Fiche Total SCIENCE ANTIVIR
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Extrait du rapport de prestation IFTH pour Total Science n°90450A - Annexe technique n°3. 1/3 Extrait du rapport de prestation IFTH (n° 90450A du 12 avril 2010) pour TOTAL SCIENCE Evaluation des propriétés antivirales - Annexe technique n°3 Titre de la prestation n°90450A : Etude de l’intérêt présenté par la formulation désinfectante T- S 100 de TOTAL SCIENCE pour des applications textiles I – Généralités 1.1 - Les virus Un virus est une entité biologique qui nécessite une cellule hôte, dont il utilise les constituants pour se multiplier. Les virus existent sous une forme extracellulaire ou intracellulaire. Sous la forme intracellulaire (à l'intérieur de la cellule hôte), les virus sont des éléments génétiques qui peuvent se répliquer de façon indépendante par rapport au chromosome, mais non indépendamment de la cellule hôte. Sous la forme extracellulaire, les virus sont des objets particulaires, infectieux, constitués au minimum d'un acide nucléique et de protéines. Le débat sur la nature des virus (vivants ou non) repose sur des notions complexes et reste aujourd'hui ouvert. Un virus est composé d'une molécule d'acide nucléique (soit d'ADN, soit d'ARN, simple ou double brin) entourée d'une coque de protéines, appelée la capside, et, parfois, d'une enveloppe à base de lipide. Les virus qui possèdent cette enveloppe sont dits « enveloppés » et les autres sont des virus « nus ». La nature lipidique de cette enveloppe rend les virus enveloppés plus fragiles dans l'environnement extérieur et plus sensibles aux détergents et désinfectants. Parmi les virus enveloppés, on trouve l'Hépatite C, le VIH, le Virus Herpes, le Virus H1N1 et autres virus de la grippe. Le virus ne possède en général aucune enzyme pouvant produire de l'énergie. Les virus sont en règle générale inférieurs à 250 nanomètres ; toutefois, le « mimivirus » (Mimicking microbe virus) a une taille de 400 nm, ce qui le rend plus gros que les plus petites bactéries. Ce dernier a aussi la particularité de posséder à la fois de l'ADN et de l'ARN. La forme libre du virus (ou particule virale) s'appelle le virion. Tous les êtres vivants peuvent être infectés par des virus. Il existe des virus de bactéries (les bactériophages), des virus d'Archaea, des virus d'algues (Phycodnaviridae), des virus de plantes, des virus fongiques, des virus d'invertébrés, des virus de vertébrés, parmi lesquels on trouve de nombreux agents pathogènes, et même des virus de virus. Source : http://fr.wikipedia.org/wiki/Virus 1.2 - Virus H1H1 Les Influenzavirus A sous-type H1N1 désignent les virus de la grippe appartenant au soustype H1N1 de la lignée de type A. Ils sont caractérisés par un pouvoir pathogène élevé pour l’être humain qui les rend responsables de près de la moitié de toutes les infections de grippe humaine et notamment d'une grande fraction des cas de grippe saisonnière. IFTH-Direction Régionale Rhône-Alpes PACA Avenue Guy de Collongue 69134 ECULLY CEDEX Tél : (+33) (0)4 72 86 16 00 Fax : (+33) (0)4 78 43 39 66 SIRET 433 430 832 00017 Extrait du rapport de prestation IFTH pour Total Science n°90450A - Annexe technique n°3. 2/3 Certaines souches de H1N1 sont endémiques aux humains, tandis que d'autres sont endémiques chez les oiseaux (grippe aviaire) et chez les porcs (la grippe porcine). Des virus du sous-type H1N1 sont responsables de la pandémie de grippe en 1918 et des cas de grippe en 2009 ainsi que d'une partie des grippes saisonnières. Le nom H1N1 indique que le virus présente à sa surface la combinaison de deux moléculesantigènes : l’hémagglutinine de type 1 et la neuraminidase de type 1 Source : http://fr.wikipedia.org/wiki/Grippe_A_(H1N1)_de_2009-2010 1.3 - Définition des termes employés Selon la directive N°98/8/CE, le terme biocide définit les substances actives et les préparations contenant une ou plusieurs substances actives qui sont présentes sous la forme dans laquelle elles sont livrées à l’utilisateur, qui sont destinées à détruire, repousser ou rendre inoffensifs les organismes nuisibles, à en prévenir l’action ou à les combattre de toute autre manière, par une action chimique ou biologique. Définitions selon la norme NF T 72-101(mars 1981) : Le terme Virucide ou virulicide qualifie un produit ou un procédé ayant la propriété d’inactiver les virus dans des conditions définies. D’après la norme NF EN 14476+A1 (janvier 2007), sont virucides les procédés qui entraînent une réduction de titre viral supérieure ou égale à 4,0 log. II – Le principe actif de la formulation TOTAL SCIENCE : ammoniums quaternaires Comme tous les antiseptiques cationiques, les ammoniums quaternaires s'adsorbent à la surface des cellules hôtes chargées négativement (capsule). La polarité de la capsule est neutralisée, ce qui la rend perméable. La paroi puis la membrane cytoplasmique subit des lésions. Les molécules de faible masse molaire contenues dans la cellule sont libérées. Il y a inactivation des enzymes respiratoires, dénaturation et précipitation des protéines et acides nucléiques. Aux concentrations bactériostatiques, les lésions membranaires sont réversibles. Les ammoniums quaternaires ont une activité variable sur les virus enveloppés lipophiles, nulle sur les virus nus. La nature lipidique de cette enveloppe rend les virus enveloppés plus fragiles dans l'environnement extérieur et plus sensibles aux détergents et désinfectants. III - Application de la formulation sur textiles - Lavages La formulation T- S 100 de TOTAL SCIENCE est diluée à 10 % (100 g/l) puis est appliquée au foulard et à froid sur des éprouvettes de format A4 des supports textiles coton. Les taux d’emport sont de 100 %. La fixation est réalisée selon les préconisations de TOTAL SCIENCE, à 170°C pendant 60 à 90 secondes. L’IFTH réalise les lavages en machine des éprouvettes à 40°C selon un protocole proche de NF EN 26330 (méthode de lavage et de séchage domestique) dans les conditions suivantes : - 40°C (800 tours/min), - lessive ECE à 0,5 g/l, - sans charge, - eau dure. IV – Test utilisé par l’IRM Le test utilisé par l’IRM a pour objectif la détermination de l’activité virucide d’un textile traité vis-à-vis du virus influenza A (H1 N1), virus de la grippe humaine (Test interne de l’IRM, Institut de Recherche Microbiologique). IFTH-Direction Régionale Rhône-Alpes PACA Avenue Guy de Collongue 69134 ECULLY CEDEX Tél : (+33) (0)4 72 86 16 00 Fax : (+33) (0)4 78 43 39 66 SIRET 433 430 832 00017 Extrait du rapport de prestation IFTH pour Total Science n°90450A - Annexe technique n°3. 3/3 4.1 - Référence aux textes NF EN 14476+A1 (janvier 2007) - Antiseptiques et désinfectants chimiques. - Essai virucide quantitatif de suspension pour les antiseptiques et désinfectants chimiques utilisés en médecine humaine. - Méthode d'essai et prescriptions (phase 2, étape 1) (indice de classement : T72-185). NF T 72-180 (décembre 1989) 4.2 - Souches Les éprouvettes sont testées sur la souche de virus suivante : Virus influenza A (H1N1) ATCC VR-1469, virus de la grippe humaine 4.3 - Principe de la méthode Temps de contact textile - virus après dépôt : 1 heure Technique d’arrêt de l’action virucide et cytotoxique du produit : dépôt du support dans 10 ml de liquide de recueil (tampon PBS) et tamisage moléculaire sur gel Séphadex. 4.4 - Expression des résultats Calcul de l’activité virucide = Titrage du témoin vrai (en log DICT 50/ml) – Titre du virus après action du produit (en log DICT 50/ml). Toutes les valeurs sont exprimées en log de 10. Chaque essai est effectué 3 fois. Tableau 1 Titre du virus après Titrage du témoin vrai Coton 100% 0L Calcul de l’activité (en log DICT 50/ml) action du produit (en log DICT 50/ml) virucide 6,0 < 1,6 > 4,4 log Coton 100% 20L 6,0 < 1,6 > 4,4 log D’après la norme NF EN 14476+A1 (janvier 2007), sont virucides les procédés qui entraînent une réduction de titre viral supérieure ou égale à 4,0 log. Ces tests ne sont que des indicateurs, la réalisation du test complet reste indispensable à cause de sa validation et de sa redondance. (cf. Rapports d’essai de l’IRM) V - Résultats Les textiles Coton 100% traités par la formulation T-S 100 neuf et lavé 20 fois à 40°C selon un protocole proche de NF EN 26330 possèdent des bonnes propriétés virucides, sur la souche Virus influenza A (H1N1) d’après le test de l’IRM et d’après la norme NF EN 14476+A1 (janvier 2007). La quantité de principe actif présente sur ces textiles est suffisante pour que le titre viral soit réduit de 4,4 log après 1 heure de contact, sur les éprouvettes textiles testées et dans les conditions de l’essai. IFTH-Direction Régionale Rhône-Alpes PACA Avenue Guy de Collongue 69134 ECULLY CEDEX Tél : (+33) (0)4 72 86 16 00 Fax : (+33) (0)4 78 43 39 66 SIRET 433 430 832 00017