Conception de formulaires de protocole d`utilisation d`animaux

Transcription

Atelier du CCPA
26 avril 2012
Conception de
formulaires de protocole
d’utilisation d’animaux
Sophie Dubuisson, coordonnatrice
Comité de déontologie de
l’expérimentation sur les animaux
(CDEA)
Université de Montréal
Université de Montréal

7 animaleries, environ 200 protocoles actifs
Plusieurs espèces, incluant poissons, lamproies, grenouilles,
salamandres, reptiles, oiseaux, hamster, souris, gerbilles, rats,
lapins, opossum, chats, primates.


Majoritairement des projets de recherche, quelques cours.

Formulaire principal, approuvé par le Comité :
 Demande d’autorisation d’utiliser des animaux

ANNEXES, en cours de rédaction (documents de travail) :
 Enseignement
 Reproduction et utilisation d’animaux modifiés par
génie génétique
 Production d’anticorps
 Animaux sur le terrain
Demande d’autorisation d’utiliser des animaux
1. IDENTIFICATION DU CHERCHEUR OU DU PROFESSEUR
RESPONSABLE
2. IDENTIFICATION DU PROTOCOLE
5. AUTORISATION DU CDEA (Réserver à l’usage du Comité)
8. PERSONNES À CONTACTER EN CAS D’URGENCE
11. PROGRÈS ACCOMPLIS
13. ENVIRONNEMENT ET ENRICHISSEMENT :
16. ANIMAUX REQUIS POUR LES 12 PROCHAINS MOIS
22. RISQUE POUR LE PERSONNEL
23. EXPÉRIENCE ANTÉRIEURE
Avez-vous l’expérience nécessaire pour réaliser les
techniques et manipulations des animaux décrites
dans ce protocole?
Oui. Décrire brièvement votre expérience :
Non. Quelle formation recevront les membres du
laboratoire :
*****
Questions?
Enseignement
Référence : section 12 des «Lignes directrices
du CCPA sur : la révision des protocoles
d’utilisation des animaux»

Les objectifs en enseignement sont très différents de ceux en
recherche : non pas la découverte scientifique, mais plutôt
démontrer des principes qui sont déjà bien connus, ou
apprendre des techniques.

L'usage répété d'animaux à ces fins devrait être basé sur
des objectifs pédagogiques bien fondés et devrait être
justifié de manière éthiquement valable.

Le professeur doit justifier qu’il n’y a pas de méthode
alternative telles que des modèles anatomiques, des
présentations vidéo, des simulations informatiques, etc.
Enseignement
Enseignement
Enseignement
L’évaluation du protocole d’enseignement doit tenir compte du
niveau d'inexpérience des étudiants.
 Les projets d'enseignement devraient comprendre une
description du nombre d'étudiants par animal, et du
nombre d'étudiants par professeur ou chargé de cours.
Enseignement

Le niveau d'expérience et de compétence des
enseignants et/ou des responsables des travaux pratiques
devrait être assez élevé pour garantir la réussite des
préparations et des procédures.
Enseignement
6. Préciser le sort des animaux suite à la session
d'enseignement.
*****
Questions?
Reproduction et utilisation d’animaux modifiés
par génie génétique


Référence : «Lignes directrices du CCPA sur : les animaux
transgéniques (1997) » qui seront mises à jour sous peu.
En co-rédaction avec Mme Maryse Dansereau, coordonnatrice du
CÉUA à la Faculté de médecine vétérinaire de l’UdeM.
Reproduction et utilisation d’animaux modifiés par génie génétique
SECTION 1) CRÉATION DE NOUVELLES LIGNÉES
D’ANIMAUX MODIFIÉS PAR GÉNIE GÉNÉTIQUE
1.1 CRÉATION DE NOUVELLES LIGNÉES
Principe directeur : tout doit être fait pour éviter de recréer un
animal modifié génétiquement disponible.
● Préciser si des lignées répondant à vos besoins
scientifiques sont disponibles : Oui/Non
Recherches effectuées pour s’en assurer :
Sites consultés :
Mots clés utilisés :
● Si OUI, pouvez-vous vous procurer des animaux provenant
de ces lignées :
Oui/Non, justifier :
● Indiquer la (les) méthodes de production :
Microinjection d’ADN
Transfert de gène à l’aide d’un rétrovirus
Transfert de gène à l’aide de cellules souches embryonnaires
(cellules ES)(Knock-in, Knock-out)
Croisement de lignées existantes d’animaux modifiés par génie
génétique
Autre, précisez :
● Préciser si les constructions d’ADN ont été vérifiées in vitro
pour s’assurer de leur qualité et exactitude :
Oui / Non, justifier : /Sans objet
1.2 ÉVALUATION DU BIEN-ÊTRE ANIMAL DES NOUVELLES LIGNÉES
CRÉÉES
● Pour chaque nouvelle lignée créée, indiquer le gène modifié et sa
fonction :
● Y a-t-il des anomalies anticipées ?
Si oui, décrire les anomalies physiques et/ou comportementales
potentiellement engendrées (p. ex., agressivité, tremblements, toilettage
excessif, etc.) et préciser si elles toucheront les animaux hétérozygotes et/ou
homozygotes ainsi que l’âge à laquelle ces anomalies pourraient se
manifester :
● Si des anomalies de la reproduction sont anticipés (ex. incidence
élevée de dystocie, ou de mortalité néo-natale), indiquez les moyens
qui seront mis en place afin d’éviter ou de minimiser les impacts de
ces anomalies.
● Dans les cas où les anomalies anticipées pourraient induire de la
douleur ou de la détresse, décrire les moyens qui seront utilisés pour
soulager ou diminuer la douleur et la détresse de ces animaux :
● Si vous rencontrez des anomalies non anticipées (ex : problème de
bien-être) ou si un animal meurt d’une cause inconnue :
1- Confirmer qu’’il y aura une observation post-mortem.
2- Confirmer que le CPA sera informé.
Les utilisateurs d’animaux inscrits à ce protocole possèdent-ils les
compétences requises afin de produire des animaux modifiés par génie
génétique :
Oui, décrire brièvement l’expérience de l’équipe de recherche :
Non, quelle formation suivront les utilisateurs d’animaux :

Nommer la ou les personnes responsables de l’observation et de l’évaluation
du bien-être des animaux, qui consigneront les renseignements obtenus :

Précisez si vous avez discuté avec le vétérinaire clinicien afin de déterminer la
procédure d’observation du phénotype et du bien-être des nouvelles lignées
modifiées génétiquement, tout au long de la durée de vie normale de l’animal
d’expérimentation, à partir de sa naissance.

Un rapport sur le phénotype obtenu et son impact sur le bien-être animal,
incluant les modifications potentielles par rapport au suivi de santé et
aux points limites soumis dans le présent protocole devra être transmis au
CPA.
Indiquer la date approximative à laquelle le rapport sera soumis :

Le rapport devra inclure les besoins spécifiques d’hébergement et de soins en
lien avec ce phénotype (ex : nourriture sur le plancher de la cage, euthanasie
des animaux homozygotes avant que le phénotype n’aie un impact négatif
majeur sur le bien-être animal).
SECTION 2) MAINTIEN/REPRODUCTION D’ANIMAUX MODIFIÉS PAR GÉNIE
GÉNÉTIQUE
2.1 JUSTIFICATION DES NOMBRES
Compléter le tableau ci-dessous, ou l’ajouter en annexe.
● Cocher le responsable de la gestion/suivi de la
reproduction des animaux (incluant le sevrage) :
Équipe de recherche, identifier le(s) responsable(s) :
Personnel de l’animalerie, identifier l’animalerie :
● Préciser si les lignées sont disponibles commercialement :
Oui, justifier le fait d’avoir besoin de maintenir une colonie de
reproduction:
Non
● Le phénotype homozygote cause-t-il des taux de morbidités ou
mortalités élevés, ou les animaux homozygotes développent-ils
une maladie chronique : Oui/Non
Si OUI, préciser si vous utilisez des reproducteurs hétérozygotes.
Oui, justifier/Non, justifier :
Si NON, préciser si vous utilisez des couples d’animaux
reproducteurs homozygotes afin de réduire le nombre de petits
qui ne possèdent pas la mutation voulue :
Oui/Non, justifier :
● Préciser les mesures prises pour éviter de produire des animaux
en surplus :
● Préciser le sort des animaux produits en surplus ou qui ne
répondent pas aux critères demandés (ex : sexe ou génotype non
approprié) :
● Préciser le sort des reproducteurs retraités :
● En lien avec les deux points précédents, précisez si ces
animaux pourront êtres réutilisés à d’autres fin (ex. transfert
vers un autre protocole expérimental, de pratique, ou étude
pilote) et indiquer le ou les numéros de protocoles en question.
Si non, veuillez en donner la raison, ou le cas échéant, les
possibilités de réutilisations envisagées, qui se sont avérés non
applicables.
● Préciser l’âge approximatif auquel sont sevrés les petits :
● Avez-vous considéré les systèmes d’induction de knock-in ou
knock-out, de sorte que l’expression du phénotype puisse être
contrôlée et seulement induite pour une période d’étude
précise : Oui/Non, expliquer :
● Est-ce qu’une technique d’archivage (ex : la
cryoconservation) est utilisée comme stratégie de réduction et
de partage pour la gestion des colonies d'élevage et des stocks
de géniteurs d'animaux modifiés par génie génétique :
● Stratégie retenue pour contrôler la dérive génétique :
Cryopréservation
Achat nouveaux géniteurs
Autre:
● Fréquence de l’introduction du nouveau sang (en terme de
générations):
2.2 LE GÉNOTYPAGE
● Le génotypage est-il requis :
Non, justifier pourquoi, puis passer à la section suivante :
Oui, préciser l’analyse nécessaire :
-qualitative : déterminer si l’animal exprime ou non le transgène
(PCR)
-quantitative : déterminer le niveau d’expression du transgène
(Southern blot). Cette technique étant plus invasive parce que
nécessitant plus de tissus justifier son utilisation :
● Cocher la méthode utilisée pour déterminer le génotypage :
Note : La méthode sélectionnée doit être la moins invasive possible pour
l’animal et être sans douleur. Notamment, la biopsie de queue ne
devrait être utilisée que lorsque d’autres méthodes moins invasives et
moins douloureuses ne sont pas possibles.
Biopsie de la queue
Entaille à l’oreille
Prélèvement sanguin
Salive
Frottis buccal
Échantillon de poil
boulette fécale
Autre, précisez :
Veuillez répondre aux questions suivantes si l’animal concerné est
la souris et si la méthode de génotypage choisie est la biopsie de
la queue :
● Préciser si le prélèvement est de 0,5 cm et moins :
Oui/Non, veuillez indiquer la quantité et justifier :
● Préciser l’âge auquel le prélèvement sera effectué Moins de 14 jours :
14 à 17 jours :
Plus de 17 jours , justifier :
● Veuillez expliquer la procédure utilisée pour le prélèvement de morceau
de queue, en insistant sur les méthodes employées pour minimiser la
souffrance de l’animal :
● Veuillez indiquer si une deuxième biopsie de queue pourrait être
envisagée. Spécifiez l’âge, la taille totale des prélèvements, ainsi que
les méthodes employées pour minimiser la souffrance de l’animal.
● Avez-vous considéré utiliser le fragment de tissus prélevé de l’oreille
lors de l’identification des souris afin d’effectuer le
génotypage ? : Oui/Non, justifier :
SECTION 3) UTILISATION D’ANIMAUX MODIFIÉS PAR GÉNIE
GÉNÉTIQUE DANS DES PROJETS EXPÉRIMENTAUX
● Provenance des animaux :
Dans le cas où les souches proviennent de l’extérieur, un profil de santé
de la colonie d’origine doit être transmis au vétérinaire clinicien de
votre secteur avant l’arrivée des animaux (bactériologie, sérologie,
parasitologie et rapport de nécropsie). Consulter le vétérinaire
clinicien pour plus d’information.
● Spécifier le croisement des animaux :
Hétérozygotes
Homozygotes
Hétérozygotes et homozygotes
ÉVALUATION DU BIEN-ÊTRE ANIMAL DE LIGNÉES DÉJÀ
EXISTANTES
Compléter seulement pour les lignées déjà existantes et connues.
Pour les nouvelles lignées créées, compléter la section #1
● Pour chaque lignée, indiquer le gène modifié et sa fonction :
● Décrire le phénotype de l’animal modifié génétiquement et l’impact
de cette modification génétique sur le bien-être animal (c’est-àdire espérance de vie, capacité de reproduction,
immunocompétence, etc.).
Si le fournisseur de la lignée génétiquement modifiée ne peut pas
fournir les renseignements nécessaires, le chercheur est alors
responsable de les produire et de les fournir au CPA (voir section #1).
● Dans les cas où il est anticipé que le phénotype peut induire de la
douleur ou de la détresse, préciser les moyens qui seront utilisés pour
soulager ou diminuer la douleur et la détresse des animaux :
● Décrire les besoins spécifiques d’hébergement ou de soin en lien avec
ce phénotype (ex : nourriture sur le plancher de la cage) :
ÉVALUATION DU BIEN-ÊTRE ANIMAL DE LIGNÉES DÉJÀ
EXISTANTES
● Y a-t-il des anomalies anticipées ?
● Si oui, précisez les anomalies physiques et comportementales (p. ex.,
agressivité, tremblements, toilettage excessif, etc.) et si elles touchent
les animaux hétérozygotes et/ou homozygotes :
● Dans les cas où il est anticipé que ces anomalies pourraient induire de
la douleur ou de la détresse, préciser les moyens qui seront utilisés
pour soulager ou diminuer la douleur et la détresse des animaux :
● Si vous rencontrez des anomalies non anticipées (ex : problème de
bien-être) ou si un animal meurt d’une cause inconnue :
1-Confirmer qu’’il y aura une observation post-mortem.
2- Confirmer que le CPA sera informé :
● Les utilisateurs d’animaux inscrits à ce protocole possèdent-ils les
compétences requises pour l’utilisation d’animaux modifiés par
génie génétique :
Oui, décrire brièvement l’expérience de l’équipe de recherche :
Non, quelle formation suivront les utilisateurs d’animaux :
Production d’anticorps
*****
Questions?
Animaux sur le terrain
Référence: «Lignes directrices du CCPA sur :
le soin et l'utilisation des animaux sauvages,
2003)».

Annexe: formulaire «Demande de permis SEG
scientifique et certificat de bons soins aux
animaux», du Ministère des ressources naturelles
et de la faune du Québec: www.mrn.gouv.qc.ca,
sous la rubrique permis/autorisations/faune

Permis SEG = permis spécial délivré par le
Ministère pour la capture des animaux sauvages à
des fins Scientifiques, Éducatives ou de Gestion
de la faune.
Localisation des lieux de capture (Joindre une
carte de localisation)
Animaux qui seront capturés
 Espèce
 Nombre maximum Espèce (morts/vivants)
Captures accidentelles
 Indiquer les risques de capture, de blessures ou de
mortalité d’espèces autres que celle(s) visée(s)
 Quelles préoccupations prendra-t-on pour éviter de
capturer des animaux d’autres espèces?
Captures accidentelles (suite)
 Que fera-t-on des animaux capturés
accidentellement? Remis en liberté ou
Euthanasiés?
 S’il s’agit d’une demande de renouvellement, quel
est le nombre d’animaux capturés
accidentellement morts, vivants ou blessés, l’an
dernier?
Modes de capture (ex. : piège, filet, etc.)
 Engin Type ou modèle Quantité
Dimensions/spécifications
Description des procédures (Indiquer les
procédures et manipulations qui seront
effectuées sur les animaux)










Identification
Garde en captivité
Pose d’émetteurs externes
Administration de
médicaments
Poursuite
Capture
Euthanasie
Pose d’implants
Prise de mesures
Contention physique





Transport
Remise en liberté
Marquage
Prélèvement
d’échantillons
biologiques
Contention chimique
Transport



Espèce
Mort ou vivant
Lieu de départ, lieu d’arrivée
Transport d’animaux vivants







Espèce
Nombre
Durée du transport
Mode de transport
Administration de tranquillisant: oui/non
Si oui, nom du produit et posologie
Description sommaire des procédures
Garde en captivité
 Espèce
 Nombre
 Durée
 Endroit de garde
 Type d’hébergement :
– Cage/ Enclos/ Vivier/ Aquarium/ Vivarium/ Autre :

Conditions de garde
– Préciser:
– À l’abri : Des rayons du soleil/ Des précipitations/
Du vent/ Du bruit
– Solitaire/ En groupe
– Eau/ Nourriture/ Litière/ Aération
Garde en captivité (suite)
 À la fin de la garde en captivité, les animaux
seront :
– Euthanasiés
– Remis en liberté:
• À l’endroit même de leur capture
• À un autre endroit, préciser lequel
Capture d’animaux vivants
 Vérification des engins de capture





Recherche active, préciser :
En opération continue et sous surveillance constante
En opération continue et vérifiés à toutes les: __heures
Activités à la brunante et vérifiés à l’aube
Activités à l’aube et vérifiés à toutes les ___heures
Capture d’animaux vivants (suite)
 Utilisation de leurres vivants
–
–
–
–

Si oui, nombre d’individus par espèce et leur provenance
Justifier et préciser leur utilisation
Moyen de transport
Conditions de garde
Au terme du projet, les leurres seront :
– Remis en liberté
– Retournés à leur lieu d’origine
– Euthanasiés

Soins apportés pour assurer le bien-être des
animaux capturés
– Ombre/ Eau/ Nourriture, préciser/ Litière, préciser / Autre
 Mesures prises pour protéger l’animal et le
personnel du risque de transmission de
maladies lors des manipulations
– Port de : Vêtements longs / Visière / Lunettes / Masque /
Gants épais / Gants à usage unique
– Utilisation d’instruments : Stériles à usage unique ou
Désinfectés avant et après chaque utilisation à l’alcool
– Lavage des mains entre chaque manipulation : d’un
animal / d’un engin de capture / à la fin des activités

Avant de quitter un site
– Lavage / Désinfection de tous les équipements en
contact avec l’eau : bottes pantalons de pêche
épuisettes seaux nasses bacs de contention
– Vaccination du personnel contre la : Rage/Autre
– En cas de morsure ou de contact à risque, l’animal
sera conservé afin qu’il soit analysé
 Poursuite
– Durée maximale de la poursuite active :
– Période de repos allouée avant de reprendre la poursuite
du même animal :
– Y a-t-il des risques d’avortement de femelles gestantes?
– Y a-t-il des risques de capturer un animal dont les bois
sont en croissance? Si oui, justifier et décrire
sommairement
– Dans quelles conditions climatiques prévoyez-vous
effectuer la poursuite :

À quel moment l’animal sera recapturé
– À chaque année/ À la fin du projet
– Pour récupérer les données emmagasinées dans l’unité
de stockage du collier/ Pour remplacer un appareil
défectueux/ Pour retirer l’appareil
Contention physique et manipulation
 Travail exécuté par au moins ___ personnes
 Durée totale de la manipulation/contention
 Équipement utilisé
– Aucun, avec les mains/ Unité individuelle de contention :
sac en tissu léger/ bac/ Filet/ Collier muni d’un cran
d’arrêt/ Autre, préciser :

Mesures particulières prises lors de la contention
–
–
–
–
–
Réduction des mouvements et du bruit autour de l’animal
Restriction du mouvement des pattes
Restriction du mouvement de la tête
Animal muselé
Application de gouttes ophtalmiques (lorsqu’un animal est
anesthésié)
– Ruminant placé en position sternale
– Recouvrement des yeux
– Tête de l’animal cachée à l’aide d’un
morceau de tissu
Contention chimique
 Nom du vétérinaire consulté au sujet de
l’administration de tout médicament
 Durée totale prévue de l’immobilisation
 Suivi régulier des signes vitaux (pouls,
respiration, température)
 Produit(s) administré(s)
–
–
–
–
Dose
Voie d’administration
Méthode d’administration
S’il s’agit d’une drogue contrôlée, préciser:
• le numéro du permis d’exemption de Santé Canada
• Et/ou la source d’approvisionnement
Contention chimique


Les animaux sont sous surveillance
constante tant que les effets de
l’immobilisation sont apparents
Dans le cas d’animaux de consommation,
indiquer le délai pendant lequel les animaux
ne peuvent être consommés après
l’administration de tout médicament
vétérinaire

Étiquetage
– Type de marqueurs, Taille, Forme, Instrument utilisé, Emplacement
– Description de la méthodologie
– Effets possibles à long terme

Marquage des tissus
– Type de marqueurs, Instrument utilisé, Emplacement
– Description de la méthodologie
– Effets possibles à long terme

Pose d’émetteurs ou autres appareils
– Type, Dimension, Durée de fonctionnement
– Emplacement de l’émetteur : Cou, Dos, Sous-cutané, Cavité
abdominale, Autre :
– Méthode de fixation de l’émetteur

Préciser si l’émetteur externe : Sera enlevé au terme du suivi
télémétrique ou Se détachera de lui-même à la fin de sa vie
utile
Prélèvements d’échantillons biologiques
 Type, Site de prélèvement, Quantité prélevée Nombre de
prélèvement, Instrument utilisé
 Description de la méthodologie
Procédures chirurgicales
 Lieu où se dérouleront les manipulations chirurgicales, Par
qui, Utilisation d’une table chirurgicale, Durée prévue de la
chirurgie : minutes, Instruments utilisés
 Méthode de désinfection des instruments, Méthode de
préparation du champ opératoire
 Endroit de l’incision, Taille de l’incision, Nombre de points de
suture, Application de colle chirurgicale
 Substance(s) administrée(s) avant, pendant et après la
procédure chirurgicale
 Surveillance postopératoire
 Points limites
*****
Questions?

Conception de formulaires de protocole d`utilisation d`animaux

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