CRP-HS - Wako Chemicals GmbH

CRP-HS
Dosage immunoturbidimétrique
Pour la détermination quantitative de la protéine C réactive dans le sérum humain
Utilisation
Instruments
Le réactif Wako CRP-HS est un dosage immunoturbidimétrique test pour la
détermination quantitative de la protéine C réactive (CRP) dans le sérum humain.
Le réactif peut être utilisé sur les analyseurs automatiques présents sur le marché.
Se reporter à la notice d’application adaptée au système automatisé et aux
spécifications de l’appareil. Il est impératif que l’utilisateur procède à une validation
dans son laboratoire en effectuant des mesures sur un nombre suffisant de sérums
de contrôle appropriés et de sérums de patients.
Intérêt clinique
La protéine C réactive (CRP) a été initialement décrite en 1930 par Tillet et Francis
comme étant le facteur dans le sérum responsable de la précipitation du sérum de
phase aiguë par la substance C (C-Polysaccharide) des parois cellulaires
pneumococcales. Des valeurs élevées de CRP ont été trouvées dans le sang des
patients présentant des maladies accompagnées d’une inflammation ou de
destruction des tissus, particulièrement les maladies rhumatoïdes, les infections
aiguës, les infarctus ou un acte chirurgical, et les affections malignes disséminées
ou les infections chroniques 1. Bien que la CRP ait une structure différente des
immunoglobulines, elles se partagent une composition similaire en acides aminés
ainsi que la capacité à initier diverses fonctions biologiques incluant précipitation,
opsonisation, gonflement capsulaire et agglutination. Ainsi, les méthodes de dosage
immunoturbidimétriques sont récemment devenues les techniques de référence
pour la détermination quantitative de la CRP en chimie clinique de routine.
Standard procedure
Température: 37°C (Hitachi® 717)
Blanc échantillon
0
R1: 330 µl
Conserver à 2-10°C*
Conserver à 2-10°C*
(*Ne pas congeler)
Sérum
< 5.0 mg/l (adultes)
< 10.0 mg/l (Nouveau-nés jusqu’à 3 jours).
Comme les valeurs sont modifiées par de nombreux facteurs tes que l’âge, le sexe,
l’alimentation, la localisation géographique entre autres, il est conseillé à chaque
laboratoire d’établir ses propres valeurs normales.
Avertissements et précautions d’emploi
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•
:
Exactitude: 99 échantillons sériques ont été mesurés avec la méthode décrite et
une méthode néphélémétrique présente sur le marché 4.
Corrélation:exprimée par un coefficient r = 0,991 et une courbe : y = 1,017x – 1,884.
Sensibilité: la limite de détection est de 0,2 mg/dl (20 mg/l).
Spécificité: l’hémoglobine, la bilirubine conjuguée et Intrafat ne donnent pas
d’interférences avec le dosage pour des taux respectifs maxima de 3 g/l, 500 mg/l et 5%.
Précision: les CV intra-série de 5 mesures répétées sont d’au maximum 5% et
2% pour des échantillons de concentrations respectives de 40 à 60 mg/l et de 80
à 100 mg/l.
Les échantillons peuvent être conservés: 3 jours à 25°C
1 semaine à 2-10°C
6 mois congelés
sans effet significatif sur la valeur mesurée.
Le fluorure de sodium et les anticoagulants comme l’oxalate, l’EDTA, le citrate et
l’héparine n’ont aucune influence sur le dosage.
•
2,3
Performances
Recueil et conservation des échantillons
•
Longueur d’onde
Prinicipale: 340 nm
Seconde: 700 nm
Valeurs attendues
20 mmol/l
1,0 mg Ac/ml
R1 : prêt à l’emploi. La solution est stable jusqu’à la date de péremption.
R2 : prêt à l’emploi. La solution est stable jusqu’à la date de péremption.
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R2: 50 µl
Les résultats définitifs sont automatiquement calculés et imprimés en concentration.
Les résultats sont donnés en mg/l et mg/dl.
En cas de calibration multipoints:
Le signal de mesure du test CRP-HS est converti en concentration finale à l’aide
d’une fonction mathématique non linéaire. Le modèle mathématique utilisé pour la
courbe appropriée et son approximation arithmétique dépendent du type
d’analyseur utilisé. Il reste de la responsabilité de l’utilisateur de valider le caractère
approprié de la fonction mathématique retenue.
Préparation des réactifs
•
•
Ï
Résultats
Réactifs
Tampon de Good
Anticorps de chèvre
anti-CRP humaine
14 µl
Mesure
10 (min)
Les applications pour d’autres instruments sont disponibles sur demande.
Des standards adéquats pour la calibration sont disponibles (Voir ci-dessous la
partie Information réactifs).
Lorsqu’un échantillon est mélangé avec les réactifs R1 et R2, la CRP de l’échantillon
se combine de façon spécifique avec les anticorps anti-CRP humaine pour former
un agrégat insoluble qui provoque une augmentation de la turbidité. Le degré de
turbidité peut être mesuré par voie optique; il est proportionnel à la quantité de CRP
présente dans l’échantillon.
Ingrédients
R1 : Tampon (pH7,5)
R2 : Anticorps (pH7,5)
5
Ï Echantillon
Principe
Contenu et conditions de conservation
R1:
Tampon
R2:
Anticorps
È
Limite du dosage
Réactifs pour usage in vitro uniquement.
L’utilisation et l’adaptation de ce dosage sont réservées aux
professionnels. Se référer à la législation en vigueur et aux
réglementations locales ou nationales.
Ne pas utiliser in vivo chez l’homme ou l’animal.
Ne pas mélanger les réactifs de différents lots entre eux.
Ne pas utiliser les réactifs au-delà de la date de péremption indiquée sur
l’étiquette de chaque flacon.
Ne pas utiliser les préparations, les tests, et les réactifs pour autres
applications que celle indiquée et décrite dans cette notice.
R1 et R2 contiennent de l’azide de sodium comme stabilisateur, qui peut
devenir explosif au contact de métaux lourds comme le plomb ou le cuivre.
Pour éviter la formation de ces complexes, et bien que la quantité d’azide
de sodium soit faible, éliminer les réactifs en rinçant avec beaucoup d’eau.
Eviter le contact avec les yeux et la peau. En cas de contact, laver les yeux
à grande eau ou rincer la peau abondamment. Si l’irritation persiste,
consulter un médecin.
Le diagnostic clinique sera établi par un médecin au vu des symptômes
cliniques et des résultats d’autres tests.
Pour éliminer les réactifs, les traiter selon les réglementations locales ou
nationales en vigueur.
Linéarité:
2 - 230 mg/l (calibration avec 180 mg/l)
2 - 280 mg/l
(Calibration multipoint, dépend de la concentration du standard).
Quand la valeur de la CRP dépasse la limite de linéarité, diluer l’échantillon au
1/5ème avec une solution saline, répéter le test et multiplier le résultat obtenu par 5.
En excès d’antigène, un effet de prozone n’apparaît pas pour des concentrations
de CRP inférieures à 400 mg/l.
Références
1.
2.
3.
4.
Whicher, J.: C-reactive protein, in: Clinical Laboratory Diagnostics: use
and assesment of clinical laboratory results/ ed. by Lothar Thomas. –
1. ed.-Frankfurt/ Main 1998, p.700-710.
Proposed ranges Deutsche Gesellschaft für Laboratoriumsmedizin,
March, 24 1995.
Based on CRM 470 standardization.
Th. Pfister, J. Muser, Chr. Heller: Poster: Evaluation of CRP Immunoassay
employing a Highly Purified Antibody against a Nephelometric
Comparison Method.
Information commerciale
Indices physiques ou chimiques d’instabilité
Code N°
419-22007
Produit
Autokit CRP-HS
Contrôle de qualité
419-22016
419-22025
993-00909
00909-6
CRP-HS R1
CRP-HS R2
CRP Standard Set
CRP Standard 6
La présence d’un précipité dans les réactifs, ou les valeurs des sérums de contrôle
en dehors de l’intervalle défini est une indication de l’instabilité du réactif.
Un contrôle de qualité est recommandé pour tous les laboratoires d’analyses.
Fabriqué par:
3
Wako Chemicals GmbH
Fuggerstraße 12, D-41468 Neuss
Telephon(e): +49-2131-311-0
Facsimile:
+49-2131-311-100
URL:
www.wako-chemicals.de
Coffret
R1: 2 x 50 ml
R2: 1 x 15 ml
R1: 4 x 145 ml
R2: 2 x 50 ml
CAL: 5 conc. x 1 ml
CAL: 1 x 1 ml
FR 0607 D8