la plateforme de bio-cristallographie
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la plateforme de bio-cristallographie
Chers Collègues, L’UMS BioCampus Montpellier a maintenant presque 4 ans. Grâce au travail de tous, nous sommes parvenus à mettre en place une structuration des plateformes qui est saluée par nos collègues chercheurs montpelliérains et enviée par beaucoup de ceux qui exercent ailleurs en France. Nous aurons d’ailleurs bientôt l’occasion d’avoir une évaluation extérieure de notre organisation par le comité mis en place par l’INSERM qui nous rendra visite à la fin du mois de septembre. Cette bonne image doit être pour nous un encouragement à poursuivre notre structuration et à regarder ce que nous pouvons encore améliorer. C’est l’un des buts de la ‘’Journée des Plateformes Technologiques’’ que nous organisons pour la deuxième fois cette année et qui s’adresse à l’ensemble des personnels travaillant sur les plateformes, statutaires et CDD, affectés à BioCampus ou aux unités de recherche. La matinée sera l’occasion de parfaire nos connaissances et les responsables de plateformes ont choisi 2 technologies qui leur semblaient particulièrement prometteuses dans le domaine de l’imagerie et pour la génération de modèles animaux. Anna Castro (CRBM) viendra ensuite nous donner le ressenti d’une utilisatrice régulière de plusieurs plateformes. Afin de continuer à proposer aux chercheurs les formations qui répondent le plus à leurs attentes, nous envisageons de faire évoluer les Ateliers Technologiques que vous organisez régulièrement. Geneviève Conéjéro (MRI), en lien avec les responsables de plusieurs autres plateformes, nous présentera ce que pourrait être un atelier technologique d’un genre nouveau. La séance de posters de la fin de matinée sera l’occasion pour chaque plateforme de présenter les nouveautés de son domaine et/ou les nouvelles prestations mises en place. Au cours de l’après-midi nous évoquerons des problèmes ayant trait au fonctionnement quotidien des plateformes : gestion des utilisateurs à travers un portail d’inscription commun, démarche qualité et nouvelles règles de facturation. Enfin, Didier Ritter de la société Acobiom (ex-Skuldtech) viendra nous donner le ressenti des industriels sur le fonctionnement des plateformes académiques. J’espère que cette journée sera pour vous l’occasion de vous informer, d’échanger avec vos collègues des autres plateformes et qu’elle constituera le prélude à une année professionnellement fertile. Au plaisir de vous voir le 5 septembre… Laurent Journot Directeur de BioCampus Montpellier 3 DIRECTEUR Laurent JOURNOT SECRÉTAIRE GÉNÉRALE ET COORDINATRICE GÉNÉRALE Brigitte COUETTE ASSISTANTE COMMUNICATION Sophie MORENO AUTRES PERSONNES AYANT PARTICIPÉES AU BON FONCTIONNEMENT LE JOUR J Gaëlle IBANEZ Anne-Charlotte SAADA Zoely RAKOTOMANGA-RAJAONAH Marine GRIMAL DÉVELOPPEUR WEB Cyril SARRAUSTE de MENTHIÈRE 5 GENOPOLYS Campus Arnaud de Villeneuve 141 rue de la cardonille 34396 Montpellier cedex 5 Avec les transports en commun (TaM) depuis le centre ville : - Tram ligne 1, Direction Mosson, arrêt Occitanie - Bus ligne 6, Direction Euromédecine, arrêt Occitanie En voiture Attention!! Genopolys ne dispose d’aucun parking! Merci de privilégier les transports en commun, ou de vous garer au parking Occitanie. Le portillon d’accès à Genopolys est situé entre le parking Occitanie et la station de tram, sur le trottoir d’en face (portillon blanc). 7 9 8h30 - 9h00 9h00 ACCUEIL CAFÉ Hall - Cafétéria Hall Cafétéria Introduction de la journée par Laurent Journot, Directeur de l’UMS 9h15 Amphithéâtre Nouvelles technologies innovantes : - Système Crisp R (Nadia GUETTARI et Julie MAUTORD, Sigma-Aldrich) (Michel EYBALIN, INM) 10h00 (Anna Castro, CRBM) 10h45 - 11h00 11h00 PAUSE CAFÉ Hall - Cafétéria Ateliers technologiques transversaux : - Vers un pipeline commun pour l’analyse des interactions protéine-protéine (Édouard Bertrand, Responsable de la Plateforme MRI) - Étude des interactions protéine-protéine dans les membranes par protéomique et imagerie. Exemple: aquaporines végétales (Geneviève Conéjéro, Plateforme MRI) 11h45 Hall Cafétéria Séance posters 12h15 - 13h30 13h30 DÉJEUNER Hall - Cafétéria Amphithéâtre Présentation du portail d’inscription pour l’accès aux plateformes (Corine TRAN-AUPIAIS, MRI-TIGR) 14h00 Présentation du service Qualité de l’Unité (Gaëlle IBANEZ, qualiticienne de l’UMS) 14h20 (Laurent JOURNOT, Directeur de l’UMS) 15h00 - 15h30 15h30 PAUSE CAFÉ Hall - Cafétéria Amphithéâtre La relation Client - Fournisseur (Didier RITTER, Directeur d’Acobiom) 16h00 Conclusion de la journée par Laurent Journot 11 1 LA MISE EN PLACE D’UN SYSTÈME DE MANAGEMENT QUALITÉ AU SEIN DE LA PLATEFORME TECHNOLOGIQUE DE PHARMACOLOGIE ET D’ANALYSES DE COMPLEXES PROTÉIQUES (ARPEGE) Gaëlle IBANEZ Administration ARPEGE, plateforme de Pharmacologie et d’Analyses de Complexes Protéiques, est labellisée IBiSA depuis 2008. Elle fait partie de l’unité mixte de services «BioCampus Montpellier». Elle est composée d’un plateau technique dans lequel travaillent 4 personnes. Elle est spécialisée dans l’analyse à moyen débit des interactions moléculaires, (protéine-protéine, protéine-ligand, enzyme-substrat, messager-récepteur) basées sur les principes de fluorescence et de transfert d’énergie par résonnance. Le périmètre de la certification comprend la « Recherche, expertise et prestations en analyse pharmacologique, criblage et interactome dans le domaine de biologie » selon la norme ISO 9001 version 2008. Une Politique Qualité a été définie par le responsable de la plateforme et présentée à tout le personnel concerné. L’animation et le suivi mensuel de l’avancement de la démarche qualité, est réalisé en externe à la plateforme par la Responsable Management Qualité de l’unité «BioCampus Montpellier». Une description des étapes clés de la construction du Système de Management de la Qualité est présentée en dernière partie du poster. 14 2 PORTAIL D’INSCRIPTION BIOCAMPUS Corine TRAN-AUPIAIS, Volker BÄCKER, Olivier MIQUEL, Stéphanie VAUDESCAL, Stéphane LABORIE, Sylvie JULIEN Administration Le site de Montpellier compte 12 plateformes technologiques dans le domaine des Sciences du vivant. Nombre d’entre elles sont labellisées IBiSA, certaines sont certifiées ISO 9001, montrant ainsi le haut niveau de qualité des services rendus dans leurs domaines de compétence, leur activité principale. Elles se retrouvent ensemble dans une structure adaptée, l’Unité Mixte de Service BioCampus Montpellier (BCM), afin de soutenir la production de données et de résultats pour le secteur académique ou industriel. Par contre, et principalement par manque de moyens humains, la plupart des plateformes n’ont pas pu développer leurs activités de soutien comme elles l’auraient souhaité. Dès lors, BioCampus a manifesté son intérêt pour une structuration commune des activités de soutien de ses plateformes et leur standardisation avec pour objectif l’amélioration et la simplification de l’accès utilisateur, en même temps, bien sûr, qu’une optimisation des performances de leurs activités principales. Sous l’égide de la Direction de BCM, la première brique du système d’information de l’Unité est née avec la création d’un portail d’inscription des utilisateurs pour le compte des plateformes. Ce portail est donc la porte d’entrée pour l’utilisation des prestations proposées par les plateformes. L’équipe TIGR (Technologie Informatique et Gestion des Ressources), grâce à l’expérience en mise en œuvre de système d’information pour le compte de la plateforme MRI, a proposé et conçu ce portail. Avec le soutien de l’UMS, celui de la plateforme MRI et la participation de toutes les plateformes, ce portail est maintenant mis à disposition de la communauté : www.portail.biocampus.cnrs.fr 15 3 IMGT/HIGHV-QUEST FOR NGS ANTIBODY REPERTOIRE ANALYSIS Véronique GIUDICELLI, Eltaf ALAMYAR, Géraldine FOLCH, Joumana JABADO-MICHALOUD, Patrice DUROUX, Marie-Paule LEFRANC IMGT: the international ImmunoGeneTics information system (IGH) / Bioinformatique (IMGT) IMGT®, the international ImMunoGeneTics information system® (http://www.imgt.org) created in 1989 at Montpellier, France, by Marie-Paule Lefranc (CNRS and Université Montpellier 2), is at the birth of immunoinformatics. IMGT® manages the immunogenetics data, and more particularly the sequences, genes and structures of immunoglobulins (IG) or antibodies and T cell receptors (TR). Standardization and data integration are obtained through the IMGT-ONTOLOGY concepts of identification (IMGT standardized keywords), classification (IMGT standardized nomenclature: IMGT gene and allele names approved by HGNC and used by NCBI Gene), description (IMGT standardized labels) and numerotation (IMGT unique numbering and IMGT Colliers de Perles: widely used for antibody engineering and humanization). IMGT® comprises seven databases (including IMGT/mAb-DB), seventeen tools and more than 15,000 pages of Web resources. To answer the needs of high throughput and Next Generation Sequencing (NGS) data, the IMGT/HighV-QUEST tool was developed which analyses up to 500,000 long sequences (e.g., from 454) 1 by run . The results, based on IMGT-ONTOLOGY, include identification of the closest germline genes and alleles for genotype and haplotype analysis, and standardized characterization of the ‘IMGT clonotypes (AA)’ for antibody clonal diversity and expression and achieve, for the first time, a degree of resolution for NGS verifiable by the user at the sequence level. Amino acid frequency can be determined at each CDR-IMGT and FR-IMGT positions. This tool provides a paradigm for IG clonal diversity and expression repertoire analysis from NGS and high resolution results for antibody engineering and combinatorial library construction. ____________________ [1] Nat. Commun. 4:2333 (2013) PMID: 23995877 16 4 PLATEAU UNIFIÉ DE BIO-INFORMATIQUE STRUCTURALE Gilles LABESSE, Jean-Luc PONS, Jérôme GRACY, Muriel GELIN Plateforme Intégrée de Biologie Structurale (PIBS) / Bio-informatique Structure Nous présenterons les possibilités offertes par notre plateau de bio-informatique structurale pour la modélisation macromoléculaire tridimensionnelle et le criblage virtuel de petites molécules que nous avons récemment parallélisé pour l’appliquer sur des ensembles conformationnels de cibles thérapeutiques. 17 5 LA PLATEFORME DE BIO-CRISTALLOGRAPHIE Jean-François GUICHOU, Stefano TRAPANI, François HOH, Muriel GELIN Plateforme Intégrée de Biologie Structurale (PIBS) / Plateau Bio-cristallographie La plate-forme de Bio-cristallographie fait partie du CBS. Elle se décompose en deux parties. La première concerne la cristallogenèse. La seconde partie découle naturellement de la première et concerne la diffraction, la détermination des structures 3D et leur affinement. Mission Cette plate-forme est une structure d’accès privilégié pour les équipes du CBS, mais également ouverte aux équipes extérieures. Sa mission première est de suivre et superviser la réalisation de projets nécessitant l’approche de la Bio-Cristallographie. Il s’agit notamment : d’assurer et d’encadrer l’accès aux appareillages de mesures (le robot de cristallisation, le diffractomètre sur place et au synchrotron) d’évaluer la faisabilité (temps, coût..) des projets présentés et de fixer les priorités ; de définir les moyens à mettre en œuvre; d’assurer les opérations de collecte des données et de leur traitement ; d’assurer le suivi des projets ; Cristallogenèse Nous offrons la possibilité de tester plus de 2200 conditions de cristallisations, grâce à l’utilisation d’un robot de dispense de nano-gouttes. Si ces premiers tests aboutissent à des (micro-)cristaux, des criblages autour des conditions de cristallogenèse pourront être effectués afin d’améliorer la qualité et la taille de des cristaux. Détermination de Structures L’obtention de cristaux ayant un pouvoir diffractant d’au moins 3 A, permettra d’envisager la détermination de la structure. La résolution de la structure sera effectuée par remplacement moléculaire. 18 6 SCREENING OF AN IMMOBILIZED LIBRARY OF COMPOUNDS USING IN SITU DIFFRACTION Gilles LABESSE, Muriel GELIN, François HOH, Jean-Luc FERRER, Jean-François GUICHOU Plateforme Intégrée de Biologie Structurale (PIBS) / Plateau Bio-cristallographie Fragment Based Drug Design (FBDD)1 has emerged as an alternative to High Throughput Screening (HTS) as an initial step for drug discovery. FBBD is based on identifying small chemical molecules - called fragments - which bind usually weakly to their biological target due to their small size. Binding detection by X-ray crystallography provide valuable informations to guide the growth or combination of bound fragments into improved lead compounds with higher affinity. However, this remains a low-throughput approach. In parallel, in situ diffraction technique is nowadays considered as a breakthrough in protein crystallogra2,3 phy . It actually allows the rapid analysis of macromolecules crystals still in their crystallization media, without the need for handling crystals. It is also amenable to automatization. The merging of these two techniques leads to a novel approach for ligand screening by X-ray crystallography. We shall described in detail the co-crystallization process set up in 96-well plates. Applications to various tests cases including several therapeutic targets will be highlighted. Further developments to fully automatize the procedure will be discussed. ____________________ [1] Kumar et al. (2012) Current Medicinal Chemistry 19, 5128-5147. [2] Ferrer et al. (2013) Expert Opinion on Drug Discovery 7, 835-847. [3] le Maire et al. (2011) Acta Cryst. D67, 747-755. 19 7 PRÉSENTATION DU PLATEAU TECHNIQUE DE RMN André PADILLA, Philippe BARTHE, Pau BERNARDO, Martin COHEN-GONSAUD, Hélène DÉMÉNÉ, Karine de GUILLEN, Christian ROUMESTAND, Nathalie SIBILLE, Yinshan YANG Plateforme Intégrée de Biologie Structurale (PIBS) / R.M.N. Le plateau technique de spectroscopie RMN de la Plateforme Intégrée de Biologie Structurale (PIBS) est situé au Centre de Biologie Structurale (CBS). L’accès aux équipements (spectromètres et stations informatiques de traitement) est ouvert aux laboratoires de recherches publics ou privés. Le plateau de RMN dispose d’un parc de très haut niveau, régulièrement mis à niveau, composé de 3 spectromètres RMN : Bruker 500 MHz, 600 MHz et 700MHz. Le 500 et le 700 MHz sont équipés de cryo- sondes et peuvent analyser des quantités faibles (30 nmol) d’échantillons en solution. Le 600 MHz est équipé d’un système haute pression qui est utilisé pour les études du repliement des protéines. Le plateau technique de RMN est ouvert aux laboratoires publics ou du secteur industriel. Selon la complexité de l’analyse, de l’expertise des utilisateurs ou de leurs souhaits, le plateau de RMN propose des services allant de la simple mise à disposition des équipements à la prestation de service complète. Nous vous invitons à nous contacter pour étudier votre projet qu’il soit dans le cadre d’une prestation ou d’une collaboration scientifique. 20 8 PLATEAU D’EXPLORATION FONCTIONNELLE SENSORIELLE ET MOTRICE DE L’INM Anne-Laure BONNEFONT, Jérôme SARNIGUET, Marc LENOIR Élevage et exploration fonctionnelle (RAM) / Exploration fonctionnelle sensorielle et motrice. (Site St Eloi) Le plateau d’Exploration Fonctionnelle Sensorielle et Motrice est spécialisé dans l’analyse de modèles in vivo, essentiellement murins, reproduisant les grandes pathologies sensorielles et motrices affectant l’humain : cécités, surdités, acouphènes, vertiges, douleur, déficits locomoteurs et articulaires. Il est situé dans les locaux de l’animalerie de l’INM, qui accueille différentes espèces de rongeurs sur une surface totale de 450 m² divisée en deux secteurs de confinement (A1 et A2) et héberge les modèles expérimentaux des deux unités INSERM présentes à l’INM (844 et 1051) et de l’Institut de Médecine Régénératrice et de Biothérapies (IRMB). Le plateau d’exploration fonctionnelle se répartit sur 5 salles indépendantes les unes des autres et a deux objectifs principaux : 1. Explorer la fonction des systèmes articulaires, locomoteurs, visuels, auditifs, et somesthésiques 2. Développer des protocoles de thérapie cellulaire et génique dans le cadre d’essais pré-cliniques. Le plateau est équipé de systèmes d’analyse comportementale et électrophysiologique de pointe : Locomotion : Catwalk, open-field automatisé, video-tracking automatisé, rotarod, tapis roulant. Proprioception et nociception : gradient thermique, plaque chauffante, Von Frey dynamique, Randall-Sellito, analgésie plantaire, balance pondérale Equilibre : test vestibulo-oculaire . Vision : Opto-cinétique, imagerie par tomographie, fond d’œil, potentiels évoqués visuels, électrorétinographe Audition : Potentiels évoqués auditifs, produits de distorsions acoustiques. Il fait partie du Réseau des Animaleries de Montpellier (RAM), plateforme de l’UMS Biocampus. Il est ouvert à l’ensemble de la communauté scientifique académique et privée pour héberger des modèles animaux et phénotyper leurs capacités sensorielles et motrices 21 9 ZONE PROTÉGÉE A (ZPA) : CENTRE D’ÉLEVAGE ET DE PRODUCTION DE SOURIS Sandie MENNECHET, Ana Bella AZNAR, Eric JOUFFRE, Arnaud LECLER, Guillaume VASSEUR Élevage et exploration fonctionnelle (RAM) / Transgenèse et Technologies Associées. (Site Route de Mende)w La ZPA, animalerie de confinement A1 de 650m² de statut SOPF (Specific and Opportunistic Pathogen Free) est dédiée à l’élevage. Elle peut accueillir 15 000 souris (taux d’occupation actuel de 25%) avec une possibilité d’extension. Inaugurée en septembre 2012, La ZPA est ouverte à l’ensemble de la communauté scientifique montpelliéraine. L’équipe zootechnique a en charge plus de 100 lignées murines et elle produit et constitue les lots expérimentaux, pour les scientifiques travaillant sur différents sites de recherche montpelliérains (CRBM, DIMNP, IGF, IGH, IGMM, IRCM, U1046). Afin de conserver le statut SOPF, les souris devant entrer dans cette zone sont systématiquement redérivées et sont ensuite hébergées uniquement en portoirs ventilés avec un change sous hotte. Etant donné la capacité d’accueil importante, une attention particulière a été apportée sur les conditions de travail de l’équipe zootechnique : automatisation d’une partie de la laverie, matériel produit sur mesure, bruits environnants réduits au maximum. 22 10 ZONE PROTÉGÉE B : ANIMALERIE D’EXPÉRIMENTATION DU CAMPUS ROUTE DE MENDE Sandie MENNECHET, Sarah COUDERC, Marc PLAYS, Melody CHAVERNAC, Thomas MARTINEZ, Alexandre MINEIKOS Élevage et exploration fonctionnelle (RAM) / Transgenèse et Technologies Associées. (Site Route de Mende) La ZPB, animalerie de confinement A1 de 150m², est la structure historique de l’IGMM, de statut SPF (Specific Pathogen Free). Cette zone a une capacité d’accueil maximale de 5000 souris. Elle est orientée sur l’expérimentation animale bien que de l’élevage y soit encore réalisé. Les souris immunodéficientes peuvent être manipulées dans la ZPB qui est équipée de portoirs ventilés, hotte de change et PSM. L’animalerie héberge essentiellement les souris des équipes scientifiques de la route de Mende. 23 11 LE SERVICE CRYO DU RAM : UN SUPPORT OPÉRATIONNEL POUR LA CRYOPRÉSERVATION, LA REVITALISATION ET LA REDÉRIVATION DE LIGNÉES MURINES GÉNÉTIQUEMENT MODIFIÉES Anne SUTTER, Laurent LE CAM Élevage et exploration fonctionnelle (RAM) / Transgenèse et Technologies Associées. (Site Route de Mende) Le service CRYOpréservation/redérivation du réseau des animaleries montpelliéraines (RAM), a pour principales missions la cryopréservation, la revitalisation, et la redérivation des lignées de souris génétiquement modifiées. Ouvert en octobre 2013, le service propose des prestations de service dans le domaine de la cryopréservation de lignées sous forme de sperme ou d’embryons et assure l’archivage et le stockage à long terme de ces paillettes sur 2 sites distincts pour plus de sécurité. La cryopréservation apporte une solution d’intérêt pour la sécurisation des projets de recherche mais également pour la rationalisation des lignées qui ne sont plus utilisées activement. Elle permet de réduire très significativement les coûts de maintien d’une lignée moins utilisée. Le service du RAM assure la congélation de vos lignées selon des protocoles standardisés en intégrant des contrôles qualités adéquats réalisés par fécondation in vitro (FIV). La FIV constitue par ailleurs une méthode de choix pour la redérivation et l’import de lignées ne présentant pas le statut sanitaire adéquat. L’échange de lignées entre chercheurs et l’importation de nouvelles lignées dans le réseau RAM peut également se faire par le biais de ces paillettes congelées. La lignée pourra être revitalisée à la demande des utilisateurs par FIV ou transfert d’embryons. Le service CRYO du RAM propose également de gérer les exports de ces lignées vers des collaborateurs éventuels. Enfin, dans le cadre de ses missions visant à favoriser les collaborations entre équipes de recherche académiques, le service CRYO du RAM centralise les informations associées aux lignées cryopréservées. Un fichier centralisant les informations associées aux lignées Cre et aux lignées rapporteurs (GFP, b-Gal, etc...) qui ont été congelées sera diffusé au sein du réseau RAM, dans le respect de la confidentialité associée aux projets de recherches, des utilisateurs de ces lignées, et des règles administratives régulant leur utilisation (MTAs). 24 12 LA DÉMARCHE QUALITÉ DANS DES INFRASTRUCTURES CONFINÉES DE NIVEAU DE SÉCURITÉ BIOLOGIQUE 3 : RETOUR D’EXPÉRIENCES. Jacques-Damien ARNAUD, Maria-Teresa ALVAREZ, Nadine MESTRE-FRANCES, Laurent LE CAM, Gaëlle IBANEZ Élevage et exploration fonctionnelle (RAM) / Établissement Confiné d’Expérimentation. (Site Triolet) L’Établissement Confiné d’Expérimentation (ECE) est l’un des plateaux techniques du Réseau des animaleries de Montpellier (RAM BioCampus Montpellier). L’ECE a décidé de mettre en œuvre dès 2012 une démarche qualité afin garantir la maîtrise des risques biologiques et accroître son rayonnement. L’expertise de la qualiticienne de l’UMS BioCampus Montpellier a facilité la mise en place de cette démarche qualité selon la norme ISO 9001 version 2008. Les difficultés rencontrées ont été de convaincre et de sensibiliser l’ensemble du personnel et des utilisateurs du plateau, de comprendre et assimiler la norme ISO 9001 et l’adapter à notre fonctionnement. Les différents audits réalisés nous ont aidé à dépasser ces difficultés et ont été source d’amélioration ainsi que de nouvel élan. Actuellement, les premiers bénéfices de cette démarche sont : une meilleure écoute des utilisateurs (ce qui nous permet de répondre au mieux à leurs besoins en tant que plateau) une meilleure prise en compte des dysfonctionnements qui est source d’amélioration. L’objectif est maintenant d’étendre cette démarche qualité au niveau des autres plateaux techniques du RAM. 25 13 LABORATOIRE TRANSCRIPTOME IRMB Véronique PANTESCO Plateforme MGX / Puces à ADN Affymetrix (IRB) Activité La plate-forme est impliquée dans : • La Classification et l’Identification fine de marqueurs pronostics pour le myélome multiple et les leucémies aiguës. • La mise en évidence de bio-marqueurs dans les cellules du Cumulus pour apprécier la qualité embryonnaire en fécondation in vitro. • Recherche d’Anomalies Génétiques de petite taille pour les cas d’autisme et/ou retard mental (karyotype moléculaire). • La Détection de polymorphismes ou de mutations au niveau des gènes Cancer. • La Cartographie des zones de fixation de protéines sur la chromatine et l’étude des phénomènes épigénétiques. • L’analyse des variants génétiques parmi les 231 gènes intervenant lors du métabolisme et du transport des drogues. • L’identification des petits ARNs régulateurs. • L’identification de variants génétiques de Plasmodium falciparum (paludisme) chez des patients en rechute après traitement et rémission. • Des études qui touchent l’environnement et la survie en milieu pollué: l’analyse phylogénétique de bactéries commensales du tube digestif de poissons exotiques en milieu hostile (pollué). • Une évolution vers l’analyse Single Cell (transcriptome par PCR et/ou séquençage sur cellule unique) Les Offres : • Analyse de la qualité des ARNs totaux • Biopuces Affymetrix pangénomiques – miRNA v4 – Transcriptome à partir de 600pg d’ARN total • Biopuces Affymetrix – Cytogénétique : Cytoscan HD ou SNP6 – OncoScan (FFPE) – DMET (Drug Metabolism & Transport) • Prestation Single cell Fluidigm - PCR 96 X 96 (sur cellule unique) • Analyse bioinformatique Les Équipements : Nanodrop (1ng/μl) - Fluorospectrophotomètre (1pg/μl) - BioAnalyzer 2100 d’Agilent - robot Qiacube purificateur d’acides nucléiques et de protéines - Station GeneChip d’Affymetrix 3000 7G pour puces cartridge - Station GeneAtlas d’Affymetrix pour strips de puces - Système Fluidigm comprenant : un système C1 – HX (96puits) - MX (48puits) - un Biomark 26 14 PHÉNOTYPAGE DES SOURIS DE LABORATOIRE : EXAMEN HÉMATOLOGIQUE Charlène BERTHET, Yoan BUSCAIL, Malik LUTZMANN, Sandrine HILAIRET, Charles BRET, Nelly PIROT, Florence BERNEX Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier (RHEM) / Plateau central de l’IRCM Les souris génétiquement modifiées sont de plus en plus utilisées en recherche pour modéliser, comprendre et soigner les maladies humaines. L’analyse phénotypique de ces modèles, en particulier leur analyse histologique, est devenue incontournable. Pour dépister des anomalies sanguines, une analyse tissulaire seule est insuffisante, elle nécessite d’être complétée par une analyse hématologique. Pour proposer cet examen hématologique à ses chercheurs, le Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier (RHEM) a développé, à l’aide d’un automate dédié, une procédure d’obtention de la Numération et Formule Sanguine (NFS) sur du sang provenant de modèles murins. Cette analyse sanguine permet, sur une faible quantité de sang, d’obtenir rapidement une analyse quantitative (numération) et qualitative (formule) des cellules sanguines, tels que les globules blancs, globules rouges, plaquettes ou encore mesure le taux d’hémoglobine et l’hématocrite. A l’analyse sanguine nous associons un frottis sanguin qui va permettre d’observer les cellules sanguines et de dépister des anomalies de forme et/ou de taille des cellules, ainsi que la présence de cellules anormales. Des colorations spéciales ont été développées, telles que la coloration de May-Grünwald Giemsa qui permet de distinguer morphologiquement les cellules sanguines et la coloration au bleu de Crésyl Brillant qui met en évidence les réticulocytes. Nous présenterons la méthodologie mise en place, puis nous discuterons les applications d’un examen hématologique par l’illustration de l’analyse de modèles de souris génétiquement modifiées présentant des anomalies hématologiques. 27 15 PLATEAU DE L’IRCM APPARTENANT AU RÉSEAU D’HISTOLOGIE EXPÉRIMENTALE DE MONTPELLIER Nelly PIROT, Yohan NOËL, Charlène BERTHET, Yoan BUSCAIL, Joëlle SIMONY-LAFONTAINE, Florence BERNEX, Laurent LE CAM Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier (RHEM) / Plateau central de l’IRCM Le Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier (RHEM) est un réseau de plateaux techniques de plusieurs instituts de recherche Montpelliérains dédiés à l’analyse histologique des modèles expérimentaux. Parmi les 6 plateaux, 2 dits «centraux», celui de l’Institut de Recherche en Cancérologie de Montpellier (IRCM) et celui de l’Institut des Neurosciences de Montpellier (INM), proposent, en plus de la mise à disposition d’équipement, des prestations de services. Plus précisément, les missions du plateau d’histologie de l’IRCM sont : de proposer des prestations de services (inclusion, coupes, colorations, immunomarquages) dans le domaine de l’histologie expérimentale et plus principalement sur échantillons inclus en paraffine, de développer de nouvelles techniques histologiques (colorations spéciales, technologie des « Tissue Micro Array »), - de conseiller et former, de mettre à disposition des appareils et des consommables, d’archiver et valoriser les ressources biologiques. Par ailleurs, depuis janvier 2012, une expertise anatomopathologique est proposée aux utilisateurs. 28 16 LA PLATEFORME D’HISTOLOGIE DE L’INSTITUT DES NEUROSCIENCES DE MONTPELLIER (INM) Chantal RIPOLL, Marisa TEIGELL, Isabelle SASSETI, Rachelle FOUGÈRE, Jean-Philippe HUGNOT Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier (RHEM) / Plateau central de l’INM La plateforme d’histologie de l’Institut des Neurosciences de Montpellier (INM) appartient au Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier RHEM dédié à l’analyse histo-pathologique des modèles expérimentaux. Cette plateforme est ouverte à toute personne ayant des besoins occasionnels ou permanents en histologie expérimentale, notamment dans le domaine des neurosciences. L’originalité est de fournir une solution complète, allant de la préparation des échantillons biologiques jusqu’à leur analyse sur un même site, avec une expertise particulière dans le domaine des Neurosciences, le système nerveux central et périphérique incluant les organes des sens (vision, audition, somesthésie). La plateforme d’Histologie de l’INM propose aux différents acteurs scientifiques académiques et privés, une large palette de méthodes d’étude en histologie photonique et électronique, des compétences et l’accès à des équipements de qualité. 1. Mise à disposition d’appareillages, de consommables, de postes techniques : La plateforme RHEMINM propose également du matériel et des réactifs, ainsi que de l’espace de laboratoire pour la réalisation des expériences par simple réservation sur le site RHEM. Les utilisateurs ont à leur disposition des protocoles, fiches informatives des produits ainsi que l’expertise du personnel sur place. 2. Prestations de service en cryosection : prise en charge de l’échantillon, congélation, coupes à congélation : reconstitution de la totalité de l’organe sur lame. 3. Prises en charge de projets « de l’animal à l’observation » : perfusion intracardiaque, dissections, inclusions, coupes, mise au point d’Immunomarquages. 4. Enseignement et formation : Formations à la carte des utilisateurs aux techniques de microscopie photonique et électroniques. Formations nationales dispensées depuis 2010 dans le cadre de la Formation Permanente de l’INSERM, Ateliers BioCampus en 2015. 29 17 PRISE EN CHARGE DE PROJET EN HISTOLOGIE PAR LA PLATEFORME RHEM-INM Marisa TEIGELL, Isabelle SASSETI, Rachelle FOUGÈRE, Chantal RIPOLL, Jean-Philippe HUGNOT Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier (RHEM) / Plateau central de l’INM La plateforme d’Histologie du RHEM-INM propose la prise en charge de projets, afin de répondre aux besoins des utilisateurs académiques ou privés. Grâce à la qualification et l’expérience du personnel, notre structure permet la réalisation complète (ou partielle) d’un projet histologique complet débutant par la prise en charge de l’animal (vivant ou non) jusqu’à la prise d’images, avec, à disposition, une gamme de techniques et protocoles histologiques validés. La plateforme possède notamment une expertise dans l’histologie du système nerveux central et périphérique incluant les organes des sens (vision, audition, somesthésie). Les projets sont discutés et planifiés lors de rendez-vous avec les utilisateurs afin d’optimiser les méthodes et le temps de réalisation. Un devis provisoire est ensuite établi ; le protocole expérimental pourra être modifié en fonction de l’évolution des résultats. Les lames peuvent être observées sur site, en microscopie optique à fond clair et en fluorescence, les résultats sont ensuite interprétés au cours de réunions avec le responsable technique et scientifique du plateau. 30 18 BIOLOGICAL IMAGE ANALYSIS WITH IMAGEJ MACRO TOOL SETS Volker BÄCKER Montpellier RIO Imaging (MRI) / TIGR At the imaging facility Montpellier RIO Imaging we create custom solutions for image analysis and automation tasks based on ImageJ in the form of ImageJ macro tool sets. Macro tool sets are easy to install, provide a simple graphical interface, allow to set options and can call plugins for more complex tasks. The first button of each tool set opens the help and installation page of the tool set on the wiki of the facility’s project management and task-tracking tool. The wiki contains installation and usage instructions, the tool set macro, links to plugins and other dependencies and example images. A tool set often contains a manual version of the macro that can be used to test the macro on the current image and a batch version that will run the same macro on a set of images. The tool sets for biological image analysis include: adipocytes multi-well arabidopsis seedling images color of artemia bacteria colonies segment like objects intensity ratio between nuclei and cytoplasm virus infections in leaves cell surfaces in transmission or phase contrast images rosettes of arabidopsis plants microtubules in 3D images plant roots interdigitation index and thickness in skin images wound healing. manual particle tracking segmentation of nuclei (separation of touching objects) The tool sets concerning the workflow include: cropping of regions from big images conversion of image formats navigation within a set of images transformation of ROIs order of ROIs in the ROI-manager 31 19 THE MRI SCREENING FACILITY Julien BELLIS, Cédric HASSEN KHODJA, Virginie GEORGET, Frédéric LIONNETON, Edouard BERTRAND Montpellier RIO Imaging (MRI) / Département Optique : MRI-CRBM The MRI-CRBM screening facility aims at providing a service to screen various libraries (drugs, siRNA) on plate compatible models for the Montpellier scientific community. The major goal of the facility is to provide a complete service from libraries management, plate handling to data acquisition and statistical data analysis. A specificity of the service is the automated image analysis of cellular/subcellular events. The facility is equipped with a Tecan robot allowing extensive 96 well plates handling capabilities (pipeting, washing, mixing, dilution) and plate reading thanks to an INFINITE F500 Tecan plate reader directly connected to the robot. In addition the facility is equipped with a cell dispenser (Multi-drop from Thermo) and an automated microscope (Arrayscan Cellomics from Thermo). The Arrayscan comes with an integrated image analysis software allowing image analysis in parallel to image acquisition. Image analysis can also be performed in a separate fashion after acquistion using free softwares such as CellProfiler. Measurements extracted from the image analysis are then used for statistical analysis and hits identification. Data analysis is performed using R, a free and open source software. An html report can be generated to summarize the results. Since the facility provides a plate handling service based on automation of the pipetting steps it can be used for siRNA based screens but also for chemical libraries screens. The service is located in the CRBM building on the CNRS campus and welcomes any projects requiring automation of plates handling. In the near future we plan to interact more closely with others screening services available in Montpellier to share tools developed at the facility. The facility is funding through the France Bio Imaging (FBI) iniative. 32 20 IMAGERIE NON-LINÉAIRE POUR LA DÉTECTION DE MOLÉCULES SANS FIXATION ET SANS MARQUAGE Hassan BOUKHADDAOUI, Julie BAPTISTE, Amal RZIGUI, Corinne SONRIER, Chamroeun SAR, Jean VALMIER, Nicolas TRICAUD Plateforme Montpellier RIO Imaging (MRI) / Département Optique : MRI-INM La microscopie multiphotonique est un outil puissant dans l’imagerie profonde des tissus et permet grâce à la richesse des phénomènes non linéaires qu’elle peut générer, d’obtenir des informations morpho-fonctionnelles sur un tissu, sans nécessiter aucun marquages. L’objectif de ce projet est d’utiliser le nouveau microscope multiphotonique OPO localisé à l’INM pour développer une méthode permettant l’observation de phénomène in vivo sans marquage. En plus des signaux de fluorescence produits par le processus d’excitation multiphotonique, les phénomènes non linéaires, tels que la génération de seconde et troisième harmonique (SHG et THG), fournissent des informations utiles sur les propriétés optiques de l’architecture tissulaire et cellulaire. Nous avons voulu développer une technique d’imagerie, destinée à l’in vivo, permettant de visualiser les changements structuraux, sans marquages. Nous nous sommes tournés vers l’imagerie multiphotonique qui permet de visualiser le collagène, la myéline, les lipides et autres structures, par génération de seconde et troisième harmonique, apportant ainsi des informations morpho-fonctionnelles sans nécessiter de marquages. La détection de ces phénomènes non linéaires peut être réalisée simultanément et en parallèle avec des marquages fluorescents, ce qui permet d’obtenir plusieurs informations (jusqu’à 4 sur notre microscope) sur un même échantillon de tissu. Enfin la possibilité de détecter les molécules sans marquage permet dans certaines conditions l’analyse d’échantillons ou d’organismes non fixés. 33 21 OMERO: A NEW WAY TO MANAGE AND ANALYZE BIOLOGICAL MICROSCOPY DATA Julio MATEOS-LANGERAK, Volker BAECKER, Marc LARTAUD, Julien BELLIS, Olivier MIQUEL, Corine TRAN-AUPIAIS, Amelie SARRAZIN, Julien CAU, Geneviève CONÉJERO, Edouard BERTRAND Plateforme Montpellier RIO Imaging (MRI) Microscopy core facility users are often confronted with the complexity of the digital imaging era. Digital imaging has obvious advantages, but the large amount of data and the complexity of file formats and analysis tools available requires a centralized storage and management solution. Common practice is the use of poor solutions in terms of data security, integrity and traceability. OMERO is an open-source clientserver software that handles scientific images in a secure central repository. It allows to view, organize, analyze and share data from anywhere with Internet access, work with the images from a desktop application (Windows, Mac or Linux), from the web or from 3rd party software. At MRI we are offering OMERO to users as a professional solution to manage and analyze their data in a centralized, non destructive and file format agnostic way. Here we summarize the advantages and features of working with OMERO as well as the prospects of its framework. OMERO is developed by the OME consortium, a joint project between universities, research establishments, industry and the software development community. MRI is involved in the development of OMERO and will adapt the existing tools to fit the specific needs of the Montpellier users community. 34 22 LE DÉPARTEMENT DE CYTOMÉTRIE DE MRI Nadia VIÉ, Myriam BOYER-CLAVEL, Yann BORDAT, Emilie LOPEZ, Christophe DUPERRAY, Amélie SARRAZIN Plateforme Montpellier RIO Imaging (MRI) / Département Cytométrie : MRI-IGMM Au sein de la plate-forme technologique Montpellier Rio Imaging (MRI), l’une des plateformes de l’UMS Biocampus Montpellier, le département de cytométrie propose deux services de tri cellulaire gérés par un opérateur et met à disposition 10 analyseurs incluant la formation et l’assistance des utilisateurs. Les analyseurs présents sur le département permettent la détection de 3 à 18 paramètres pour des applications telles que les marquages de surface, les marquages intracellulaires, la viabilité, l’apoptose, la détection de la GFP, le cycle cellulaire… Cette offre est répartie sur 5 instituts : IRCM, IRMB, IGMM, DBS, IGH. 35 23 L’IMAGERIE DU VIVANT AU SEIN DE LA PLATEFORME IMAGERIE DU PETIT ANIMAL DE MONTPELLIER (IPAM) Muriel BUSSON, Chrystel LAFONT, Charlotte FARAH, Sylvain RICHARD, Antonio MARAVER, Patrice MOLLARD Imagerie du Petit Animal (IPAM) / Bioluminescence et Scintigraphie (IRCM) L’imagerie préclinique in vivo offre des moyens exceptionnels pour la recherche en sciences du vivant et le développement de nouvelles stratégies médicales. La plateforme Imagerie du Petit Animal de Montpellier (IPAM) regroupe des plateaux techniques permettant l’imagerie physiopathologique des petits animaux. La plateforme est ouverte aux équipes académiques et industrielles. Ses modalités d’imagerie complémentaires fournissent des informations anatomiques, moléculaires et fonctionnelles, dans le temps et dans l’espace (4D). Elle étudie des structures de toutes les tailles (du μm au m), et de la cellule à l’organisme entier. IPAM propose des services de développement, d’encadrement et de prestations d’imagerie sur 3 plateaux : - Imagerie de Fluorescence haute résolution (IGF, Patrice Mollard & Chrystel Lafont), Echographie & physiopathologie cardiovasculaire (U1046 INSERM, Sylvain Richard & Charlotte Farah), Bioluminescence, SPECT-CT (IRCM, Antonio Maraver & Muriel Busson). Deux plateaux partenaires sont associés à IPAM concernant les services d’imagerie in vivo : Résonance magnétique (Triolet, BionanoMRI, Christophe Goze-Bac), Microtomographie X (UMII, Isem-MRI, Renaud Lebrun). IPAM travaille en collaboration avec les autres plateformes de l’UMS Biocampus, telles que le Réseau d’Histologie Expérimentale de Montpellier, le Réseau des Animaleries de Montpellier et Montpellier Rio Imaging. Elle fait également partie du club d’imagerie du Cancéropôle Grand Sud Ouest et est membre international de la plateforme nationale d’imagerie d’Irlande NBIPI. Enfin, IPAM vient d’obtenir la certification ISO 9001 sur l’ensemble de ses prestations. 36 24 DNA COMBING FACILITY – PEIGNAGE MOLÉCULAIRE Marjorie DRAC, Etienne SCHWOB Plateforme Montpellier DNA Combing (MDC) / Peignage moléculaire (IGMM) The Montpellier DNA Combing Facility (MDC) allows scientists to use DNA Combing1 to study genome replication at the level of single DNA molecules. MDC offers a number of services to private and academic laboratories throughout the world. Due to intellectual property rights, the mere distribution of silanized glass coverslips for DNA combing is restricted to CNRS units. However DNA combing experiments and analysis can be performed for all our customers, as collaborations. The silanization of glass coverslips is performed in vapour phase using 7-octenyl-trichlorosilane to achieve uniform self-assembled monolayers. High hydrophobicity, measured by water droplet contact angle, ensures efficient binding of single DNA molecules via their slightly denatured ends. Every coverslip batch is also tested by immuno-detection of combed DNA molecules to check for the linearity and density of fibers, and for good signal/noise ratio. Full biological analyses can be performed for our customers, starting from cells embedded in agarose plugs. MDC will prepare genomic DNA, comb it and measure replication parameters such as fork velocity, fork asymmetry, inter-origin distances and global instant fork density. Images are analysed using dedicated homemade software (IDeFIx), and data provided with statistical assessment. MDC is contracted every year by 10-15 labs locally and throughout the world. Since 2005 more than 40 publications have been achieved with the support of DNA combing facility. In 2014, the facility co-authors 3 publications and will benefit from a CNRS IE position. ____________________ [1] Bensimon et al, Phys. Rev. Lett. 74, 4754 - 4757 (1995) 37 25 AN ADVANCED PLATFORM FOR RECEPTOR BIOLOGY AND PHARMACOLOLOGY INVESTIGATION Damien MAUREL, Isabelle BRABET, Claire VOL, Sandra AGNEL, Laurent PRÉZEAU ARPEGE / Pharmacologie-Criblage-Interactome (IGF) The platform ARPEGE is dedicated to extensive analysis of the structural and functional features of signaling protein complexes. It permits the characterization of all kinds of specific interactions either between ligand and target or between protein partners in signaling protein complexes. Using a wide variety of advanced analysis techniques, it is possible to perform multiple cell-based assays in order to extensively analyze protein target features like ligand-binding (Kd and Ki determination), receptor dimerization, second messengers production (cAMP, IP1, calcium) or protein phosphorylation (phospho-ERK). The available equipment includes a selection of the most efficient and sensitive fluororescence plate readers (PHERAstar, RUBYstar, INFINITE F500, MITHRAS, FLEXstation) adapted to analyses in medium-throughput format (96/384-well plates). More recently, the platform acquired two label-free devices, the xCELLigence (impedance) and EPIC BT (Dynamic Mass Redistribution) allowing the measurement of cellular events (adhesion, migration, proliferation, cell death, etc.) without modifying the cells or the target of interest. The ARPEGE platform service offering is made available to academic laboratories, biotech as well as pharma and other industrial companies. 38 26 PRÉSENTATION DE MONTPELLIER GENOMIC COLLECTIONS Frédéric LIONNETON, Sylvie FROMONT, Marie-Cécile ROBERT, Edouard BERTRAND Protéines Recombinantes (ProRec) / Montpellier Genomic Collections (MGC) (CRBM) Montpellier Genomic Collections propose un service de clonage haut débit. La plateforme gère 4 banques d’ORFeome. La version 5.1 qui représente 15483 ORF humains clonées, soit 12794 gènes humains non redondants, la version 8, contenant 12 230 clones humains soit 11149 ORF non redondants, la version Life Technologie 17434 clones humains avec codon stop et un ORFeome souris de 2114 clones. Les ORF clonées contiennent la séquence codante localisée entre le codon d’initiation et le codon stop, excluant les régions 5’ et 3’ non traduites (5’ et 3’ UTR). Le système de clonage Gateway permet ainsi d’ajouter un tag en 3’ ou 5’ de l’ORF d’intérêt. La plateforme gère et enrichit une banque de vecteurs de destinations compatible avec le système de clonage Gateway. Nos prestations consistent à sortir des clones, créer de nouveaux clones dans des vecteurs pDON et transférer les ORF dans différents vecteurs de destinations. Nous avons également automatisé plusieurs prestations telles que l’extraction d’ADN plasmidique en format 12, 48 et 96 échantillons, le passage d’échantillon ADN, ARN sur l’électrophorèse à capillaire LabChip GX caliper ainsi que l’extraction d’ADN génomique à partir de queue de souris. MGC est également impliquée dans une collaboration trans-plateforme avec Montpellier Rio Imaging afin de proposer une nouvelle prestation de criblage de banque SiRNA en image haut débit ou haut contenu. La plateforme est située sur le site route de Mende au Centre de Recherche en Biochimie Macromoléculaire. 39 27 PLATEFORME DE PROTÉOMIQUE CLINIQUE Laurence MOLINA, Ève DUPAS, Nicolas SALVETAT, Florian SALIPANTE, Franck MOLINA Pôle Protéomique de Montpellier (PPM) / Protéomique Clinique (PPC)-CHRU/PPC-SysDiag (St Eloi-SysDiag) La Plateforme de Protéomique Clinique (PPC/Sysdiag) vise à exploiter les derniers développements technologiques et bioinformatiques en protéomique sur des échantillons biologiques humains pour la découverte, la validation et l’utilisation de biomarqueurs dans des pathologies complexes. Ses domaines de compétences techniques sont l’évaluation de la qualité des prélèvements biologiques, la mise en place de programme de recherche de biomarqueurs sur différents types d’échantillons biologiques humains complexes (liquide, tissus, cellules), la validation analytique et/ou clinique de biomarqueurs par différentes approches, la purification et l’identification de biomarqueurs et enfin l’analyse biostatistique et le développement d’algorithmes décisionnels adaptés aux questions cliniques adressées. Les missions fixées pour la plateforme PPC s’articulent autour de 4 axes : 1. Rechercher des biomarqueurs et les mécanismes moléculaires associés, 2. Développer de nouvelles approches méthodologiques pour la protéomique clinique dans le domaine de la préparation des échantillons biologiques (préfractionnement, enrichissement en protéines faiblement abondantes,...), de la séparation des protéines et de l’analyse bioinformatique des données, 3. Faire de la veille technologique afin d’implanter et exploiter les techniques indipensables au développement de la protéomique clinique , 4. Mettre en place des formations théoriques universitaires et des formations pratiques professionnelles sur sites ou hors sites Enfin PPC est impliquée dans le Pôle de Compétitivité Eurobiomed afin de faciliter le lien translationnel entre la recherche académique et l’idustrie dans le domaine du diagnostic et de la médecine personnalisée. 40 28 QUANTITATIVE PROTEOMICS AT THE FUNCTIONAL PROTEOMICS PLATFORM Martial SÉVENO, Clément ASSAILLIT, Séverine CHAUMONT-DUBEL, Edith DEMETTRE, Geoffrey HINSINGER, Eric THOUVENOT, Serge URBACH, Franck VANDERMOERE, Oana VIGY et Philippe MARIN Pôle Protéome de Montpellier (PPM) et Plate-forme de Protéomique Fonctionnelle (FPP) La plateforme de Protéomique Fonctionnelle (FPP, http://www.fpp.cnrs.fr/), localisée à l’IGF et dirigée par Philippe Marin et Martial Séveno, est une des quatre plateforme du Pôle Protéome de Montpellier (PPM). La plateforme traite plus de 60 projets par an dans le cadre de collaborations scientifiques ou de prestations de service au bénéfice de nombreux laboratoires académiques et privés principalement localisés dans la région Languedoc-Roussillon. Les études réalisées par la plateforme couvrent un large domaine incluant l’identification à grande échelle des protéines, l’interactomique, l’étude de modifications post-traductionnelles, la caractérisation de biomarqueurs et l’étude de différents mécanismes cellulaires par des approches quantitatives (ciblées ou non). Depuis 2008, la plateforme s’est spécialisée dans les analyses à haute résolution, permises par la spectrométrie de masse à transformée de Fourier (FT-MS) et est équipée de la technologie Orbitrap (un LTQ Orbitrap XL-ETD acquis en 2008, une Orbitrap Elite et un Q-Exactive acquis en 2013). En effet, les spectromètres de masse à transformée de Fourier font partis des appareils les plus performants pour l’identification et la quantification des protéines grâce à leur très haute résolution, à leur excellente précision de mesure pour une très large gamme de masses et à une meilleure sensibilité, comparées à d’autres analyseurs de masse. L’implantation récente d’un Q-Exactive permet à la FPP d’apporter une réponse performante au nombre croissant de demandes d’analyses protéomiques quantitatives des équipes de recherche régionales. Le poster de la FPP présente, à titre d’exemple, différentes techniques de protéomique quantitative avec ou sans marquage disponibles sur la plateforme. 41 29 PRODUCTION DE VECTEURS LENTIVIRAUX Céline LEMMERS, Sophie VIVIER, Yea-Lih LIN, Clément METTLING, Arnaud MONTEIL Plateforme de Vectorologie de Montpellier (PVM) / Lentivecteurs (IGF) Le plateau Lentivecteurs de la plateforme de Vectorologie de Montpellier a pour objectif premier de fournir une activité de service consistant en la production de particules lentivirales recombinantes. Elle propose également une activité de conseil afin d’aider les équipes demandeuses quant aux choix des meilleures stratégies expérimentales à mettre en place dans leurs programmes de recherche (choix de la protéine d’enveloppe ou pseudotypage, utilisation de promoteurs spécifiques, choix du meilleur vecteur, ….). En parallèle, une activité de développement est mise en place. Cette activité a pour objectif d’optimiser les vecteurs actuels afin de répondre aux besoins des laboratoires demandeurs et d’explorer la possibilité d’utiliser d’autres systèmes viraux. 42 ALCON Carine MRI [email protected] BONNEFONT Anne-Laure RAM [email protected] ARNAL Florence RAM [email protected] BOUKHADDAOUI Hassan MRI [email protected] BAECKER Volker MRI [email protected] BOYER-CLAVEL Myriam MRI [email protected] BELLIS Julien MRI [email protected] BRABET Isabelle ARPEGE [email protected] BERNEX Florence RHEM [email protected] BRON Patrick PIBS [email protected] BERTHET Charlène RHEM [email protected] BUSSON Muriel IPAM [email protected] BERTRAND Edouard MRI [email protected] CASTRO Anna CRBM [email protected] BERTRAND-GADAY Christelle RAM [email protected] CAU Julien MRI [email protected] 45 46 CAVELIER Patricia RHEM [email protected] DUBOIS Émeric MGX [email protected] CERQUEIRA Frédérique MGX [email protected] DUPERRAY Christophe MRI [email protected] CHAUMONT-DUBEL Séverine PPM [email protected] EYBALIN Michel INM michel.eybalin@inserm CLERTE Caroline PIBS [email protected] FARAH Charlotte IPAM [email protected] CONÉJÉRO Geneviève MRI [email protected] FOLCH Géraldine IMGT [email protected] COUETTE Brigitte Secrétaire Générale & Coord. Scientifique [email protected] FORICHON Luc RAM [email protected] DE GUILLEN Karine PIBS [email protected] FROMONT Sylvie ProRec [email protected] DEMETTRE Edith PPM [email protected] GALLARDO Frédéric RAM [email protected] DESMARAIS Erick MGX [email protected] GAVOIS Elodie RAM [email protected] DIAKOU Vicky MRI [email protected] GRIMAL Marine Gestionnaire [email protected] DRAC Marjorie MDC [email protected] Sigma-Aldrich GUETTARI Nadia [email protected] GUICHOU Jean-Francois PIBS [email protected] JULIEN Sylvie MRI [email protected] GUILLEMIN Jennifer RAM [email protected] KOUAL Rachid MGX [email protected] HAJJOUL Houssam MRI [email protected] KREMER Eric PVM [email protected] HASSEN-KHODJA Cedric MRI [email protected] LABESSE Gilles PIBS [email protected] HENRIQUET Corinne PPM [email protected] LABORIE Stephane MRI [email protected] HOH Francois PIBS [email protected] LAI KEE HIM Joséphine PIBS [email protected] IBANES Sandy PVM [email protected] LEBRUN Renaud MRI [email protected] IBANEZ Gaëlle Responsable Qualité [email protected] LE CAM Laurent RAM [email protected] JABADO-MICHALOUD Joumana IMGT [email protected] LEFRANC Marie-Paule IMGT [email protected] JOURNOT Laurent MGX [email protected] LEMMERS Celine PVM [email protected] JUBLANC Elodie MRI [email protected] LIONNETON Frédéric ProRec [email protected] 47 48 LOPEZ Emilie MRI [email protected] MORENO Sophie Assistante communication [email protected] MANEZ Aurore MGX [email protected] MOURNET Pierre MGX [email protected] MARIN Philippe PPM [email protected] PADILLA Andre PIBS [email protected] MAUTORD Julie Sigma-Aldrich [email protected] PANTESCO Véronique MGX [email protected] MATEOS LANGERAK Julio MRI [email protected] PARRINELLO Hugues MGX [email protected] MAUREL Damien ARPEGE [email protected] PAYSAN-LAFOSSE Typhaine IMGT [email protected] MENNECHET Sandie RAM [email protected] PEDACI Francesco MRI [email protected] MIQUEL Olivier MRI [email protected] PIROT Nelly RHEM [email protected] MOLINA Laurence PPM [email protected] PRÉZEAU Laurent ARPEGE [email protected] MOLLARD Patrice IPAM [email protected] PUGNIÈRE Martine PPM [email protected] MONTEIL Arnaud PVM [email protected] RAKOTOMANGA Zoely Responsable service gestion [email protected] RIALLE Stéphanie MGX [email protected] SCHWOB Etienne MDC [email protected] RICHARD Sylvain IPAM [email protected] SÉVENO Martial PPM [email protected] RIPOLL Chantal RHEM [email protected] SEVERAC Dany MGX [email protected] RITTER Didier Acobiom (Directeur) [email protected] SUTTER Anne RAM [email protected] RIVALLAN Ronan MGX [email protected] TEIGELL WEBB Maria Luisa RHEM [email protected] ROBERT Marie-Cécile ProRec [email protected] TRAN-AUPIAIS Corine MRI [email protected] ROHMER Marine MGX [email protected] URBACH Serge PPM [email protected] SAADA Anne-Charlotte Assistante RH [email protected] VAUDESCAL Stéphanie MRI [email protected] SALIPANTE Florian PPM [email protected] VIE Nadia MRI [email protected] SARRAZIN Amélie MRI [email protected] VIGNES Hélène MGX [email protected] SASSETTI Isabelle RHEM [email protected] VOL Claire ARPEGE [email protected] 49 UMS BioCampus Montpellier c/o IGF 141 rue de la Cardonille 34094 MONTPELLIER CEDEX 5 Tel : 04.34.35.92.11 www.biocampus.cnrs.fr