FertiCultTM Flushing medium FertiCultTM Flushing

Transcription

PRE-USE CHECKS
TM
FertiCult
Flushing medium
EN
Cell culture medium for washing of
human ova, spermatozoa and embryos,
for swim-up of spermatozoa,
sperm injection in ICSI, intra uterine
insemination and embryo transfer
Doc. reference: FP09 I08 R01 C.4
Update: 24.10.2014
USED ABBREVIATIONS
ICSI
IUI
Intracytoplasmatic Sperm Injection
Intra uterine insemination
GENERAL INFORMATION
AND INTENDED USE
FertiCult Flushing medium is a formulation for washing of
human ova, spermatozoa and embryos. FertiCult Flushing
medium can also be used for swim-up techniques of human
spermatozoa, sperm injection in oocytes during ICSI, introduction of washed spermatozoa in the uterus (IUI) and for
embryo transfer.
The medium is complete and needs no further additives.
The medium contains HEPES; no CO ² incubation is required.
FertiCult Flushing medium does not contain heparin, thus for
oocyte pick-up, use FertiCult Aspiration medium.
As with all IVF media, FertiCult Flushing medium ought to be
preincubated in the incubator for 12 hours before use
(with lid closed).
COMPOSITION
FertiCult Flushing medium is a ready-to-use HEPES-buffered
medium which also contains bicarbonate, physiologic salts,
glucose, lactate and human serum albumin (4.00g/liter).
Gentamicin Sulphate can be added upon request (10mg/
liter).
» Do not use the product if it becomes discoloured (if medium
contains phenol red), cloudy, or shows any evidence of
microbial contamination.
» Do not use the product if seal of the container is opened
or defect when the product is delivered.
STORAGE INSTRUCTIONS
» Store FertiCult Flushing medium without gentamicin
between 2-25°C.
» Store FertiCult Flushing medium with gentamicin
between 2-8°C.
» Once opened store all products between 2-8°C.
» Do not freeze before use.
» Keep away from (sun)light.
» The products can be used safely up to 7 days after opening,
when sterile conditions are maintained and the products
are stored at 2-8°C.
» Do not use after expiry date.
» Stable after transport (max. 5 days) at elevated
temperature (≤ 37°C).
WARNINGS AND PRECAUTIONS
Standard measures to prevent infections resulting from the
use of medicinal products prepared from human blood or
plasma include selection of donors, screening of individual
donations and plasma pools for specific markers of infection and the inclusion of effective manufacturing steps
for the inactivation/removal of viruses. Despite this, when
medicinal products prepared from human blood or plasma
are administered, the possibility of transmitting infective
agents cannot be totally excluded. This also applies to
unknown or emerging viruses and other pathogens. There
are no reports of proven virus transmissions with albumin
manufactured to European Pharmacopoeia specifications by
established processes.
Therefore, handle all specimens as if capable of transmitting
HIV or hepatitis.
Always wear protective clothing when handling specimens.
Always work under strict hygienic conditions (e.g. LAF-bench
ISO Class 5) to avoid possible contamination, even when
FertiCult Flushing medium contains Gentamicin.
FertiCult Flushing with phenol red and gentamicin contains
the antibiotic Gentamicin Sulfate. Appropriate precautions
should be taken to ensure that the patient is not sensitized
to this antibiotic.
MATERIAL INCLUDED WITH THE KIT
METHOD
FLUSH020
» 5 x 20ml of FertiCult Flushing medium
FLUSH22.8
» 1 x 22.8ml of FertiCult Flushing medium
FLUSH050
FLUSH100
FLUSH_002_PHR
» 1 x 2ml of FertiCult Flushing medium with Phenol Red
FLUSH020PHR
FLUSH050PHR
FLUSH100PHR
FLUSH500PHR
FLUSH020PRG
and Gentamicin
FLUSH050PRG
and Gentamicin
FLUSH100PHR_G
and Gentamicin
FLUSH500PHR_G
and Gentamicin
WASH005
» 1 x 5ml of Washing/Insemination medium
WASH020
» 1 x 20ml of Washing/Insemination medium
MATERIAL NOT INCLUDED WITH THE KIT
»
»
»
»
»
»
»
Incubator at 37°C (No CO ² )
Petri dishes
Microscope
Test tubes
LAF bench (ISO Class 5)
Syringe (e.g. 1ml Plastipack)
Catheter
PRODUCT SPECIFICATIONS
Chemical composition
pH: between 7.30-7.60 (Release criteria)
Osmolality: 270-290 mOsm/kg
Sterility: sterile (SAL 10 - 3)
Endotoxins: < 0.25 EU/ml
Mouse Embryo Assay (blastocysts after 96h): ≥ 80%
after 30min of exposure (zygote stage)
» Use of Ph Eur or USP grade products if applicable
» Certificate of analysis and MSDS are available
upon request
»
»
»
»
»
»
FerticultFlushingMedium_24.10.14.indd 1
Washing of spermatozoa (suggested procedure)
The washing of spermatozoa can be done at room temperature or at 37°C.
1. Add 5ml FertiCult Flushing medium to the native semen
sample and mix. Centrifuge for 15 minutes at approximately 300g.
2. Remove supernatant and leave about 0.5ml of semen in
the centrifuge tube.
3. Add 5ml FertiCult Flushing medium to the test-tube. Mix
the solution gently until the pellet is completely dissolved.
4. Centrifuge again for 10 minutes at 300g.
5. Perform a swim-up.
Swim-up procedure (according to WHO, 2010)
1. Gently layer 1,5ml FertiCult Flushing medium over 1ml of
washed semen in a conical based centrifuge tube.
2. Incline the tube at an angle of 45° and incubate for 1 hour
at 37°C.
3. Gently turn to the upright position and remove
the uppermost 1ml.
4. Dilute this aliquot of motile cells with 8 volumes FertiCult
Flushing medium. Centrifuge for 15 minutes at 300g,
remove supernatant and finally resuspend in 0.5ml of
FertiCult Flushing medium.
Embryo transfer (according to Brinsden, 2005)
1. Take a sterile syringe, fill with FertiCult Flushing medium,
and eject air bubbles. Attach the syringe to a catheter,
and eject the medium.
2. Draw up FertiCult Flushing medium into the syringe and
push down the piston to the 10μl calibration mark.
3. Draw up the embryo(s) into the catheter so that the
volume to be transferred is approximately 20-30μl.
4. Hand catheter and syringe to the clinician for insertion
and transfer in the uterus.
VERIFICHE PRIMA DELL’USO
TM
FertiCult
Flushing medium
IT
Terreno per colture cellulari di ovuli
umani, spermatozoi ed embrioni, per
swim-up di spermatozoi, per iniezione
di sperma in ICSI, inseminazione intrauterina e trasferimento dell’embrione
Documento riferimento : FP09 I08 R01 C.4
Aggiornamento: 24.10.2014
ABBREVIAZIONI UTILIZZATE
ICSI
IUI
Iniezione intracitoplasmatica di sperma
Inseminazine intra uterina
INFORMAZIONI GENERALI
ED UTILIZZO PREVISTO
FertiCult Flushing medium è una formulazione per il lavaggio
di ovuli umani, spermatozoi ed embrioni. FertiCult Flushing
medium può essere usato anche per la tecnica dello swim up
degli spermatozoi umani, per l’iniezione della sperma negli
ovociti durante lo ICS, per l’introduzione di spermatozoi lavati
nell’utero (IUI) e per il trasferimento dell’embrione.
Il terreno è completo e non necessita di ulteriori additivi.
Il terreno di coltura contiene HEPES; non è richiesta nessuna incubazione con CO ². FertiCult Flushing medium non
contiene eparina, per cui per la raccolta degli ovociti, usare il
medium per l’aspirazione della FertiCult.
Come avviene per tutti i terreni di coltura usati per metodiche
di IVF, FertiCult Flushing medium deve essere preincubato
in incubatrice per 12 ore prima dell’uso (con il coperchio
chiuso).
COMPOSIZIONE
Il FertiCult Flushing medium è un terreno pronto all’uso
tamponato con HEPES che contiene anche bicarbonato,
sali fisiologici, glucosio, lattato ed albumina sierica umana
(4,00g/litro).
Può essere aggiunta su richiesta la Gentamicina Solfato
(10mg/litro).
MATERIALE INCLUSO NEL KIT
FLUSH020
» 5 x 20ml di FertiCult Flushing medium
FLUSH22.8
» 1 x 22.8ml di FertiCult Flushing medium
FLUSH050
FLUSH100
FLUSH_002_PHR
contenente Rosso Fenolo
FLUSH020PHR
FLUSH050PHR
FLUSH100PHR
FLUSH500PHR
FLUSH020PRG
contenente Rosso Fenolo e Gentamicina
FLUSH050PRG
FLUSH100PHR_G
FLUSH500PHR_G
WASH005
» 1 x 5ml di Washing/Insemination medium
WASH020
» 1 x 20ml di Washing/Insemination medium
MATERIALE NON COMPRESO NEL KIT
»
»
»
»
»
»
»
Incubatrice a 37°C (No CO ² )
Piastre di Petri
Microscopio
Tubi per analisi
Banco LAF (ISO Class 5)
Siringa (per esempio Plastipack da 1ml)
Catetere
SPECIFICHE DEL PRODOTTO
Composizione chimica
pH: tra 7.30-7.60 (Criteri di rilascio)
Osmolalità: 270-290 mOsm/kg
Sterilità: sterile (SAL 10 - 3)
Endotossine: < 0.25 EU/ml
Test su embrioni murini (blastocisti dopo 96 ore):
≥ 80% dopo 30min di esposizione (fase zigote)
» Utilizzo di prodotti secondo farmacopea Ph Eur o USP
se applicabile
» Il certificato delle analisi e MSDS sono disponibili
su richiesta
»
»
»
»
»
»
» Non usare il prodotto se risulta scolorito (se il terreno
contiene rosso fenolo), torbido, o manifesta qualsiasi
evidenza di contaminazione microbica.
» Non usare il prodotto se il sigillo del contenitore è aperto
o in presenza di difetti durante la consegna del prodotto.
ISTRUZIONI PER LA CONSERVAZIONE
» Conservare il terreno FertiCult Flushing senza
gentamicina tra 2-25°C.
» Conservare il terreno FertiCult Flushing con gentamicina
tra 2-8°C.
» Una volta aperti conservare tutti i prodotti tra 2-8°C.
» Non congelare prima dell’uso.
» Mantenere lontano dalla luce del sole.
» I prodotti possono essere usati in modo sicuro entro 7
giorni dall’apertura, se le condizioni per la sterilizzazione
sono state mantenute ed i prodotti sono stati conservati
a 2-8°C.
» Non usare dopo la data di scadenza.
» Idoneo per il trasporto o lo stoccaggio a breve termine
(fino a 5 giorni a 37°C) a temperature elevate.
TM
FertiCult
Flushing medium
FR
Milieu de culture cellulaire destiné au
lavage d’ovules, de spermatozoïdes et
d’embryons, pour la migration ascendante de spermatozoïdes, l’injection
spermatique intracytoplasmique (ICSI)
l’insémination intra-utérine et le transfert
d’embryons
Référence du document : FP09 I08 R01 C.4
Mise à jour : 24.10.2014
ABBRÉVIATIONS UTILISÉES
ICSI
IUI
injection spermatique intracytoplasmique
insémination intra-utérine
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
Le misure standard per prevenire le infezioni derivanti
dall'uso di medicinali preparati dal sangue umano o dal
plasma, includono una selezione di donatori, il monitoraggio delle donazioni individuali e dei pool plasmatici alla
ricerca dei marcatori specifici di infezione e l'integrazione
di fasi di produzione efficaci per inattivare/rimuovere i virus.
Nonostante ciò, in corso di somministrazione di prodotti
preparati da sangue umano o da plasma, non può essere
totalmente esclusa la possibilità di trasmettere agenti infettivi. Questo si applica anche a virus o ad altri patogeni sconosciuti o emergenti . Non esistono rapporti che testimonino
di trasmissioni di virus attraverso l’albumina prodotta in
conformità con le specifiche dalla Farmacopea europea
mediante i procedimenti stabiliti .
Pertanto, maneggiare tutti i campioni come fossero in grado
di trasmettere HIV o epatite.
Indossare sempre indumenti protettivi durante la manipolazione dei campioni.
Lavorare sempre rispettando rigorosamente le condizioni
igieniche ( e.s. LAF-bench ISO Classe 5) per evitare qualsiasi contaminazione, anche se il terreno FertiCult Flushing
contiene gentamicina.
FertiCult Flushing con rosso fenolo e gentamicina contiene l’antibiotico Gentamicina Solfato. Devono esser prese
appropriate precauzioni per garantire che il paziente non sia
sensibilizzato a questo antibiotico.
METODI
Lavaggio degli spermatozoi
(procedura consigliata)
Il lavaggio degli spermatozoi può essere eseguito a temperatura ambiente o a 37°C.
1. Aggiungere 5ml di FertiCult Flushing medium al campione
di seme nativo e mescolare. Centrifugare per 15 minuti a
circa 300g.
2. Rimuovere il sopranatante e lasciare circa 0.5ml di seme
nel tubo della centrifuga.
3. Aggiungere 5ml di FertiCult Flushing medium nel tubo.
Mescolare la soluzione in modo gentile fino a quando il
precipitato non si sarà dissolto completamente.
4. Centrifugate nuovamente per altri dieci minuti a 300g.
5. Eseguire uno swim-up.
Procedura swim-up
(in conformità con WHO, 2010)
1. Stendere gentilmente 1,5ml di FertiCult Flushing medium
su 1ml di seme lavato in un tubo per centrifuga a base
conica.
2. Inclinare il tubo ad un angolo di 45° ed incubare per
un’ora a 37°C.
3. Rimettere in posizione verticale il tubo e rimuovere 1ml
di sopranatante.
4. Diluire questa aliquota delle cellule mobili con 8 volumi
di FertiCult Flushing medium. Centrifugare per 15 minuti
a 300g, rimuovere il sopranatante e successivamente
sospendere in 0,5ml di FertiCult Flushing medium.
Trasferimento dell’embrione
(secondo Brinsden, 2005)
1. Prendere una siringa sterile, riempirla con FertiCult
Flushing medium, ed eliminare le bolle d’aria. Attaccare
la siringa ad un catetere ed iniettare il terreno di coltura.
2. Caricare FertiCult Flushing medium nella siringa e
calibrare il pistone a 10μl.
3. Spingere l’embrione(i) nel catetere in modo tale che sia
trasferito un volume di circa 20-30 μl.
4. Passare il catetere e la siringa al medico per l’inserimento
e il trasferimento nell’utero.
INFORMATIONS GÉNÉRALES ET
UTILISATION PRÉVUE
Le FertiCult Flushing medium est une préparation utilisée
pour le lavage d’ovules, de spermatozoïdes et d’embryons.
Le FertiCult Flushing medium peut également être utilisé
pour des techniques de migration ascendante de spermatozoïdes humains, d’injection spermatique dans les ovocytes
au cours de l’ICSI, l’insémination de spermatozoïdes lavés
dans l’utérus (IIU) et le transfert d’embryons.
Le milieu est complet et ne nécessite aucun additif. Ce
milieu contient de l’HEPES, pas d’incubation sous CO ²
nécessaire. Le FertiCult Flushing medium ne contient pas
d’héparine. Pour le recueil ovocytaire, recourez au FertiCult
Aspiration Medium.
Comme pour tous les milieux de FIV, le FertiCult Flushing
medium nécessite une préincubation dans l’incubateur 12
heures avant utilisation (couvercle fermé).
COMPOSITION
Le FertiCult Flushing medium est un milieu tamponné HEPES
prêt à l’emploi qui contient également du bicarbonate, des
sels physiologiques, du glucose, du lactate et de l’albumine
sérique humaine (4.00g/litre).
Du sulfate de gentamicine peut être ajouté sur demande
(10mg/litre).
MATÉRIEL INCLUS DANS LE KIT
FLUSH020
» 5 x 20ml de FertiCult Flushing medium
FLUSH22.8
» 1 x 22.8ml de FertiCult Flushing medium
FLUSH050
FLUSH100
FLUSH_002_PHR
avec rouge de phénol
FLUSH020PHR
FLUSH050PHR
FLUSH100PHR
FLUSH500PHR
FLUSH020PRG
avec rouge de phénol et gentamicine
FLUSH050PRG
FLUSH100PHR_G
FLUSH500PHR_G
WASH005
» 1 x 5ml de Washing/Insemination medium
WASH020
MATÉRIEL NON INCLUS DANS LE KIT
»
»
»
»
»
»
»
Incubateur à 37°C (Pas de CO ² )
Boîtes de Petri
Microscope
Éprouvettes
Hotte à flux d’air laminaire (Classe ISO 5)
Seringue (p. ex. Plastipack 1ml)
Cathéter
SPÉCIFICATIONS DU PRODUIT
Composition chimique
pH : entre 7,30-7,60 (critères de libération)
Osmolalité : 270-290 mOsm/kg
Stérilité : stérile (SAL 10 - 3)
Endotoxines : < 0,25 EU/ml
Test MEA de survivance embryonnaire (blastocytes après
96h) : ≥ 80% après 30 min d’exposition (zygote stage)
» Utilisation de produits de la pharmacopée européenne
(Ph Eur) ou américaine (USP) le cas échéant
» Le certificat d’analyse et la fiche toxicologique sont
disponibles sur demande.
»
»
»
»
»
»
4/11/14 11:30
VÉRIFICATIONS AVANT UTILISATION
» Ne pas utiliser le produit en cas de décoloration (si le
milieu contient du rouge de phénol), s’il devient trouble ou
s’il présente des signes de contamination microbienne.
» Ne pas utiliser le produit si le scellé du contenant est
rompu ou défectueux à la livraison du produit
INSTRUCTIONS DE STOCKAGE
» Conserver le FertiCult Flushing medium sans gentamicine
entre 2 et 25°C.
» Conserver le FertiCult Flushing medium avec gentamicine
entre 2 et 8°C.
» Conserver tous les produits ouverts entre 2 et 8°C.
» Ne pas congeler avant utilisation.
» Tenir à l’abri du soleil.
» Les produits peuvent être utilisés en toute sécurité
jusqu’à 7 jours après ouverture si des conditions de
stérilité sont respectées et si les produits sont conservés
entre 2 et 8°C.
» Ne pas utiliser une fois la date de péremption dépassée.
» Stable après transport (maximum 5 jours) à température
élevée (≤ 37°C).
UNTERSUCHUNGEN VOR GEBRAUCH
TM
FertiCult
Flushing medium
DE
Zellkulturmittel, zum Spülen menschlicher Eizellen, Spermatoziden
und Embryos für Swim-up oder
Spermatoziden, Spermieninjektionen
in ICSI, intrauterine Insemination und
Embryotransfer
Dokumentenreferenz: FP09 I08 R01 C.4
Letzte Bearbeitung: 24.10.2014
BENUTZTE ABKÜRZUNGEN
ICSI
IUI
Intracytoplasmatische Spermieninjektion
Intrauterine Insemination
AVERTISSEMENTS
ET MESURES DE SÉCURITÉ
ALLGEMEINE INFORMATION
UND ANWENDUNGSGEBIET
Les mesures standard pour prévenir les infections résultant
de l'utilisation de médicaments préparés à partir de sang
ou de plasma humains incluent la sélection des donneurs,
la recherche de marqueurs spécifiques d'infection sur les
dons individuels et les mélanges de plasma et l'inclusion
d'étapes de fabrication efficaces pour l'inactivation/élimination virale. Cependant, lorsque des médicaments préparés
à partir de sang ou de plasma humains sont administrés,
la possibilité de transmission d'agents infectieux ne peut
être totalement exclue. Ceci s’applique également aux virus
inconnus ou émergents et autres agents pathogènes. Aucune
transmission de virus n'a été rapportée avec l'albumine fabriquée conformément aux spécifications de la Pharmacopée
Européenne selon des procédés établis.
Par conséquent, manipuler les spécimens dans les conditions prévues pour les agents susceptibles de transmettre
le VIH ou l’hépatite.
Toujours porter des vêtements de protection lors de la
manipulation des spécimens.
Toujours travailler dans des conditions d’hygiène strictes
(par ex. poste de travail à flux d’air laminaire classe ISO 5)
pour éviter une éventuelle contamination, même lorsque le
FertiCult Flushing medium contient de la gentamicine.
Le FertiCult Flushing medium avec rouge de phénol et gentamicine contient l’antibiotique sulfate de gentamicine. Des
précautions adaptées devront être prises pour garantir que
le patient n’est pas sensible à cet antibiotique.
FertiCult Flushing medium ist eine Formel zum Spülen menschlicher Eizellen, Spermatoziden und Embryos. FertiCult
Flushing medium kann auch für Swim-up Techniken
menschlicher Spermatoziden, Spermieninjektionen und
Oocyten innerhalb von ICSI verwendet werden, zur
Einführung von gespülten Spermatoziden in den Uterus (UE)
und für den Embryotransfer.
Das Medium ist vollständig und benötigt keine weiteren
Zusatzstoffe. Das Mittel enthält HEPES; CO ² Inkubation ist
nicht notwendig. FertiCult Flushing medium enthält kein
Heparin, also muss für das Absaugen von Oocyten ein
FertiCult Aspiration Medium benutzt werden.
Wie bei allen IVF Mitteln, muss FertiCult Flushing medium
erst 12 Stunden vor Gebrauch im Inkubator vorbefruchtet werden (mit geschlossenem Deckel).
MÉTHODES
Lavage de spermatozoïdes
(procédure conseillée)
Le lavage de spermatozoïdes peut être effectué à température ambiante ou à une température de 37°C.
1. Ajouter 5ml de FertiCult Flushing medium à l’échantillon
de sperme natif et mélanger. Centrifuger 15 minutes à
approximativement 300g.
2. Ôter le surnageant et laisser environ 0.5ml de sperme
dans le tube à centrifuger.
3. Ajouter 5ml de FertiCult Flushing medium dans le tube à
essai. Mélanger délicatement la solution jusqu’à ce que le
pellet soit totalement dissous.
4. Centrifuger à nouveau pendant 10 minutes à 300g.
5. Effectuer une migration ascendante.
Procédure de migration ascendante
(selon l’OMS, 2010)
1. Répartir délicatement 1,5ml de solution de travail sur 1ml
de sperme lavé dans un tube à centrifuger conique.
2. Incliner le tube selon un angle de 45°C et l’incuber
pendant 1 heure à une température de 37°C.
3. Le redresser délicatement et prélever 1ml.
4. Diluer cette aliquote de cellules motiles dans 8 volumes
de FertiCult Flushing medium. Centrifuger pendant 15
minutes à 300g, ôter le surnageant et le transférer
finalement dans 0,5ml de FertiCult Flushing medium.
Transfert d’embryon
(selon Brinsden, 2005)
1. Prendre une seringue stérile, la remplir de FertiCult
Flushing medium, et éjecter les bulles d’air. Raccorder la
seringue à un cathéter et éjecter le milieu.
2 Aspirer FertiCult Flushing medium dans la seringue et
pousser le piston jusqu’à la marque de calibration
de 10μl.
3. Aspirer l’(les) embryon(s) dans le cathéter afin que le
volume à transférer avoisine 20 à 30μl.
4. Remettre le cathéter et la seringue au clinicien pour
l’insertion et le transfert dans l’utérus.
ZUSAMMENSTELLUNG
FertiCult-Spülmedium ist ein gebrauchsfertiges HEPESgepuffertes Medium, das außerdem Bicarbonat, physiologische Salze, Glukose, Laktat und Humanserumalbumin
(4,00g/Liter) enthält.
Auf Wunsch kann Gentamicinsulfat zugesetzt werden
(10mg/Liter).
IM SET ENTHALTENES MATERIAL
FLUSH020
» 5 x 20ml FertiCult-Spülmedium
FLUSH22.8
» 1 x 22.8ml FertiCult-Spülmedium
FLUSH050
FLUSH100
FLUSH_002_PHR
» 1 x 2ml FertiCult-Spülmedium mit Phenolrot
FLUSH020PHR
FLUSH050PHR
FLUSH100PHR
FLUSH500PHR
FLUSH020PRG
und Gentamicin
FLUSH050PRG
und Gentamicin
FLUSH100PHR_G
und Gentamicin
FLUSH500PHR_G
und Gentamicin
WASH005
» 1 x 5ml Washing/Insemination medium
WASH020
» 1 x 20ml Washing/Insemination medium
NICHT IM SET ENTHALTENES MATERIAL
»
»
»
»
»
»
»
Inkubator von 37°C (No CO ² )
Petrischalen
Microskop
Teströhrchen
LAF Bank (ISO Class 5)
Spritze (z.B. 1ml Plastipak)
Katheter
PRODUKTSPEZIFIKATIONEN
Chemische Zusammensetzung
pH-Wert: zwischen 7.30-7.60 (Einsetzungskriterium)
Osmolarität: 270-290 mOsm/kg
Sterilität: sterile (SAL 10 - 3)
Endotoxine: < 0.25 EU/ml
Mouse Embryo Assay (Blastozysten nach 96h): ≥ 80%
nach 30min Kühlung (Zygotenstadium)
» Gebrauch von Ph Eur oder USP Grad Produkten
gegebenenfalls
» Analysebescheinigung und Sicherheitsdatenblatt sind
auf Anfrage erhältlich
»
»
»
»
»
»
BIBLIOGRAPHY / BIBLIOGRAFIA
BIBLIOGRAPHIE / BIBLIOGRAPHIE
BIBLIOGRAFÍA
» Das Produkt nicht verwenden, wenn es sich verfärbt
(wenn das Medium Phenolrot enthält), trüb wird oder
Anzeichen einer Kontamination mit Mikroorganismen
aufweist.
» Benutzen Sie das Produkt nicht, wenn bei Lieferung das
Siegel beschädigt oder der Container offen oder defekt ist.
HINWEISE ZUR LAGERUNG
» FertiCult-Spülmedium ohne Gentamicin bei 2-25°C
aufbewahren.
» FertiCult-Spülmedium mit Gentamicin bei 2-8°C
aufbewahren.
» Alle Produkte nach dem Öffnen bei 2-8°C aufbewahren.
» Vor Gebrauch nicht einfrieren.
» Vor Sonnenlicht schützen.
» Die Produkte können nach dem Öffnen bis zu 7 Tage
lang ohne Sicherheitseinbußen verwendet werden,
sofern sterile Bedingungen gewahrt bleiben und die
Produkte bei 2-8°C aufbewahrt werden.
» Nach dem Verfalldatum nicht mehr benutzen.
» Nach dem Transport für maximal 5 Tage stabil bei
Lagerung unter erhöhten Temperaturen (≤ 37°C).
TM
FertiCult
Flushing medium
ES
El medio de cultivo de células para el
lavado de óvulos humanos, espermatozoides y embriones, para el swim-up
de espermatozoides, inyecciones de
esperma en ICSI, inseminación intrauterina y transferencia de embriones
Referencia del documento: FP09 I08 R01 C.4
Actualización: 24.10.2014
Standardmaßnahmen zur Prävention von Infektionen infolge
der Verwendung von aus Humanblut oder -plasma herstellten Medizinprodukten beinhalten die Spenderauswahl,
das Screening einzelner Spenden und Plasmapools hinsichtlich bestimmter Infektionsmarker und die Durchführung
wirksamer Schritte zur Inaktivierung/Eliminierung von
Viren während der Herstellung. Dessen ungeachtet kann
die Möglichkeit der Übertragung von Infektionserregern
bei Verabreichung von aus Humanblut oder -plasma
hergestellten Medizinprodukten nicht vollständig ausgeschlossen werden. Dies gilt auch für die Möglichkeit der
Übertragung unbekannter oder neuer Viren und anderer
Krankheitserreger. Es liegen keine Berichte über bestätigte Virusübertragungen mit Albumin vor, das nach den
Spezifikationen des Europäischen Arzneibuchs mit etablierten Verfahren hergestellt wurde.
Alle Proben sind daher so zu handhaben, als ob sie HIV oder
Hepatitis übertragen könnten.
Tragen Sie immer Schutzkleidung, wenn Sie mit dem
Material arbeiten.
Stets unter streng aseptischen Bedingungen arbeiten (z.
B. in einer Laminar-Flow-Arbeitsbank, ISO-Klasse 5), um
eine mögliche Kontamination zu vermeiden, auch wenn das
FertiCult-Spülmedium Gentamicin enthält.
FertiCult-Spülmedium mit Phenolrot und Gentamicin enthält
das Antibiotikum Gentamicinsulfat. Es sind entsprechende
Vorsichtsmaßnahmen zu treffen, um sicherzustellen, dass
die Patientin nicht gegenüber diesem Antibiotikum sensibilisiert wird.
METHODEN
Spülung des Sermatozids
(empfohlene Vorgehensweise)
Das Spülen des Spermatozids kann bei Zimmertemperatur
oder bei 37°C erfolgen.
1. Geben Sie 5ml FertiCult Flushing medium zu dem
ursprünglichen Sperma und mischen Sie. 15 Minuten
zentrifugieren bei ungefähr 300g.
2. Entfernen Sie den Überschuss und lassen Sie ca. 0.5ml
des Spermas in dem Zentrifugierröhrchen.
3. Geben Sie 5ml FertiCult Flushing medium in das
Teströhrchen. Mischen Sie die Lösung vorsichtig bis sich
alles vollständig aufgelöst hat.
4. Zentrifugieren Sie nochmals bei 300g.
5. Führen Sie ein Swim-up durch.
Swim-up Vorgang
(konform mit der WHO, 2010)
1. Geben Sie vorsichtig 1,5ml FertiCult Flushing medium
über 1ml gespülten Spermas in ein konisch basiertes
Zentrifugierröhrchen.
2. Richten Sie das Röhrchen auf einen Winkel von 45° aus
und inkubieren Sie es 1 Stunde bei 37°C.
3. Bringen sie es vorsichtig zurück in die aufrechte Position
und entfernen Sie die obersten 1ml.
4. Verdünnen Sie diese Flüssigkeit sterblicher Zellen mit 8
Volumen FertiCult Flushing medium. Zentrifugieren Sie
15 Minuten lang bei 300g, entfernen Sie den Überschuss
und geben Sie schließlich noch mal 0.5ml FertiCult
Flushing medium.
Embryotransfer
(nach Brinsden, 2005
1. Nehmen Sie eine sterile Spritze, gefüllt mit FertiCult
Flushing medium, und injizieren Sie Luftblasen.
Befestigen Sie die Spritze an einem Katheter und
injizieren Sie das Mittel.
2. Ziehen sie die FertiCult Flushing medium in die Spritze
auf und drücken Sie den Pumpsauger bis zu der 10μl
Kalibrationsmarke herunter.
3. Ziehen Sie den (die) Embryo(s) in den Katheter auf, bis
das zu transferierende Volumen bei ca. 20-30μl liegt.
4. Übergeben Sie Katheter und Spritze an den Arzt, zu
Einführung und Transfer in den Uterus.
1. WHO laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction, 3rd edition,
Cambridge University Press, Avon, 1992, pp. 107.
2. WHO Laboratory Manual for the Examination of Human Semen and semen-cervical mucus interactions,
Cambridge University Press, 1999.
3. Brinsden P.R. (2005). Bourn Hall Clinic Procedures and Protocols. A textbook of in vitro fertilization and assisted reproduction,
3rd edition, Taylor & Francis. Procedure No. K.7.
PRUEBAS PREVIAS AL USO
» No utilice el producto si estuviese decolorado (si el
medio contiene fenolsulfonftaleína), poco nítido o presentara evidencia de contaminación microbiana.
» No utilice el producto si el precinto del envase está
abierto o presenta algún defecto cuando se entrega
el producto
INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
ABREVIACIONES UTILIZADAS
ICSI
IUI
Inyección intracitoplasmática de espermatozoides
Inseminación intrauterina
INFORMACIÓN GENERAL Y APLICACIÓN
WARNUNGEN UND
ANDERE VORSICHTSMASSNAHMEN
» Ensayo en embrión de ratón (blastocitos después de 96
hrs): ≥ 80% luego de 30 min. de exposición
(etapa de cigoto)
» Uso de productos que se adecuan a los requisitos de
Ph Eur (Farmacopea Europea) o USP (Farmacopea de
Estados Unidos), en caso de ser necesario
» Puede obtenerse el certificado de análisis y las hojas de
datos de seguridad del material a pedido.
FertiCult Flushing medium es una formulación de lavado de
óvulos humanos, espermatozoides y embriones. FertiCult
Flushing medium también puede utilizarse para las técnicas
swim-up de espermatozoides humanos, las inyecciones
de esperma en oocitos durante ICSI, la introducción de
espermatozoides lavados en el útero (IUI) y la transferencia
de embriones.
Este medio no necesita ningún otro aditivo. El medio contiene
HEPES. No se requiere incubación de CO ². FertiCult Flushing
medium no contiene heparina. En consecuencia, para la
elección del oocito, utilice el medio de aspiración FertiCult.
De la misma forma que con todos los medios de FIV, FertiCult
Flushing medium debe preincubarse en la incubadora
durante 12 horas antes del uso (la cubierta se debe cerrar).
COMPOSICIÓN
FertiCult es un medio de lavado con amortiguador HEPES
listo para utilizar que también contiene bicarbonato, sales
fisiológicas, glucosa, lactato y albúmina sérica humana
(4,00g/litros).
Puede agregarse sulfato de gentamicina a pedido (10mg/
litro).
MATERIAL QUE SE INCLUYE
CON EL JUEGO
FLUSH020
» 5 x 20ml de medio de lavado Ferticult
FLUSH22.8
» 1 x 22.8ml de medio de lavado Ferticult
FLUSH050
FLUSH100
FLUSH_002_PHR
» 1 x 2ml de medio de lavado FertiCult
con fenolsulfonftaleína
FLUSH020PHR
FLUSH050PHR
FLUSH100PHR
FLUSH500PHR
FLUSH020PRG
con fenolsulfonftaleína y gentamicina
FLUSH050PRG
FLUSH100PHR_G
FLUSH500PHR_G
WASH005
WASH020
MATERIAL QUE NO SE INCLUYE
CON EL JUEGO
»
»
»
»
»
»
»
Incubadora a 37°C (Sin CO ² )
Placas de Petri
Microscopio
Tubos de ensayo
estación de flujo de aire laminar (Clase ISO 5)
Jeringa (por ej., 1ml Plastipack)
Catéter
ESPECIFICACIONES DEL PRODUCTO
»
»
»
»
»
Composición química
pH: entre 7.30-7.60 (criterios de lanzamiento)
Osmolalidad: 270-290 mOsm/kg
Esterilidad: estéril (SAL 10 - 3)
Endotoxinas: < 0.25 EU/ml
TECHNICAL SUPPORT / SUPPORTO
TECNICO / ASSISTANCE TECHNIQUE /
TECHNISCHE UNTERSTÜTZUNG /
ASISTENCIA TÉCNICA
» Almacene el medio de lavado FertiCult sin gentamicina a
entre 2 y 25°C.
» Almacene el medio de lavado FertiCult con gentamicina a
entre 2 y 8°C.
» Almacene todos los productos ya abiertos a entre 2 y 8°C.
» No enfríe el producto antes del uso.
» Aleje el producto de la luz (solar).
» Los productos pueden utilizarse de manera inocua hasta
7 días después de que se abran, cuando se mantienen
las condiciones de esterilidad y los productos se
almacenan a entre 2 y 8°C.
» No utilice el producto luego de la fecha de vencimiento.
» Indicado para ser transportado o almacenado en un
periodo corto de tiempo, a elevadas temperaturas
(periodos superiores a 5 días a 37ºC).
ADVERTENCIAS Y PRECUACIONES
Las medidas estándares para prevenir infecciones causadas
por el uso de productos medicinales preparados a partir
de sangre o plasma humanos incluyen la selección de
donantes, el análisis de las donaciones individuales o los
grupos de plasma para buscar marcadores de infección
y la incorporación de los pasos de fabricación efectivos
para la inactivación/eliminación de virus. No obstante,
cuando se administran productos medicinales preparados a
partir de sangre o plasma humanos, no puede excluirse por
completo la posibilidad de transmitir agentes infecciosos.
Lo mismo ocurre con los virus desconocidos o emergentes
y otros patógenos. No se informaron transmisiones de virus
comprobadas con la albúmina fabricada según las especificaciones de Farmacopea Europea mediante los procesos
establecidos.
Por lo tanto, todos los especímenes deben manipularse como
si fuesen capaces de transmitir VIH o hepatitis.
Siempre utilice prendas de protección al manipular muestras.
Trabaje siempre en condiciones de higiene estrictas (por
ejemplo, estaciones de flujo de aire laminar clase ISO 5)
para evitar la posible contaminación, aun cuando el medio
de lavado FertiCult contenga gentamicina.
El medio de lavado FertiCult con fenolsulfonftaleína y gentamicina contiene el antibiótico sulfato de gentamicina. Deben
tomarse las precauciones adecuadas para garantizar que el
paciente no esté esterilizado contra este antibiótico.
MÉTODOS
Lavado de espermatozoides
(procedimiento sugerido)
Este procedimiento se puede realizar a temperatura ambiente o a 37°C.
1. Agregue 5ml de FertiCult Flushing medium a la muestra
de semen nativo y mezcle. Centrifugue durante 15 minutos a aproximadamente 300g.
2. Extraiga el sobrenadante y deje aproximadamente 0.5ml
de semen en el tubo centrífugo.
3. Agregue 5ml de FertiCult Flushing medium al tubo
de ensayo. Mezcle la solución suavemente hasta que los
microgránulos se hayan disuelto por completo.
4. Centrifugue nuevamente durante 10 minutos a 300g.
5. Lleve a cabo el swim-up.
Procedimiento de swim-up
(según OMS, 2010)
1. Lentamente, coloque una capa de 1,5ml de FertiCult
Flushing medium sobre semen lavado en un tubo
centrífugo con base cónica.
2. Incline el tubo a un ángulo de 45° y realice la incubación
durante 1 hora a 37°C.
3. Gire lentamente el tubo a la posición vertical y elimine la
capa superior de 1ml.
4. Diluya esta alícuota de células móviles con 8 volúmenes
de FertiCult Flushing medium. Centrifugue durante 15
minutos a 300g, elimine el sobrenadante y finalmente
vuelva a sujetar el tubo en 0.5ml de FertiCult Flushing
medium.
Transferencia de embriones
(según Brinsden, 2005)
1. Tome una jeringa estéril, llénela con FertiCult Flushing
medium, y expulse las burbujas de aire. Sujete la jeringa
a un catéter y expulse el medio.
2. Prepare FertiCult Flushing medium en la jeringa y
presione el émbolo en la marca de calibración de 10 μl.
3. Prepare los embriones dentro del catéter de manera
que el volumen transferido sea de aproximadamente
20-30 μl.
4. Entréguele el catéter y la jeringa al especialista para que
realice la inserción y transferencia en el útero.
FertiPro N.V.
Industriepark Noord 32, 8730 Beernem, Belgium
Tel +32 (0)50 79 18 05
Fax +32 (0)50 79 17 99
URL: www.fertipro.com
E-mail: [email protected]
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