11
Dates et Heures des prises de sang
6
4
2
0
-2
-4
-6
-8
0
-1
0
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Days
A retenir ¡  Valeur à l’ovulation dépend du laboratoire §  Il n’existe pas de valeur universelle ! ¡  Evolution est importante Inconvénient « cycle long » Chienne berger Allemand 3 ans 13 éme jour des chaleurs: Pg = 1,8 ng/ml 15 éme jour des chaleurs : Pg = 2,3 ng/ml 16 éme jour des chaleurs : Pg = 3,2 ng/ml ¡  Progestérone à la saillie : AUCUN intérêt ? 17 éme jour des chaleurs : Pg = 4,3 ng/ml 18 éme jour des chaleurs : Pg = 5,4 ng/ml 19 éme jour des chaleurs : Pg = 7,2 ng/ml BEAUNE 4 fevrier 10
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Principe du suivi de chaleurs En réalité! Frottis Suivi de frottis Commencer les dosages au début de la kératinisation BEAUNE 4 fevrier Suivi de chaleurs Metoestrus:
Frottis vaginal
Fin de prooestrus Contôle Frottis 3à4
jours plus tard
Frottis deux jours
plus tard
chienne n'est plus féconde
Oestrus
Fin de prooestrus
Contrôle 2 ou 3 jours
plus tard
Dosage entre 15 et 25 ng/ml
(variations selon
labos)
saillie immédiate
Contrôle 3 jours plus tard
Dosages quotidiens ou tous les deux jours Oestrus
Saillie aprés 48 heures
Taux basal
inf à 1ng/mlI
Prooestrus
Entre 1 et 5 ng/ml
Suivi de chaleurs (suite) •  la chienne n’a pas commencé à ovuler •  on peut attendre 4 à 6 jours Pg en début •  ovulation imminente d ’augmentation •  contrôle 1 ou 2 jours plus tard (1 à 3 ng/ml): Pg vers 5 à 10 ng/
ml: ovulation •  «étalonner » cliniquement son laboratoire BEAUNE 4 fevrier frottis dès le 5-­‐6ème jour des chaleurs si frottis + clinique évoquant un prooestrus: contrôle tous les 3 à 5 jours si frottis + clinique évoquant un oestrus: dosage de progestérone Entre 5 et 10 ng/ml
période ovulatoire
BEAUNE 4 fevrier Pg basale: combiner les frottis vaginaux et les dosages de progestérone: Dosage de progestérone
Taux basal
Entre 5 et 10 ng/ml
inf à 1ng/ml période ovulatoire
Prooestrus
Dosage de P BEAUNE 4 fevrier
Premier contrôle aprés cinq ou six jours de chaleurs
( si les propriétaires n'ont pas bien détecté le début des chaleurs)
Prooestrus peu avancé
Echographie ovarienne pendant la coloration frottis BEAUNE 4 fevrier Détermination de la date de l’ovulation PIC LH 2 à 3 ng/ml OVULATION 5 à 10 ng/Ml Moment OPTIMUM: 48/72 heures post ovulation La progestérone varie beaucoup au moment de la fécondation BEAUNE 4 fevrier 11
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Inséminations après ovulation Accouplement naturel ou IA en semence fraîche: •  si 2 saillies ou IA: 1 jours et 3 jours après ovulation est idéal •  Si une seule saillie ou IA : idéalement 2/3 jours après ovulation Si IA en semence congelée ou réfrigérée: •  idéalement 2 à 3 jours après ovulation L’avenir ¡  Diagnostic échographique de l’ovulation BEAUNE 4 fevrier BEAUNE 4 fevrier
Ovulation ¡  Spontanée 2 à 5 jours après le pic de LH ¡  Ovocytes primaires non fécondables ¡  Maturation de 48/72heures ¡  Période optimale = 2/3 jours après ovulation ¡  Sperme frais 5 jours ¡  Sperme réfrigéré 2 jours ¡  Sperme congelé 12 heures Limites ¡  Ovulation chez la chienne variable? En fonction des individus ( entre 5 et 8 ng/
ml?) ¡  Sperme congelé ou de mauvaise qualité ¡  >>>> Echographie BEAUNE 4 fevrier
BEAUNE 4 fevrier
Difficultés de réalisation
¡  Les
¡  Bourse graisseuse ¡  Aspect d’un follicule
pré ovulatoire proche
d’un corps jaune en début d’évolution
¡  Necessité suivi BEAUNE 4 fevrier
nouveaux échographes sont plus
performants mais nécessité d’utiliser des
sondes de haute fréquence ( 7.5 à 12 Mhz) ¡  Parfois nécessaire de raser BEAUNE 4 fevrier
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Situation des ovaires ¡  Position
sous- lombaire en général 3 eme ou 4
eme apophyse transverse lombaire ¡  En regard du pôle caudal du rein ( droit plus
cranial) ¡  En contact avec paroi abdominale BEAUNE 4 fevrier
¡  Positionnement : ¡  Décubitus latéral droit
( on cherche le gauche
en premier) puis gauche ¡  Position debout BEAUNE 4 fevrier
Trouver les ovaires ¡  Commencer par ovaire gauche ¡  Repérer le pôle caudal du rein et
balayage
crânio caudal et médio latéral ¡  Le stroma ovarien est légèrement moins
échogène que le cortex rénal ¡  Cônes d’ombre de bord et renforcement
posterieur BEAUNE 4 fevrier
Difficultés
¡  Présence de gaz ¡  Format de la chienne ¡  Présence de graisse intra-abdominale ¡  Race
, qualité de la peau BEAUNE 4 fevrier
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Anoestrus
¡  Difficiles à visualiser car petite taille ¡  Structures folliculaires difficiles à objectiver
et
très petites < 2 mm
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Début Pro- Oestrus Dét
¡  Position plus caudo-ventrale des ovaires ¡  Contours mieux visualisables ¡  Image meilleure en coupe longitudinale ¡  Taille 1.5 cmx 1 cm ¡  Nombreux petits follicules
à paroi mince §  Taille des follicules 2 à 5 mm §  Croissance rapide en 2 ème partie du Pro-oestrus BEAUNE 4 fevrier
Follicules préovulatoires BEAUNE 4 fevrier
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0.95 BEAUNE 4 fevrier
Période préovulatoire
¡ 
¡ 
¡ 
Taille plus importante des ovaires 3 sur 1.5 cm Aspect des follicules § 
§ 
§ 
§ 
§ 
§ 
§ 
Diminution du nombre Croissance rapide à partir du 7 ème jour Taille max juste avant ovulation 6 à 9 mm Follicules de taille variable Epaississement net de la paroi folliculaire ( 1 mm) Luteinisation pré-ovulatoire ? BEAUNE 4 fevrier
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Ovulation ¡ 
P= 5,65 ng/ml Ovaires §  Forme plus ronde §  Marges irrégulières : « ovaire en grappe » §  L’ovaire prend une forme homogène et devient
difficilement visualisable pendant 1 à 2 jours ¡ 
Follicules :différents aspects §  Disparition des images folliculaires §  En totalité ou Partiellement §  Plus fréquemment : persistance de structures anéchogènes
ou hypoechogénes plus petites que ls follicule
préovulatoires §  Possibilité de follicules non ovulés §  Dans les heures suivant l’ovulation : parfois présence de
liquide autourBEAUNE
de l’ovaire 4 fevrier
BEAUNE 4 fevrier
Période post- ovulatoire 7,86 ¡  Ovaires
§  Aspect irrégulier ¡  Apparition
de corps jaunes §  Paroi plus épaisse , centre anéchogène réduit , taille
BEAUNE 4 fevrier
Corps jaunes légèrement supérieure aux follicules §  Parfois existence de structures rondes anéchogènes
( 30 % des cas) BEAUNE 4 fevrier
CJ p 42 ¡  Déforment l’ovaire ¡  Parois plus épaisses que follicules ¡  Contenu souvent légèrement echogéne BEAUNE 4 fevrier
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BEAUNE 4 fevrier La Puberté de la chienne ¡  Age aux premières chaleurs variable §  6 mois à 15 mois ( max 24 mois) §  Dépend de la race/taille ¡  Aspect parfois modifié des premières chaleurs §  Chaleurs silencieuses §  Chaleurs fractionnées ( Split heat) Facteurs modifiant la fréquence des chaleurs ¡  Age §  Jeunes parfois Chaleurs atypiques §  Chiennes âgées ¡  Relation au sein de la meute §  Chaleurs synchronisées ou inhibées ¡  Traitements hormonaux §  Progestagénes, antifongiques §  Alizine, Antiprolactine ¡  Race Jack Russell en chaleurs tous les 2 mois ¡  Chaleurs en mars à 12 mois ¡  Chaleurs en mai ¡  Pertes de sang en aout BEAUNE 4 fevrier BEAUNE 4 fevrier
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Berger allemand de 2 ans ¡  Chaleurs Fractionnées ou Split Heat ¡  Chaleurs anovulatoires ¡  Chaleurs à 3 mois et demi d’écart ¡  Consultation vulve dilatée BEAUNE 4 fevrier BEAUNE 4 fevrier
CKC de 5 ans 04/08 Vulve dilatée , Pas de pertes P= 0, 14ng/ml FV oestrus ¡  06 Vulve dilatée Pas de pertes P= 0, 25 ng/ml Fv oestrus ¡  10/08 Vulve très dilatée pas de pertes P= 0,33 ng/ml Fv oestrus ¡  16/08 vulve pas dilatée pas de pertes P< 0, 10 ng/ml Fv oestrus ¡ 
BEAUNE 4 fevrier ¡ 
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¡ 
J8 oestrus P=0,54 J8 Oestrus P=1,78 J10 oestrus P= 6,51 J12 oestrus P=2,25 J14 oestrus P= 9,25 Saillie J15 ET J17 J20 metestrus P =45,60 BEAUNE 4 fevrier Chien Loup de sarloos ¡  J 10 oestrus P= 3,35 ¡  J12 oestrus P=2,87 ¡  J18 metoestrus P=1,56 BEAUNE 4 fevrier BEAUNE 4 fevrier 17