CONTRÔLE DE LA QUALITE ANALYTIQUE AU LABO

CONTRÔLE DE LA
QUALITE ANALYTIQUE
AU LABO
Août 2009
Hilde De Boeck
SOMMAIRE
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Introduction
Mise en œuvre d’un CQI
Préparation d’un échantillon CQI
Calcule des valeurs cibles
Réalisation du CQI
Les règles de Westgard
Documentation
1. Introduction
Assurance de Qualité (AQ):
Programme complète pour s’assurer que les résultats rapportés à
chaque patient par le labo sont corrects.
Contrôle de Qualité (CQ):
Surveillance en continu de la qualité du processus analytique
Evaluation du Qualité (= Proficiency testing, Quality Assessment)
Vérification d’efficacité des programmes de AQ et CQ, pour déterminer
la qualité des résultats générés par le labo.
Interne ou externe
1. Introduction
Les variables qui influencent la qualité des résultats:
Formation et l’expérience du staff
La qualité des échantillons
La qualité des contrôles utilisés
La qualité des réactifs et de l’équipement
L’ interprétation des résultats
Transcription des résultats
Rapportage des résultats
1. Introduction
Valeur exacte (true value)
le concept idéal, impossible d’atteindre.
Valeur acceptée
La valeur approximative de la valeur exacte, avec une différence
négligeable.
Erreur
la différence entre le résultat généré et la vraie valeur (ou valeur
acceptée)
1. Introduction
Les sources d’erreurs
Imprécision
réfères au reproductibilité d’un résultat, erreurs fait au hasard
pipetage incorrect et variable
mix insuffisant de l’échantillon et réactif
incubation inconsistante de l’échantillon (temps, température)
présence des substances interférentes
Erreur d’inexactitude
différence entre la vraie valeur et la valeur obtenue (du test), erreurs
systématique
calibration incorrecte
mauvaise qualité d’une pipette automatique
erreur de calcul consistent
usage des réactifs, normes ou contrôle de qualité insuffisante
1. Introduction
Erreurs aléatoires
Erreurs systématique
x
x
x
x
True
x
Value
x
x
x
x
x
x
x
x
x
True
x
x
x
x
x
x
x
x
x
Value
x
x
x
x
Erreurs fait par hasard
Varie d’une façon imprévisible
Diffusion caractéristique de résultats
Difficile d’éliminer, réduit par répétition
Toujours la même façon
Souvent difficile à détecter
Possible à corriger en ajoutant
une correction compensante
1. Introduction
Pour le mise en œuvre d’un contrôle de qualité il faut décider la type
d’analyse et le type de contrôle.
Les différents types d’analyse demandent un traitement différent.
Les analyses quantitatif:
Fournissent un résultat chiffré en relation directe avec une quantité
de l’analyse à mesurer.
Les analyses qualitatif:
N’apportent pas d’info sur la quantité mais seulement sur sa
présence ou son absence (positif/négatif). Le résultat est obtenu par
la lecture de la réaction d’un observateur et reste comme ça
subjective.
1. Introduction
Les différents types de contrôle:
Contrôle de Qualité Interne (CQI):
Surveillance continue de la qualité du processus analytique pour
assurer les analyses précises et fiables
Réalisée au sein du laboratoire
Renseignée sur la reproductibilité et la précision des résultats
Effectuée avec un échantillon semblable à celui d’un patient
(idéalement plusieurs analyses: soit de niveau physiologique, soit
pathologique)
Validation des résultats en temps réel (détecter et corriger les erreurs
immédiatement)
On peut utiliser des échantillons:
Titrés ou non titrés
Commerciaux ou de fabrication in situ (« pools »)
1. Introduction
Contrôle de Qualité Externe (CQE)
Utiliser les résultats de plusieurs laboratoires qui analysent le
même échantillon avec le même système analytique.
Renseigner essentiellement sur l’exactitude des résultats
Garantir l’objectivité: la valeur des matériaux est inconnue pour
l’utilisateur, son résultat ne peut pas être influencé.
Inconvénient: délai de retour des résultats
Exactitude
La proximité de mesure à la vraie valeur
Précision
Indique le degré de fluctuation
2. Mise en œuvre d’un CQI
Etablir une procédures écrite (nature des échantillons, périodicité,
maîtrise statistique des procédés..)
Assigner responsabilité pour contrôle et évaluation
Formation du personnel
Obtention du matériel de contrôle
Collection des données
Calculer des valeurs cibles
Création du graph de Levey-Jennings
Suivi le routine et les valeurs de contrôles
Etablir et implémentation des actions correctives et guide de
dépannage
Etablir et assurance de la documentation complète et révision
2. Mise en œuvre d’un CQI
Comment choisir l’échantillon de CQI?
jamais l’étalon ou ce qui est utiliser pour calibrer
Qui est le plus similaire à ce du patient
Idéalement avec valeurs physiologiques et valeurs pathologiques
Homogénéité et stabilité: >1an si possible
De préférence un échantillon liquide prêt à utiliser (des aliquotes)
Si l’échantillon commercial n’existe pas, propres préparations des
échantillons de contrôle
Les contrôles contiennent souvent du matériel biologique, prenez des précautions universelles
2. Mise en œuvre d’un CQI
Différents types d’échantillon CQI?
Titrés ou non titrés
Commerciaux ou de fabrication in situ (« pools »)
In situ « pools »
Mise en commune des échantillons diagnostiques appropriés,
préservé dans des aliquotes
Il faut que ça soit caractérisé et analysé
Moins chère
Produit commercial
Moyen calculé par manufacteur
Facile à utilisé
chèrs
2. Mise en œuvre d’un CQI
Outils:
Compétence d’analyse statistique
Méthode manuel
graphique sur papier + Calculatrice
Méthode automatique
Ordinateur (fichier)
Définition de la périodicité
Il sera en fonction de:
La fréquence de calibration
la maintien
la longueur des séries
la durée d’utilisation de l’équipement
Recommandations des fournisseurs
2. Mise en œuvre d’un CQI
Périodicité (en général):
Système analytique simple: (glucomètre, ..)
à intervalle régulier, mais au moins toutes les deux semaines
mais aussi, lors de :
changement de lots des réactifs,
nouvel étalonnage,
changement de pipettes,
Des problèmes techniques et après chaque service,
changement de personnel (nouveau collaborateur),
et dans tous les cas où il est nécessaire ou en cas de doute sur les
résultats obtenus.
Système analytique complexe (Coulter, FACS, etc.)
au moins une fois par série d’analyses, mais min. une fois par jour
3. Préparation de l’échantillon de CQI
Préparation d’un positif faible:
Collecte un « pool » d’échantillons fortement positif
Dilution en série du « pool »
Sélection de dilution appropriée
O.D.
Entre les limites le détection et positif
Au niveau qu’on peut suivre la variabilité (en général 2 fois la limite de
détection)
Pos. Cont.
Cut Off
Neg. Cont.
2
4
8
16
32 64 128 256 512 1024
Double dilution
3. Préparation de l’échantillon de CQI
Evaluation du stabilité
CQI
-20°C
4°C
R/T
J7
ν
ν
ν
J14
ν
ν
ν
J21
ν
ν
x
J28
v
x
x
Dispense, identification et préservation des aliquotes
Pour les contrôles commerciales, il est recommandé d’utilisé une marque différente que votre
système d’analyse. Le fournisseur de votre système d’analyse peut vous conseiller.
Prenez garde aux valeurs limites indiquées par le fournisseur d’échantillons de CQ
4. Calcule des valeurs cibles
Estimation du titre du stock
Collecte au moins 10-20 valeurs représentatif (différents
opérateurs, différents jours)
Calcule la moyenne, l’écart type, le coefficient de
variation CV (idéalement CV <10%, max. 20%)
Moyenne:
L’ensemble des valeurs deviser par le nombre des observations
X = Moyenne
+X +X
X
(X ) =
1
2
n
3
... + X n
X1 = Premier résultat
Xn = Dernier résultat du série
n = Nombre total des observations
4. Calcule des valeurs cibles
L’écart Type (SD, Standard Déviation)
Distribution des valeurs autour de la moyenne
Donne une estimation de la précision de la mesure
Pour des valeurs avec une distribution normale, une valeur tombe
dans la gamme:
+/- 1 SD, 68.2% du temps
X
+/- 2 SD, 95.5% du temps
+/- 3 SD, 99.7% du temps
68.2%
95.5%
Il peut être calculé en utilisant la fonction statistique « écart type »
incluse dans la plupart des calculatrices ou selon la formule présentée
ci-dessous.
99.7%
-3s -2s
-1s
Mean
+1s
+2s
+3s
4. Calcule des valeurs cibles
Il peut être calculé en utilisant la fonction statistique « écart type » incluse dans la plupart des calculatrices
Exemple de calcul d’un écart type (s) (ou déviation standard) pour glucose:
Calcul de la moyenne (x) de 10 mesures du glucose:
x = (4,0 + 4,1 + 4,0 + 4,2 +4,1 + 4,1 + 4,2 + 4,0 + 4,2 + 4,1) ÷ 10
x = 4,1 mmol/l
Calcul de l’écart type (s) (ou déviation standard) en suivant la formule
ci-dessus
4. Calcule des valeurs cibles
Le coefficient de variation (CV):
L’écart type en fonction du moyenne
Idéalement < 10%
SD
CV =
x 100
mean
4. Réalisation du CQI
Fixation de l’intervalle de tolérance :
l’intervalle maximum de variation est de ± 3s autour de la valeur cible.
(si les limites du fournisseur sont plus étroites, ce sont ces dernières
qui sont à respecter)
Création du tableau :
Utilise l’écart type (s) pour préparer le tableau
Préparez et utilisez un tableau pour chaque analyse (et chaque niveau)
Introduisez les valeurs de CQI de chaque analyse chronologiquement.
Reportage
sur un diagramme de Levey-Jennings
Evaluation
Il ne faut pas dépasser les tolérances maximales
Utilisez les règles principales de Westgard et des actions correctives si
nécessaire
4. Réalisation du CQI
Les bonnes pratiques du laboratoire exigent des contrôles
physiologiques et pathologiques.
Etabli un tableau pour chaque analyse.
Analyte: Glucose
Date
01/09/2008
Contrôle
AZF23
Appareil
Réfletron
Numéro de lot
123456
Réactif
Roche
Date de péremption
31/08/2009
Numéro de lot
59-81A
Valeur cible* (X)
4,1 mmol/l
Unité de mesure
mmol/l
*S’il n’y a pas d’indications du fabricant, il convient de déterminer
la valeur cible soi-même par des analyses multiples (> 10).
4. Réalisation du CQI
Création d’un tableau de Levey-Jennings
Ce tableau présente les valeurs de contrôle de qualité
chronologiquement (série par série ou jour par jour)
Chaque analyse et chaque niveau de contrôle : son propre
graphique.
Utilisez l’écart type (s)
Les limites des intervalles de contrôle sont à ± 1s, ± 2s et ± 3s de la
moyenne
5. Les règles de Westgard
Il y a 6 règles de Westgard, élémentaires.
Ils permettent de détecter les mesures inexactes.
Sur les appliquant il est possible de décider si on déclarera un résultat
‘acceptable’ ou non.
Les principales sources d’erreurs :
Erreurs de transcription des résultats
Mauvaise compréhension des règles et diagrammes
Mauvaise utilisation des contrôles
Mauvais étalonnage de l’appareil
5. Les règles de Westgard
Dans le tableau de Leveys-Jennings ci-dessous
1. Les résultats 1-2-3-4-8-9-10 sont compris entre ± 2s et sont
CONFORMES.
2. Les résultats consécutifs 5 et 6 sont au-delà de +2s et ne sont PAS
CONFORMES.
3. Le résultat 7 est au-delà de +3s et n’est PAS CONFORME.
Dans ces deux derniers cas, il est essentiel de rechercher les différentes
sources d’erreurs et de prévoir des mesures correctives.
5. Les règles de Westgard
CONFORME OU NON CONFORME?
La valeur mesurée est comprise entre
les seuils d’avertissement:
= résultat conforme
La valeur mesurée est comprise entre
le seuil d’avertissement et le seuil
d’alarme :
= avertissement
La valeur mesurée est en dehors du
seuil d’alarme
= résultat non conforme
5. Les règles de Westgard
5. Les règles de Westgard
5. Les règles de Westgard
Comment gagner du temps et de l’efficacité: Différents niveaux de
contrôle
Idéalement le CQI devrait être effectué – en parallèle – sur 2
niveaux de concentrations : un niveau physiologique et un niveau
pathologique
Si on cumule les informations obtenues aux deux niveaux de
mesure et qu'on applique sur chaque niveau certaines des règles
déjà décrites, on peut deux fois plus rapidement et avec deux
fois moins de données se rendre compte d'un éventuel
dysfonctionnement
Les règles appliquées à deux niveaux de contrôle ne s’appliquent que si chaque résultat
individuellement respecte les règles de Westgard. Par exemple, la violation de la règle 13s par
un seul résultat (pathologique ou physiologique implique l’arrêt des mesures.
5. Les règles de Westgard
5. Les règles de Westgard
6. Documentation et Archivage
But? Garder une trace des contrôles de qualité interne effectués par le
laboratoire.
Une archive comprend:
La représentation graphique des résultats liés à une analyse
Le tableau des valeurs correspondantes
Fait manuellement ou automatisé en utilisant un logiciel qui donne les
graphiques dynamiques en temps réel.
6. Documentation et Archivage
Enregistrement manuel:
Initiales du laborantin
Echantillon CQI: N°lot, échéance, échéance de l’aliquote
Kit réactif: N°lot, échéance
Calibration, date
Indique avec des symboles simple sur le Graph de Levey-Jennings le
changement des ces données pour trouver plus facilement les causes
en cas de problèmes.
6. Documentation et Archivage
6. Documentation et Archivage
Pour la validité opérationnelle il faut établir un
document avec des info claires sur:
Stratégie du contrôle de qualité
Spécifications ou limites acceptables (objectifs à
atteindre)
Mise en œuvre: matériaux, fréquence, conduite à tenir
en cas de rejets,..
Enregistrement et traitement statistiques des données
obtenues
Conclusion et décision au regard des limites
acceptables fixées.