Déscription du test

LDL-Cholesterol
Test in vitro destiné à la mesure quantitative du
LDL-C dans le sérum et le plasma humain
Indication
Les LDL (Low Density Lipoproteins) jouent un rôle clé dans la genèse et l’évolution de l’athérosclérose, en particulier de l’athérosclérose coronarienne. La valeur du LDL cholestérol (LDL-C) constitue le prédicteur clinique le plus puissant parmi l’ensemble
des paramètres individuels relatifs à l’athérosclérose coronarienne. Les traitements ciblant la réduction des lipides visent ainsi
en premier lieu la réduction du LDL cholestérol, ce qui permet alors une amélioration de la fonction endothéliale, la prévention
de l’athérosclérose et le ralentissement de sa progression, ainsi que la prévention des ruptures de plaque.
Le calcul de la concentration en LDL cholestérol reposant sur la formule de Friedewald1 est encore couramment utilisé et suppose l’existence d’un rapport direct entre le VLDL cholestérol et les triglycérides dans les échantillons de sang prélevés à jeun.
Le biais apparaissant dans le calcul de la concentration en LDL-C reposant sur cette hypothèse est uniquement acceptable pour
les échantillons présentant une concentration en triglycérides < 2,0 mmol/l (177 mg/dl).1 La formule peut engendrer des valeurs
de LDL cholestérol artificiellement faibles en présence de quantités réduites de chylomicrons ou de lipoprotéines anormales.2
Les échantillons non à jeun ne peuvent par conséquent pas être utilisés pour le calcul du LDL-C en raison de leur concentration
élevée en chylomicrons et du dépassement dans de nombreux cas de la limite de concentration en triglycérides acceptable.
La méthode directe développée par Roche et destinée à la mesure du LDL-C surmonte les limites du calcul à l’aide de la formule
de Friedewald, car elle fournit des résultats précis indépendamment de la concentration en triglycérides et même pour les
échantillons de sang non à jeun.
Principe du test: test colorimétrique enzymatique en phase homogène
Les esters de cholestérol et le cholestérol libre contenus dans les LDL sont mesurés sur la base d’une méthode enzymatique de
mesure du cholestérol reposant sur l’utilisation d’estérase de cholestérol et de cholestérol oxydase en présence de surfactants entraînant une solubilisation sélective des seuls LDL. Les réactions enzymatiques aux lipoprotéines autres que les LDL sont inhibées par
des surfactants et un composé de sucre. La concentration de cholestérol dans les HDL, VLDL et chylomicrons n’est pas déterminée.
esters de LDL cholestérol + H2O
détergent, estérase de cholestérol
cholestérol + acides gras libres (solubilisation sélective de micelles)
Les esters de cholestérol sont décomposés quantitativement en cholestérol et en acides gras libres par l’estérase de cholestérol.
Cholestérol LDL + O2
cholestérol oxydase
D4-cholesténone + H2O2
En présence d’oxygène, le cholestérol est oxydé par le cholestérol oxydase et forme de la D4-cholesténone ainsi que du peroxyde d’hydrogène.
2 H2O2 + 4-aminoantipyrine + EMSEa) + H2O + H+
peroxydase
pigment rouge violet + 5 H2O
a) N-éthyl-N-(3-méthylphényl)-N-succinyléthylènediamine
En présence de peroxydase, le peroxyde d’hydrogène généré réagit avec la 4-aminoantipyrine et l’ESME pour former une coloration rouge pourpre.
L’intensité de coloration de ce colorant est directement proportionnelle à la concentration de cholestérol et est mesurée par photométrie.
Fort de plus de 40 ans d’expérience dans le développement de tests, Roche est le principal fabricant et fournisseur
d’instruments et de réactifs pour la chimie clinique. Le concept de réactif cobas c pack innovant et unique permet aux utilisateurs de bénéficier d’un confort optimal grâce à une manipulation de réactifs minimale et sûre. Les excellentes performances d’analyse offrent une fiabilité et un niveau de qualité établi qui conviennent à une utilisation de routine et d’urgence.
Caractéristiques du test LDL-Cholesterol Gen.3
LDL-Cholesterol Gen.3
LDL-Cholesterol Gen.3
Modules cobas c 701 | 702
Type d’échantillon
Système cobas c 311
Modules cobas c 501 | 502
Système COBAS INTEGRA® 400 plus
Sérum, plasma
Temps de réaction
10 minutes
10 minutes
Stabilité à bord
84 jours
28 jours
Fréquence des calibrations
Chaque lot de réactifs
Chaque lot de réactifs
Traçabilité
Cette méthode a été standardisée par rapport à la méthode de bêta-quantification telle
que définie par les recommandations contenues dans le protocole de certification de la
méthode de mesure du LDL cholestérol pour les fabricants3
0,10 – 14,2 mmol / l (3,87 – 549 mg/dl)
0,10 – 14,2 mmol/l (3,87 – 549 mg/dl)
Compatibilité avec le système
Intervalle de mesure
Valeurs attendues 4
Répétabilité
Précision intermédiaire
Concentration adulte: optimale <2,59 mmol/l
Concentration adulte: optimale <2,59 mmol/l
(<100 mg/dl)
(<100 mg/dl)
Chaque laboratoire devra vérifier la validité de ces valeurs et établir au besoin ses propres
intervalles de référence selon la population examinée.
Module cobas c 501 | 502
Module cobas c 701 | 702
0,302 mmol/l = 1,2 %
0,305 mmol/l = 2,0 %
2,93 mmol/l = 0,7 %
2,96 mmol/l = 0,7 %
7,83 mmol/l = 0,7 %
3,63 mmol/l = 0,8 %
3,67 mmol/l = 0,7 %
8,21 mmol/l = 0,7 %
13,6 mmol/l = 0,8 %
13,8 mmol/l = 0,7 %
Module cobas c 501 | 502
Module cobas c 701 | 702
0,316 mmol/l = 2,5 %
0,305 mmol/l = 2,3 %
3,03 mmol/l = 2,1 %
2,96 mmol/l = 0,9 %
8,14 mmol/l = 1,9 %
3,63 mmol/l = 0,8 %
3,71 mmol/l = 2,1 %
8,21 mmol/l = 0,9 %
13,7 mmol/l = 2,0 %
13,8 mmol/l = 0,9 %
Références
1 Van der Heul, L., Stek, S., TAX, M., Verheijen, F., Vermeer, H.J. (2012). Measuring LDLcholesterol: are we doing it wrong? Ned Tijdschr Klin Chem Labgeneesk, 37: 221 – 222.
2 Tighe, D.A., Ockene, I.S., Reed, G., Nicolosi, R. (2006). Calculated low density lipoprotein
cholesterol levels frequently underestimate directly measured low density lipoprotein
cholesterol determinations in patients with serum triglyceride levels >4.52 mol/l: An analysis
comparing the LipiDirect magnetic LDL assay with the Friedewald calculation. Clinica
Chimica Acta 365, 236 – 242.
3 LDL Cholesterol Method Certification Protocol for Manufacturers. National Reference
System for Cholesterol. Cholesterol Reference. Method Laboratory Network 1997, October.
4 Third Report of National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection,
Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III).
NIH Publication No 01-3670; May 2001.
COBAS, COBAS C, COBAS INTEGRA et LIFE NEEDS ANSWERS
sont des marques de Roche.
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Sérum, plasma
Informations de commande
LDL-Cholesterol Gen.3
Système cobas c, COBAS
INTEGRA® 400 plus
LDL-Cholesterol Gen.3
Module cobas c 701 | 702
LDL-Cholesterol Gen.3
cobas c 111
Calibrator f.a.s. lipides
200 tests
07 005 717 190
500 tests
07 005 768 190
2 x 50 tests
07 005 806 190
3 x 1 ml
12 172 623 122
PreciControl ClinChem Multi 1
4 x 5 ml
05 947 626 190
PreciControl ClinChem Multi 1
20 x 5 ml
05 117 003 190
PreciControl ClinChem Multi 2
4 x 5 ml
05 947 774 190
PreciControl ClinChem Multi 2
20 x 5 ml
05 117 216 190