adult japanese sex

Bull. Fr. Pêche Plscic.
(1998)349:163-176
— 163 —
ARTIFICIAL INDUCTION OF G O N A D A L MATURATION AND
O V U L A T I O N IN T H E J A P A N E S E E E L (ANGUILLA
JAPONICA1.
ETS.).
LIN
H A O - R A N (1), X I E - G A N G (2), Z H A N G L I - H O N G (1),
W A N G X I A O - D O N G (1), C H E N L I A N - X I (1)
(1)
Institute of E c o n o m i c A q u a t i c A n i m a l s , S c h o o l of Life S c i e n c e s , Z h o n g s h a n University,
Guangzhou 510275, China.
(2)
Pearl River F i s h e r y R e s e a r c h
Guangzhou 510380, China.
Institute, C h i n e s e
Academy
of
Fishery
Sciences,
ABSTRACT
8 i n j e c t i o n s of c a r p p i t u i t a r y e x t r a c t ( C P E , 5 pit. / f i s h / 10 d a y s ) i n d u c e d o v a r i a n
m a t u r a t i o n in f e m a l e e e l , g o n a d o s o m a t i c index ( G S I ) i n c r e a s i n g s i g n i f i c a n t l y t o 4 3 - 5 5 % .
4 i n j e c t i o n s of C P E ( 1 - 2 pit. / f i s h / 10 d a y s ) i n d u c e d s p e r m a t o g e n e s i s a n d s p e r m i a t i o n
in m a l e e e l , G S I i n c r e a s i n g t o 2 . 1 - 2 . 8 % . A f t e r s e r i a l i n j e c t i o n s of C P E , s e r u m
g o n a d o t r o p i n ( G t H ) levels i n c r e a s e d significantly, i n d i c a t i n g that t h e e x o g e n e o u s G t H
s t i m u l a t e d g o n a d a l d e v e l o p m e n t a n d m a t u r a t i o n in t h e J a p a n e s e e e l . 8 i m p l a n t a t i o n s o f
17 a - m e t h y l t e s t o s t e r o n e ( M T ) o r a n d r o s t e n e d i o n e ( A D S D ) ( 5 0 u g / g b o d y w e i g h t / 1 5 days)
s t i m u l a t e d o v a r i a n m a t u r a t i o n in f e m a l e e e l , G S I i n c r e a s i n g s i g n i f i c a n t l y t o 3 8 - 4 9 % .
4 i m p l a n t a t i o n s of M T or A D S D ( 5 0 u g / g b o d y w e i g h t / 1 5 d a y s ) i n d u c e d s p e r m a t o g e n e s i s
a n d s p e r m i a t i o n in t h e m a l e e e l , G S I i n c r e a s i n g t o 2 . 1 - 3 . 5 % . M T o r A D S D i m p l a n t a t i o n s
significantly elevated pituitary a n d s e r u m GtH contents. A D S D or M T implantations
r e s u l t e d in t h e s i g n i f i c a n t e l e v a t i o n of s e r u m e s t r a d i o l l e v e l s in f e m a l e e e l a n d s e r u m
t e s t o s t e r o n e levels in m a l e e e l s . In f e m a l e e e l , A D S D i m p l a n t a t i o n s s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d
m a m m a l e a n - l i b e - g o n a d o t r o p i n - r e l e a s i n g h o r m o n e ( m G n R H ) c o n t e n t in b r a i n a n d pituitary.
T h e s e r e s u l t s d e m o n s t r a t e d t h a t t h e p o s i t i v e f e e d b a c k e f f e c t s of s e x s t e r o i d s o n t h e brain
( h y p o t h a l a m u s ) - p i t u i t a r y - g o n a d a x i s p l a y a n i m p o r t a n t r o l e o n t h e i n d u c t i o n of g o n a d a l
d e v e l o p m e n t a n d m a t u r a t i o n in t h e J a p a n e s e e e l , a n d t h e e n d o g e n e o u s G t H is t h e k e y
h o r m o n e d u r i n g t h e s e p h y s i o l o g i c a l p r o c e s s e s . In t h e m a t u r e d f e m a l e e e l , o v u l a t i o n a n d
s p a w n i n g c a n b e i n d u c e d 1 8 - 2 1 h o u r s f o l l o w i n g a n i n j e c t i o n o f C P E a l o n e or in
combination with [D-Ala , Pro -NEt]-luteinizing hormone-releasing h o r m o n e ( L H R H - A ) and
dopamine antagonist domperidone (DOM).
6
9
K e y - w o r d s : h o r m o n a l i n d u c t i o n , g o n a d a l m a t u r a t i o n , o v u l a t i o n , Anguilla
japonica.
INDUCTION ARTIFICIELLE DE LA MATURATION DES G O N A D E S
E T D E L ' O V U L A T I O N C H E Z L ' A N G U I L L E J A P O N A I S E (ANGUILLA
JAPONICA
T. E T S . ) .
RÉSUMÉ
8 i n j e c t i o n s d ' e x t r a i t h y p o p h y s a i r e d e c a r p e ( C P E , 5 h y p o p h y s e s / p o i s s o n / 1 0 jours)
i n d u i s e n t la m a t u r a t i o n o v a r i e n n e c h e z l ' a n g u i l l e f e m e l l e , le r a p p o r t g o n a d o s o m a t i q u e
( R G S = GSI) a u g m e n t a n t significativement jusqu'à 4 3 - 5 5 %. 4 injections de CPE
Article available at http://www.kmae-journal.org or http://dx.doi.org/10.1051/kmae:1998041
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
(1998)
349:163-176
- 164
—
( 1 - 2 h y p o p h y s e s / p o i s s o n / 10 j o u r s ) i n d u i s e n t la s p e r m a t o g e n è s e et la s p e r m i a t i o n
c h e z l ' a n g u i l l e m â l e , le R G S a u g m e n t a n t j u s q u ' à 2 , 1 - 2 , 8 % . A p r è s d e s i n j e c t i o n s
r é p é t é e s d e C P E . les t a u x de gonadotropine (GtH) sérique a u g m e n t e n t significativement,
i n d i q u a n t q u e la G t H e x o g è n e s t i m u l e le d é v e l o p p e m e n t g o n a d i q u e e t la
m a t u r a t i o n d e l ' A n g u i l l e j a p o n a i s e . 8 i m p l a n t s d e 17 a - m é t h y l t e s t o s t é r o n e ( M T ) o u
d ' a n d r o s t è n é d i o n e ( A D S D ) ( 5 0 u g / g poids d u c o r p s / 15 j o u r s ) s t i m u l e n t la m a t u r a t i o n
o v a r i e n n e c h e z l'anguille f e m e l l e , le R G S a u g m e n t a n t s i g n i f i c a t i v e m e n t j u s q u ' à 3 8 - 4 9 %.
4 i m p l a n t s d e M T o u A D S D ( 5 0 u.g / g p o i d s d u c o r p s / 15 j o u r s ) i n d u i s e n t la
s p e r m a t o g e n è s e et la s p e r m i a t i o n c h e z l'anguille m â l e , le R G S a u g m e n t a n t j u s q u ' à
2 , 1 - 3 , 5 % . L e s i m p l a n t s d e M T o u A D S D élèvent s i g n i f i c a t i v e m e n t les t a u x h y p o p h y s a i r e s
e t s é r i q u e s d e G t H . L e s i m p l a n t s d e M T ou A D S D r é s u l t e n t e n u n e é l é v a t i o n significative
d e s t a u x d ' e s t r a d i o l s é r i q u e c h e z la f e m e l l e et d e t e s t o s t e r o n e s é r i q u e c h e z le m â l e . C h e z
l ' a n g u i l l e f e m e l l e , les i m p l a n t s d ' A D S D a u g m e n t e n t s i g n i f i c a t i v e m e n t le c o n t e n u c é r é b r a l et
h y p o p h y s a i r e en g o n a d o l i b é r i n e d e type m a m m a l i e n n e ( m G n R H ) . C e s résultats
d é m o n t r e n t q u e l e r é t r o c o n t r ô l e p o s i t i f d e s s t é r o ï d e s s e x u e l s s u r l'axe c e r v e a u
( h y p o t h a l a m u s ) - h y p o p h y s e - g o n a d e s joue un rôle i m p o r t a n t d a n s l'induction du
d é v e l o p p e m e n t g o n a d i q u e et d e la m a t u r a t i o n c h e z l'Anguille j a p o n a i s e et q u e la G t H
e n d o g è n e e s t l ' h o r m o n e c l é d u r a n t c e s p r o c e s s u s p h y s i o l o g i q u e s . C h e z l'anguille f e m e l l e
m û r e , l ' o v u l a t i o n et la p o n t e p e u v e n t ê t r e i n d u i t e s 1 8 - 2 1 h e u r e s a p r è s u n e i n j e c t i o n d e
C P E s e u l o u en c o m b i n a i s o n a v e c un a g o n i s t e d e la g o n a d o l i b é r i n e [ D - A l a ,
P r o - N E t ] - L H R H ( L H R H - A ) et u n a n t a g o n i s t e d e la d o p a m i n e , le d o m p e r i d o n e ( D O M ) .
6
9
Mots-clés
japonica.
:
induction
hormonale,
maturation
gonadique,
ovulation,
Anguilla
INTRODUCTION
T h e J a p a n e s e e e l , Anguilla japonica,
is a h i g h l y v a l u e d s p e c i e s in t h e a q u a c u l t u r e of
C h i n a . T h e e e l c u l t u r e in C h i n a d e v e l o p e d rapidly in r e c e n t y e a r s , t h e a n n u a l p r o d u c t i o n of
c u l t u r e d - e e l a m o u n t e d to 7 0 - 9 0 t h o u s a n d tons ; e s p e c i a l l y in s o u t h e r n C h i n a , in t h e P e a r l r i v e r d e l t a a n d H a n - r i v e r d e l t a a r e a of G u a n g d o n g P r o v i n c e , s e v e r a l l a r g e e e l - c u l t u r e
f a r m s w e r e e s t a b l i s h e d , t h e a n n u a l yield o f c u l t u r e d - e e l e x c e e d e d 5 0 t h o u s a n d t o n s ,
a c c o u n t for 6 0 % of t o t a l p r o d u c t i o n of China. D u e to t h e d e v e l o p m e n t of large s c a l e of eel
f a r m i n g , m o r e a n d m o r e g l a s s e e l s a r e n e e d e d . Currently, a b o u t 6 0 - 8 0 t o n s of g l a s s e e l s
( e q u a l s 4 0 0 - 5 0 0 m i l l i o n g l a s s e e l s ) a r e d e m a n d e d for c u l t u r e in C h i n a . H o w e v e r , e e l larva
is e n t i r e l y d e p e n d e n t o n t h e c a p t u r e of wild. T h e r e p r o d u c t i v e c y c l e of t h e J a p a n e s e e e l ,
l i k e t h a t of t h e E u r o p e a n e e l (A. anguilla),
is c h a r a c t e r i z e d by a l o n g d e l a y b e f o r e s e x u a l
m a t u r a t i o n , a n d , e v e n at t h e b e g i n n i n g of t h e r e p r o d u c t i v e m i g r a t i o n t o t h e s e a , t h e
g o n a d s r e m a i n i m m a t u r e ; f u r t h e r m o r e , if the r e p r o d u c t i v e m i g r a t i o n is b l o c k e d , s u c h a s by
c a p t i v i t y , s e x u a l m a t u r a t i o n w i l l n e v e r occur. T h u s , t h e d i s c o v e r y of m e a n s of i n d u c i n g
o v a r i a n d e v e l o p m e n t to t h e p r e s p a w n i n g s t a g e , to e n a b l e p r o d u c t i o n of fertile e g g s a n d
v i a b l e l a r v a e , w o u l d b e a m a j o r a c h i e v e m e n t . T r e a t m e n t of J a p a n e s e e e l s w i t h
e x o g e n e o u s g o n a d o t r o p i n ( G t H ) , s u c h a s c a r p pituitary e x t r a c t ( C P E ) o r h u m a n c h o r i o n i c
g o n a d o t r o p i n ( H C G ) h a s b e e n d e m o n s t r a t e d to i n d u c e g o n a d a l d e v e l o p m e n t as w e l l a s
o v u l a t i o n a n d s p e r m i a t i o n , but v i a b l e larvae h a v e not b e e n p r o d u c e d s o far ( O H T A et al.,
1 9 9 6 ) . C h r o n i c t r e a t m e n t w i t h t e s t o s t e r o n e (T) c a n s t i m u l a t e o v a r i a n d e v e l o p m e n t of
J a p a n e s e e e l t o t h e p r e s p a w n i n g s t a g e , and p r o v i d e a n e w l e a d o n t h e difficult p r o b l e m of
i n d u c t i o n of g o n a d a l m a t u r a t i o n of t h e J a p a n e s e eel (LIN et al., 1 9 9 1 ) .
This paper introduces our studies on the e x o g e n e o u s and e n d o g e n e o u s
g o n a d o t r o p i n (GtH) stimulated gonadal development and maturation, and the hormonal
t r e a t m e n t i n d u c i n g o v u l a t i o n in t h e J a p a n e s e e e l .
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
— 165 —
(7995)349 : 163-176
MATERIAL AND METHODS
F r e s h w a t e r s t a g e J a p a n e s e silver e e l s ( f e m a l e b o d y w e i g h t 3 8 0 - 5 6 0 g , b o d y length
5 5 - 6 7 c m , male body weight 1 2 0 - 2 4 0 g, body length 4 2 - 5 3 cm) w e r e captured from
O c t o b e r t o D e c e m b e r n e a r t h e e s t u a r y of t h e P e a r l River, G u a n g d o n g P r o v i n c e , C h i n a ,
a n d t r a n s p o r t e d to t h e l a b o r a t o r y . In t h e l a b o r a t o r y , t h e e e l s w e r e m a i n t a i n e d i n d o o r in
t a n k s at r o o m t e m p e r a t u r e ( r a n g e 1 8 - 2 6 ° C ) u n d e r a n a t u r a l p h o t o p e r i o d r e g i m e w i t h
r e c y c l i n g a r t i f i c i a l s e a w a t e r (salinity 3 0 - 3 5 p p t ) . E e l s w e r e a c c l i m a t e d t o l a b o r a t o r y
c o n d i t i o n s m o r e t h a n o n e m o n t h . All e x p e r i m e n t s w e r e c o n d u c t e d o n l a t e - J a n u a r y till May.
17 a - m e t h y l t e s t o s t e r o n e ( M T ) a n d a n d r o s t e n e d i o n e ( A D S D ) w e r e p u r c h a s e d f r o m
S i g m a , S t L o u i s , M i s s o u r i , U.S.A. ; d o m p e r i d o n e ( D O M ) w a s p u r c h a s e d f r o m J a n s s e n ,
B e e r s e , B e l g i u m ; L H R H - A w a s p u r c h a s e d f r o m t h e N i n g b o F i s h H o r m o n e Factory,
Z h e j i a n g P r o v i n c e , C h i n a . M T a n d A D S D w e r e i n c o r p o r a t e d into s i l a s t i c a n d m a k e p e l l e t
a s d e s c r i b e d b y P A N K H U R S T et al. ( 1 9 8 6 ) a n d L I N et al. ( 1 9 9 1 ) . C a r p p i t u i t a r i e s w e r e
c o l l e c t e d locally.
T h e e f f e c t s of e x o g e n e o u s G t H a n d e n d o g e n e o u s G t H o n t h e i n d u c t i o n of g o n a d a l
m a t u r a t i o n w e r e i n v e s t i g a t e d . For t h e e f f e c t s of e x o g e n e o u s G t H , silver e e l s w e r e injected
i n t r a m u s c u l a r l y w i t h c a r p p i t u i t a r y e x t r a c t ( C P E ) (5 p i t u i t a r y / f e m a l e e e l a n d
1 - 2 p i t u i t a r y / m a l e e e l ) . I n j e c t i o n s w e r e g i v e n at t h e s t a r t of t h e e x p e r i m e n t , a n d a t 10-day
interval. C o n t r o l s w e r e injected with f r e s h w a t e r t e l e o s t physiological s a l i n e (PS ;
B U R N S T O C K , 1 9 5 8 ) . F o r t h e e f f e c t s of e n d o g e n e o u s G t H , t h e s i l a s t i c p e l l e t s w h i c h
c o n t a i n e d M T o r A D S D w e r e i m p l a n t e d w i t h f o r c e p s into t h e p e r i t o n e a l cavity of silver e e l
t h r o u g h a n i n c i s i o n ( 2 - 4 m m ) c u t in the b o d y w a l l . I m p l a n t s ( M T o r A D S D 5 0 jag / g b o d y
w e i g h t ) w e r e g i v e n at t h e s t a r t of t h e e x p e r i m e n t , a n d at 1 5 - d a y i n t e r v a l . C o n t r o l s r e c e i v e d
a b l a n k silastic pellet. B l o o d s a m p l e s w e r e o b t a i n e d by p u n c t u r i n g t h e c a u d a l v a s c u l a t u r e
w i t h a 2 5 g u a g e n e e d l e a t t a c h e d t o a 1 m l s y r i n g e . A t t h e e n d of e x p e r i m e n t , t h e f i s h w e r e
killed by d e c a p i t a t i o n , a n d t h e p i t u i t a r i e s q u i c k l y r e m o v e d a n d f r o z e n until e x t r a c t i o n . T h e
o v a r i e s w e r e r e m o v e d a n d w e i g h e d t o d e t e r m i n e g o n a d o s o m a t i c index ( G S I , = g o n a d
w e i g h t / b o d y w e i g h t X 1 0 0 ) . B l o o d s a m p l e s w e r e a l l o w e d t o clot o n ice for s e v e r a l h o u r s ,
a n d t h e s e r u m w a s s e p a r a t e d b y c e n t r i f u g a t i o n a n d s t o r e d at - 2 5 ° C until d e t e r m i n a t i o n of
GtH, t e s t o s t e r o n e (T) or e s t r a d i o l ( E ) b y r a d i o i m m u n o a s s a y ( R I A ) . C r u d e pituitary extracts
w e r e p r e p a r e d in R I A buffer by g r i n d i n g w i t h a h o m o g e n i z e r ; t h e s u p e r n a t a n t s w e r e k e p t
f r o z e n at - 2 5 ° C until R I A . G t H levels of p i t u i t a r y a n d s e r u m s a m p l e s w e r e m e a s u r e d in a
h e t e r o l o g o u s R I A u s i n g a n a n t i s e r u m to t h e p - s u b u n i t of c a r p G t H a n d c a r p G t H for t h e
a s s a y s t a n d a r d s a n d t r a c e r , a s d e s c r i b e d by L I N et al. ( 1 9 8 6 , 1 9 9 1 ) . G o n a d o t r o p i n
r e l e a s i n g h o r m o n e ( G n R H ) levels of b r a i n a n d p i t u i t a r y s a m p l e s w e r e m e a s u r e d by R I A
s p e c i f i c for m a m m a l i a n G n R H ( m G n R H ) , a s d e s c r i b e d b y K I N G et al. ( 1 9 9 0 ) . S e r u m
s a m p l e s w e r e e x t r a c t e d w i t h d i e t h y l e t h e r a n d a n a l y s e d for T a n d E c o n t e n t u s i n g t h e
p r o t o c o l d e s c r i b e d b y V A N D E R K R A A K et al. ( 1 9 8 4 ) . D a t a w e r e a n a l y s e d by o n e - w a y
a n a l y s i s of v a r i a n c e a n d D u n c a n ' s m u l t i p l e r a n g e t e s t .
2
2
RESULTS A N D DISCUSSION
I.
Effects of CPE injections o n t h e i n d u c t i o n of g o n a d a l maturation
O n d a y 8 0 , 1 0 d a y s f o l l o w i n g t h e e i g h t h i n j e c t i o n of C P E , t h e G S I of f e m a l e silver
eels w e r e significantly increased and m u c h higher than the controls ; histological
e x a m i n a t i o n of t h e o v a r i e s d e m o n s t r a t e d t h a t t h e o o c y t e s w e r e fully m a t u r e d . O n day 4 0 ,
10 d a y s f o l l o w i n g t h e f o u r t h i n j e c t i o n of C P E , t h e G S I of m a l e silver e e l s w e r e significantly
i n c r e a s e d a n d h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l s , t h e t e s t e s w e r e fully m a t u r e d , milt b e i n g e x t r a c t e d
by g e n t l y s q u e e z i n g t h e a b d o m e n of fish ( F i g u r e 1).
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
(1998)
— 166
349:163-176
F ema1e
Maie
x .
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c
CJ
ta
E
o
t/>
o
-a
nj
C
O
O
Control s
CPE
Control s
CPE
Figure 1
E f f e c t s o n d a y 8 0 o f i n j e c t i o n e v e r y 10 d a y s ( i n j e c t i o n o n d a y 0 , 1 0 , 2 0 , 3 0 , 4 0 , 5 0 ,
6 0 , 7 0 ) o f C P E (5 p i t u i t a r y / f i s h ) o r PS ( c o n t r o l s ) o n t h e g o n a d o s o m a t i c
index
( G S I ) o f f e m a l e s i l v e r e e l a n d o n d a y 4 0 o f i n j e c t i o n e v e r y 10 d a y s ( i n j e c t i o n o n
d a y 0 , 1 0 , 2 0 , 3 0 ) o f C P E (1 p i t u i t a r y / f i s h ) o r P S ( c o n t r o l s ) o n t h e G S I o f m a l e
silver eel. The number
of f i s h in each g r o u p i s i n d i c a t e d at t h e b a s e of t h e
columns.
Figure 1
E f f e t s , a u j o u r 8 0 , d e l ' i n j e c t i o n t o u s l e s 10 j o u r s ( i n j e c t i o n a u j o u r 0, 1 0 , 2 0 , 3 0 ,
4 0 , 5 0 , 6 0 , 7 0 ) d ' e x t r a i t h y p o p h y s a i r e d e c a r p e ( C P E ) (5 h y p o p h y s e s / p o i s s o n )
ou
de
sérum
physiologique
(RGS = Gonadosomatic
(contrôles)
sur
le
rapport
gonadosomatique
index) c h e z l'anguille femelle argentée et, a u j o u r 40, d e
l ' i n j e c t i o n t o u s l e s 10 j o u r s ( i n j e c t i o n a u j o u r 0 , 1 0 , 2 0 , 3 0 ) d e C P E (1 h y p o p h y s e /
p o i s s o n ) o u d e s é r u m p h y s i o l o g i q u e ( c o n t r ô l e s ) s u r le R G S c h e z l ' a n g u i l l e m â l e
a r g e n t é e . L e n o m b r e d e p o i s s o n s d a n s c h a q u e g r o u p e e s t i n d i q u é à la b a s e d e s
colonnes.
The
serum
GtH
contents
of f e m a l e
s i l v e r e e l s after
six C P E
injections
were
s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n in t h e c o n t r o l s ( F i g u r e 2 ) . O n d a y 5 1 , first d a y f o l l o w i n g t h e s i x t h
injection, t h e s e r u m G t H levels h a d increased sharply a n d a v e r a g e d 35.21 ± 3.52 ng / ml ;
at t h e 8 t h d a y after i n j e c t i o n , s e r u m G t H l e v e l s w e r e still s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h e
controls
; whereas
the
9th
day
after
injection,
serum
GtH
levels
dropped
to
3 . 8 6 ± 0 . 7 8 n g / m l , v e r y c l o s e to t h e G t H levels of c o n t r o l s ( 1 . 9 4 ± 0.21 n g / m l ) . T h e s e
Bull. Fr. Pêche Piscic.
— 167 —
(1998) 349:163-176
r e s u l t s s u g g e s t that the h i g h s e r u m G t H level r e s u l t i n g f r o m e x o g e n e o u s C P E i n j e c t i o n s
p l a y s a d e t e r m i n a n t role in t h e s t i m u l a t i o n of g o n a d a l d e v e l o p m e n t a n d m a t u r a t i o n of
J a p a n e s e silver e e l .
40
Controls
35
I
I CPE
injection
C
+J
15
*
T
C O
$77
Days a f t e r
the sixth
injection
Figure 2
E f f e c t s o f s i x i n j e c t i o n s e v e r y 1 0 d a y s ( i n j e c t i o n o n d a y 0, 1 0 , 2 0 , 3 0 , 4 0 , 50) o f
C P E (5 p i t u i t a r y / f i s h ) o r P S ( c o n t r o l s ) o n s e r u m G t H c o n c e n t r a t i o n s o f f e m a l e
s i l v e r e e l . D a t a a r e r e p r e s e n t e d i n m e a n ± S E . N u m b e r o f f i s h = 5. C P E i n j e c t e d
f i s h : G S I = 2 8 . 4 2 ± 2 . 5 6 % ; c o n t r o l s : G S I = 1.31 ± 0 . 2 4 % . ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r
t h a n t h e c o n t r o l s (p<0.05) ; " v e r y s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l s (p<0.01).
Figure 2
E f f e t s d e s i x i n j e c t i o n s t o u s l e s 1 0 j o u r s ( i n j e c t i o n a u j o u r 0 , 1 0 , 2 0 , 3 0 , 4 0 , 50) d e
C P E (5 h y p o p h y s e s / p o i s s o n ) o u d e s é r u m p h y s i o l o g i q u e ( c o n t r ô l e s ) s u r l e s
taux sériques de gonadotropine (GtH) chez l'anguille femelle argentée. Les
d o n n é e s représentent les m o y e n n e s ± erreur s t a n d a r d (n = 5 p o i s s o n s / groupe).
P o i s s o n s i n j e c t é s avec CPE : R G S = 28,42 ± 2,56 % ; c o n t r ô l e s :
R G S = 1,31 ± 0 , 2 4 % . ' S i g n i f i c a t i v e m e n t p l u s é l e v é q u e l e s c o n t r ô l e s ( p < 0 , 0 5 ) ;
" t r è s significativement plus élevé q u e les c o n t r ô l e s (p<0,01).
II.
Effects of
maturation
MT
or
ADSD
implantations
on
the induction
of
gonadal
O n d a y 1 2 0 , 15 d a y s f o l l o w i n g t h e e i g h t h i m p l a n t a t i o n of MT, or A D S D , a p r e c u r s o r
of t e s t o s t e r o n e b i o s y n t h e s i s , t h e G S I of f e m a l e s i l v e r e e l s h a d s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d a n d
w e r e m u c h h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l s , h i s t o l o g i c a l e x a m i n a t i o n of o v a r i e s d e m o n s t r a t e d t h a t
t h e o o c y t e s w e r e fully m a t u r e d . O n d a y 6 0 , 15 d a y s f o l l o w i n g t h e f o u r t h i m p l a n t a t i o n of M T
or A D S D , t h e G S I of m a l e silver e e l s h a d s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d a n d w e r e h i g h e r t h a n t h e
c o n t r o l s , t h e t e s t e s w e r e fully m a t u r e d ( F i g u r e 3 ) .
Bull. Fr. Pêche Piscic.
(1998)
— 168 —
349 :163-176
Female
Male
X
-y
c
cS
H
O
O
" O
rt
c
o
20
in
Controls
Steroid
implantation
20
10
Control s
Steroid
implantation
Figure 3
E f f e c t s o n d a y 1 2 0 o f i m p l a n t a t i o n e v e r y 15 d a y s ( i m p l a n t a t i o n o n d a y 0 , 1 5 , 3 0 ,
4 5 , 6 0 , 7 5 , 9 0 , 1 0 5 ) o f M T o r A D S D (50 u g / g b o d y w e i g h t ) , o r b l a n k s i l a s t i c p e l l e t
( c o n t r o l s ) o n t h e G S I o f f e m a l e s i l v e r e e l , a n d o n d a y 6 0 o f i m p l a n t a t i o n e v e r y 15
d a y s ( i m p l a n t a t i o n o n d a y 0, 1 5 , 3 0 , 4 5 ) o f M T o r A D S D , o r b l a n k s i l a s t i c p e l l e t
( c o n t r o l s ) o n t h e GSI of male eel. The n u m b e r of f i s h in each g r o u p is i n d i c a t e d
at t h e b a s e of t h e c o l u m n s .
Figure 3
E f f e t s , a u j o u r 1 2 0 , d e l ' i m p l a n t a t i o n t o u s l e s 15 j o u r s ( i m p l a n t a t i o n a u j o u r 0 , 1 5 ,
30, 4 5 , 6 0 , 7 5 , 9 0 , 1 0 5 ) d e méthyltestostérone (MT) o u d ' a n d r o s t è n é d i o n e (ADSD)
(50 p g / g p o i d s d u c o r p s ) , o u de s i l a s t i q u e s e u l ( c o n t r ô l e s ) s u r le R G S
( G o n a d o s o m a t i c i n d e x ) c h e z l'anguille femelle a r g e n t é e et, a u j o u r 60, de
l ' i m p l a n t a t i o n t o u s l e s 1 5 j o u r s ( i m p l a n t a t i o n a u j o u r 0, 1 5 , 3 0 , 4 5 ) d e M T o u
d ' A D S D o u d e s i l a s t i q u e s e u l ( c o n t r ô l e s ) c h e z le m â l e . L e n o m b r e d e p o i s s o n s
d a n s c h a q u e g r o u p e e s t i n d i q u é à la b a s e d e s c o l o n n e s .
III. E f f e c t s o f M T o r A D S D
pituitary-gonad axis
1. Effects
of ADSD
implantation
implantation
on the brain
on brain and pituitary
mGnRH
(hypothalamus)-
concentrations
S t u d i e s o n E u r o p e a n e e l {Anguilla
anguilla)
h a v e d e m o n s t r a t e d that t w o G n R H
m o l e c u l a r f o r m s , s i m i l a r t o m a m m a l i a n G n R H ( m G n R H ) a n d to c h i c k e n G n R H - I I
(cGnRH-11) w e r e d i s t r i b u t e d in t h e brain a n d pituitary of silver eel ( K I N G et al., 1 9 9 0 ) ;
m G n R H is t h e m a i n f o r m of G n R H involved in the c o n t r o l of G t H r e l e a s e ( M O N T E R O et
al., 1 9 9 5 ) . T h e r e f o r e , e f f e c t s of A D S D i m p l a n t a t i o n s o n b r a i n a n d p i t u i t a r y m G n R H
c o n c e n t r a t i o n s of f e m a l e silver e e l w e r e d e t e r m i n e d .
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
(1998)349:163-176
— 169 —
In f e m a l e e e l s , o n d a y 1 0 5 , 15 d a y s f o l l o w i n g t h e s e v e n t h i m p l a n t a t i o n o f A D S D ,
t o t a l m G n R H c o n t e n t in t h e b r a i n ( i n c l u d i n g p i t u i t a r y ) w a s a b o u t t w i c e h i g h e r t h a n t h e
b l a n k - i m p l a n t e d c o n t r o l s ; in t h e o l f a c t o r y b u l b s , t e l e n c e p h a l o n , o p t i c t e c t u m - t h a l a m u s ,
h y p o t h a l a m u s , a n d pituitary, m G n R H c o n t e n t w a s s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l s ,
w h e r e a s m G n R H c o n t e n t in c e r e b e l l u m a n d m e d u l l a o b l o n g a t a w a s n o t d i f f e r e n t
( F i g u r e 4 ) . T h e s e r e s u l t s i n d i c a t e d t h a t t h e p o s i t i v e f e e d b a c k e f f e c t s of A D S D p r e s u m a b l y
e f f e c t o n t h e b r a i n ( h y p o t h a l a m u s ) t o s t i m u l a t e G n R H s y n t h e s i s a n d r e l e a s e in t h e
J a p a n e s e silver eel.
Control s
ADSD
implantation
c
ca
CO
S-
o
c
2
c
6
Figure 4
E f f e c t s o n d a y 1 0 5 o f i m p l a n t a t i o n e v e r y 1 5 d a y s ( i m p l a n t a t i o n o n d a y 0, 1 5 , 3 0 ,
45, 60, 75, 90) o f A D S D (50 u g / g b o d y w e i g h t ) o r b l a n k s i l a s t i c pellet ( c o n t r o l s )
o n m G n R H c o n t e n t s i n d i s c r e t e b r a i n a r e a s a n d p i t u i t a r y of f e m a l e s i l v e r eel.
A . p i t u i t a r y ; B . o l f a c t o r y b u l b s a n d t e l e n c e p h a l o n ; C. o p t i c t e c t u m - t h a l a m u s
a n d h y p o t h a l a m u s ; D. c e r e b e l l u m a n d m e d u l l a o b l o n g a t a . D a t a a r e r e p r e s e n t e d
i n m e a n ± S E . N u m b e r o f f i s h i n e a c h g r o u p = 5. A D S D i m p l a n t e d f i s h :
G S I = 2 9 . 0 8 ± 5 . 3 0 % ; c o n t r o l s : G S I = 1.21 ± 0 . 3 6 % . ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n
the c o n t r o l s (p<0.05).
Figure 4
E f f e t s , a u j o u r 105, d e l ' i m p l a n t a t i o n t o u s l e s 15 j o u r s ( i m p l a n t a t i o n a u j o u r 0 , 1 5 ,
30, 45, 60, 75, 90) d ' A D S D (50 u g / g p o i d s d u c o r p s ) o u d e s i l a s t i q u e seul
( c o n t r ô l e s ) s u r le c o n t e n u e n g o n a d o l i b é r i n e d e t y p e m a m m a l i e n n e ( m G n R H ) de
l ' h y p o p h y s e et d e d i f f é r e n t e s r é g i o n s d u c e r v e a u c h e z l'anguille
femelle
a r g e n t é e . A . h y p o p h y s e ; B. b u l b e s o l f a c t i f s e t t é l e n c é p h a l e ; C. t o i t o p t i q u e t h a l a m u s e t h y p o t h a l a m u s ; D. c e r v e l e t e t m o e l l e a l l o n g é e . L e s d o n n é e s
r e p r é s e n t e n t les m o y e n n e s ± erreur s t a n d a r d (n = 5 p o i s s o n s / groupe).
P o i s s o n s i m p l a n t é s a v e c A D S D : R G S = 29,08 ± 5,30 % ; c o n t r ô l e s :
R G S = 1,21 ± 0 , 3 6 % . ' S i g n i f i c a t i v e m e n t p l u s é l e v é q u e l e s c o n t r ô l e s ( p < 0 , 0 5 ) .
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
2.
(1998)
Effects
— 170
349 :163-176
of
MT
or
ADSD
—
implantation
on
pituitary
and
serum
GtH
concentrations
In f e m a l e e e l s , o n d a y 7 5 , 1 0 5 , a n d 1 2 0 , d u r i n g 15 d a y s f o l l o w i n g t h e fifth, s e v e n t h
a n d e i g h t h i m p l a n t a t i o n of M T or A D S D , GtH c o n t e n t in t h e p i t u i t a r y i n c r e a s e d g r a d u a l l y
a n d b e c a m e a b o u t 4 - 7 t i m e s h i g h e r t h a n the b l a n k - i m p l a n t e d c o n t r o l s ( F i g u r e 5 ) . In m a l e
e e l s , o n d a y 6 0 , 15 d a y s f o l l o w i n g t h e fourth i m p l a n t a t i o n of M T or A D S D , p i t u i t a r y G t H
c o n t e n t w a s elevated significantly, about 6-8 times higher than the blank-implanted
c o n t r o l s (Figure 6). T h e s e results indicated that a positive sex-steroid feedback was active
o n G t H s y n t h e s i s in t h e p i t u i t a r y of t h e silver e e l .
I
5000
HTl
I Controls
M
T
implantation
ADSD
implantation
4000
OR,
6
c
3000
(-1
2000
1000
A.
7
Times of
implantation
Figure 5
Effects o f t h e fifth ( o n d a y 75), seventh ( o n day 105) a n d e i g h t h ( o n d a y 120)
( i m p l a n t a t i o n e v e r y 1 5 d a y s ) o f M T or A D S D , o r b l a n k s i l a s t i c p e l l e t ( c o n t r o l s ) o n
G t H c o n t e n t s in pituitary of f e m a l e silver eel. Data are r e p r e s e n t e d in m e a n ± SE.
N u m b e r o f f i s h i n e a c h g r o u p = 6. A f t e r t h e e i g h t h i m p l a n t a t i o n , M T i m p l a n t e d
f i s h : G S I = 41.38 ± 2.71 % ; A D S D i m p l a n t e d f i s h : GSI = 43.97 ± 3.15 % ;
c o n t r o l s : G S I = 1.37 ± 0 . 2 5 % . ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l s ( p < 0 . 0 5 ) ,
" v e r y significantly higher than the controls (p<0.01).
Figure 5
E f f e t s d e la 5
e
i m p l a n t a t i o n ( a u j o u r 7 5 ) , d e la 7
e
e
( a u j o u r 1 0 5 ) e t d e la 8 ( a u
j o u r 1 2 0 ) ( i m p l a n t a t i o n t o u s l e s 15 j o u r s ) d e M T o u d ' A D S D o u d e s i l a s t i q u e s e u l
( c o n t r ô l e s ) s u r le c o n t e n u h y p o p h y s a i r e e n g o n a d o t r o p i n e (GtH) chez l'anguille
femelle argentée. Les d o n n é e s représentent les m o y e n n e s ± erreur s t a n d a r d
( n = 6 p o i s s o n s / g r o u p e ) . A p r è s la 8 i m p l a n t a t i o n , p o i s s o n s i m p l a n t é s a v e c M T :
R G S = 41,38 ± 2,71 % ; p o i s s o n s i m p l a n t é s a v e c A D S D : R G S = 43,97 ± 3,15 % ;
c o n t r ô l e s : R G S = 1,37 ± 0 , 2 5 % . ' S i g n i f i c a t i v e m e n t p l u s é l e v é q u e l e s c o n t r ô l e s
(p<0,05) ; " t r è s s i g n i f i c a t i v e m e n t plus élevé q u e les c o n t r ô l e s (p<0,01).
e
Bull. Fr. Pêche Piscic.
(1998)
349:163-176
— 171
800700600"
e
500.
C
400300 •
s-
200 .
100 0 -
Controls
MT
implantation
ADSD
implantation
Figure 6
Effects of t h e f o u r t h ( o n d a y 60) i m p l a n t a t i o n every 15 d a y s o f M T or A D S D , o r
blank silastic pellet ( c o n t r o l s ) o n G t H c o n t e n t s in pituitary of male silver eel.
D a t a a r e r e p r e s e n t e d i n m e a n ± S E . N u m b e r o f f i s h i n e a c h g r o u p = 5. A f t e r t h e
f o u r t h i m p l a n t a t i o n , M T i m p l a n t e d f i s h : GSI = 2.54 ± 0.43 % ; A D S D i m p l a n t e d
f i s h : G S I = 2.81 ± 0.38 % ; c o n t r o l s : G S I = 0.25 ± 0.03 %. ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r
than the controls (p<0.05).
Figure 6
E f f e t d e la 4 i m p l a n t a t i o n ( a u j o u r 6 0 ) ( i m p l a n t a t i o n t o u s l e s 1 5 j o u r s ) d e M T
o u d ' A D S D o u d e s i l a s t i q u e s e u l ( c o n t r ô l e s ) s u r le c o n t e n u e n G t H h y p o p h y s a i r e
au b o u t d e 60 j o u r s (4 i m p l a n t s ) c h e z l ' a n g u i l l e m â l e a r g e n t é e . L e s d o n n é e s
r e p r é s e n t e n t l e s m o y e n n e s ± e r r e u r s t a n d a r d ( n = 5 p o i s s o n s / g r o u p e ) . A p r è s la
4 i m p l a n t a t i o n , p o i s s o n s i m p l a n t é s a v e c M T : R G S = 2,54 ± 0,43 % ; p o i s s o n s
i m p l a n t é s a v e c A D S D : R G S = 2,81 ± 0,38 % ; c o n t r ô l e s : R G S = 0,25 ± 0,03 %.
'Significativement p l u s élevé q u e les contrôles (p<0,05).
e
e
In f e m a l e e e l s , o n d a y 1 0 5 , d u r i n g 15 d a y s f o l l o w i n g t h e s e v e n t h i m p l a n t a t i o n o f M T
o r A D S D , s e r u m G t H l e v e l s i n c r e a s e d s i g n i f i c a n t l y , b e c o m i n g a b o u t 1-2 t i m e s h i g h e r than
t h e b l a n k - i m p l a n t e d c o n t r o l s . In m a l e e e l s , o n d a y 6 0 , 15 d a y s f o l l o w i n g t h e f o u r t h
i m p l a n t a t i o n of M T o r A D S D , s e r u m G t H l e v e l s w e r e a l s o i n c r e a s e d t o a s i g n i f i c a n t l y
h i g h e r level t h a n t h e c o n t r o l s ( F i g u r e 7 ) . T h e k i n e t i c e f f e c t s of A D S D i m p l a n t a t i o n o n
s e r u m G t H l e v e l s in f e m a l e s i l v e r e e l a r e s h o w n in F i g u r e 8. O n d a y 9 1 , 1 d a y a f t e r the
i m p l a n t a t i o n of A D S D , s e r u m G t H l e v e l s w e r e e l e v a t e d s i g n i f i c a n t l y a n d b e c a m e h i g h e r
t h a n t h e c o n t r o l s ; s e r u m G t H l e v e l s w e r e s u s t a i n a b l y i n c r e a s e d o n d a y 9 2 till d a y 9 7 , then
d e c r e a s e d moderately ; however, on day 104, 14 days after the seventh implantation,
s e r u m G t H levels w e r e still h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l s . T h e s e r e s u l t s d e m o n s t r a t e d that
s e r u m G t H levels w e r e s i g n i f i c a n t l y a n d s u s t a i n a b l y i n c r e a s e d f o l l o w i n g t h e M T o r A D S D
i m p l a n t a t i o n s in o r d e r t o r e s u l t in t h e s t i m u l a t i o n of g o n a d a l d e v e l o p m e n t a n d m a t u r a t i o n .
Bull. Fr Pêche
Piscic.
0998)
349:163-176
— 172 —
8
Control s
MT
C
implantation
ADSD
implantation
O
C/5
0
Mal e
F ema1e
Figure 7
E f f e c t s o f s e v e n t h ( o n d a y 105) i m p l a n t a t i o n e v e r y 15 d a y s o f M T o r A D S D o n
s e r u m G t H l e v e l s o f f e m a l e s i l v e r eel, a n d f o u r t h ( o n d a y 6 0 ) i m p l a n t a t i o n e v e r y
15 d a y s o f M T o r A D S D o n s e r u m G t H levels o f m a l e silver e e l . Data a r e
r e p r e s e n t e d i n m e a n ± S E . N u m b e r of f i s h i n e a c h g r o u p = 8. A f t e r t h e s e v e n t h
i m p l a n t a t i o n , M T i m p l a n t e d f e m a l e fish : GSI = 3 3 . 1 5 ± 3.51 % ; A D S D i m p l a n t e d
f e m a l e f i s h : G S I = 3 5 . 2 7 ± 6 . 4 7 % ; f e m a l e c o n t r o l s : G S I = 1.65 ± 0.21 % . A f t e r
t h e f o u r t h i m p l a n t a t i o n , M T i m p l a n t e d male f i s h : G S I = 2.08 ± 0.32 % ; A D S D
i m p l a n t e d m a l e f i s h : G S I = 2 . 2 2 ± 0.42 % ; m a l e c o n t r o l s : G S I = 0.24 ± 0.04 % .
' S i g n i f i c a n t l y higher t h a n c o n t r o l s (p<0.05) ; **very significantly higher t h a n
c o n t r o l s (p<0.01).
Figure 7
E f f e t s d e l ' a d m i n i s t r a t i o n t o u s l e s 15 j o u r s d ' i m p l a n t s d e M T o u d ' A D S D s u r l e s
t a u x d e G t H s é r i q u e a u b o u t d e 105 j o u r s ( 7 i m p l a n t s ) c h e z l ' a n g u i l l e f e m e l l e
a r g e n t é e , et a u b o u t d e 6 0 j o u r s (4 i m p l a n t s ) c h e z l ' a n g u i l l e m â l e a r g e n t é e . L e s
d o n n é e s représentent les moyennes ± erreur standard (n = 8 p o i s s o n s / groupe).
A p r è s la 7 i m p l a n t a t i o n , f e m e l l e s i m p l a n t é e s a v e c M T : R G S = 33,15 ± 3,51 % ;
f e m e l l e s i m p l a n t é e s avec A D S D : R G S = 35,27 ± 6,47 % ; femelles c o n t r ô l e s :
R G S = 1,65 ± 0,21 % . A p r è s la 4 i m p l a n t a t i o n , m â l e s i m p l a n t é s a v e c M T :
R G S = 2,08 ± 0,32 % ; m â l e s i m p l a n t é s avec A D S D : R G S = 2,22 ± 0,42 % ; m â l e s
c o n t r ô l e s : R G S = 0,24 ± 0,04 %. ' S i g n i f i c a t i v e m e n t p l u s élevé q u e les c o n t r ô l e s
(p<0,05) ; " t r è s s i g n i f i c a t i v e m e n t plus élevé q u e l e s c o n t r ô l e s (p<0,01).
e
e
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
10
•
9
349 :163-176
— 173
Controls
I ADSD
implantation
8
c
(1998)
5
CJ3
3
^
3
I
'A
I
_4
2
Days a f t e r
3
the 7th
5
7
14
21
implantation
Figure 8
T h e k i n e t i c e f f e c t s o f t h e s e v e n t h ( o n d a y 105) i m p l a n t a t i o n o f A D S D o n s e r u m
GtH levels of female silver eel. Data are r e p r e s e n t e d in mean ± SE. Number of
f i s h i n e a c h g r o u p = 6. A f t e r t h e s e v e n t h i m p l a n t a t i o n , A D S D i m p l a n t e d f i s h :
G S I = 34.51 ± 4.82 % ; c o n t r o l s : GSI = 2.26 ± 0.33 % . ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r than
controls (p<0.05) ; " v e r y significantly higher than c o n t r o l s (p<0.01).
Figure 8
C i n é t i q u e d e l ' e f f e t d e la 7' i m p l a n t a t i o n ( a u j o u r 1 0 5 ) d ' A D S D s u r l e s t a u x d e
GtH sérique chez l'anguille femelle argentée. Les d o n n é e s représentent les
m o y e n n e s ± e r r e u r s t a n d a r d ( n = 6 p o i s s o n s / g r o u p e ) . A p r è s la 7
i m p l a n t a t i o n , p o i s s o n s i m p l a n t é s avec A D S D : R G S = 34,51 ± 4,82 % ; c o n t r ô l e s :
R G S = 2,26 ± 0,33 %. ' S i g n i f i c a t i v e m e n t p l u s é l e v é q u e les c o n t r ô l e s (p<0,05) ;
**très s i g n i f i c a t i v e m e n t plus élevé q u e les c o n t r ô l e s (p<0,01).
e
3.
Effects
of MT or ADSD
implantation
on serum
E and T
2
concentrations
T h e s t e r o i d a l r e s p o n s e s to M T or A D S D i m p l a n t a t i o n s in f e m a l e a n d m a l e s i l v e r e e l
d u r i n g g o n a d a l d e v e l o p m e n t a n d m a t u r a t i o n a r e s h o w n in F i g u r e s 9 a n d 10. In f e m a l e s ,
i m p l a n t a t i o n s of M T o r A D S D b o t h s t i m u l a t e d a s i g n i f i c a n t i n c r e a s e in s e r u m E levels o n
d a y 1 0 5 , 15 d a y s a f t e r t h e s e v e n t h t r e a t m e n t ; t h e s e r u m E l e v e l s of M T i m p l a n t e d eels
w e r e l o w e r t h a n in f i s h t r e a t e d w i t h A D S D . A D S D i m p l a n t a t i o n s a l s o c a u s e d a s i g n i f i c a n t
2
2
Bull. Fr. Pêche
Piscic.
(1998) 349:163-176
— 174
—
i n c r e a s e in s e r u m T l e v e l s o n d a y 1 0 5 , 15 d a y s after t h e s e v e n t h t r e a t m e n t ; h o w e v e r , M T
i m p l a n t a t i o n h a d n o e f f e c t o n s e r u m T level. After the s e v e n t h i m p l a n t a t i o n of M T or
A D S D , t h e o v a r i e s of f e m a l e w e r e w e l l - d e v e l o p e d , G S I = 3 3 . 8 0 - 3 4 . 6 2 % , s e r u m E levels
w e r e m u c h h i g h e r t h a n T l e v e l s , d e m o n s t r a t i n g t h a t e s t r a d i o l p l a y s a n i m p o r t a n t role on
t h e s t i m u l a t i o n of o v a r i a n g r o w t h a n d m a t u r e . In m a l e s , i m p l a n t a t i o n s of M T or A D S D b o t h
a l s o s t i m u l a t e d a s i g n i f i c a n t i n c r e a s e in s e r u m E a n d T levels o n d a y 4 5 , 15 d a y s a f t e r the
t h i r d t r e a t m e n t ; t h e s e r u m T l e v e l s of the i m p l a n t e d fish w e r e i n c r e a s e d s i g n i f i c a n t l y ,
a b o u t 1 7 - 4 0 t i m e s h i g h e r t h a n in c o n t r o l s , w h e r e a s s e r u m E levels of t h e t r e a t e d e e l s w e r e
e l e v a t e d m o d e r a t e l y , o n l y 1.6-3.5 t i m e s h i g h e r t h a n in c o n t r o l s . T h i s h i g h s e r u m T
c o n c e n t r a t i o n f o l l o w i n g t h e t h i r d i m p l a n t a t i o n w a s c o n s i s t e n t w i t h t h e s t i m u l a t o r y effects of
t e s t o s t e r o n e o n t h e d e v e l o p m e n t a n d m a t u r a t i o n of testis in t h e m a l e silver e e l .
2
2
2
Controls
MT i m p l a n t a t i o n
\DSD
implantation
.S
M
&.
o
c
C M
3
[ U
B
3
f-
H
•a"
<D
C O
Figure 9
Effects of t h e s e v e n t h ( o n d a y 105) i m p l a n t a t i o n of MT or A D S D o n s e r u m E a n d
T l e v e l s o f f e m a l e s i l v e r e e l . D a t a are r e p r e s e n t e d i n m e a n ± S E . N u m b e r o f f i s h
in e a c h g r o u p = 8. A f t e r t h e s e v e n t h i m p l a n t a t i o n , M T i m p l a n t e d f i s h ,
G S I = 33.80 ± 4.23 % ; A D S D i m p l a n t e d f i s h : GSI = 34.62 ± 3.05 % ; c o n t r o l s :
G S I = 1.68 ± 0 . 2 6 % . ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n c o n t r o l s ( p < 0 . 0 5 ) ; " v e r y
s i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n c o n t r o l s (p<0.01).
2
Figure 9
E f f e t s d e la 7 i m p l a n t a t i o n ( a u j o u r 1 0 5 ) d e M T o u d ' A D S D s u r l e s t a u x
d ' e s t r a d i o l ( E ) e t d e t e s t o s t e r o n e (T) s é r i q u e s c h e z l ' a n g u i l l e f e m e l l e a r g e n t é e .
Les d o n n é e s représentent les moyennes + erreur standard (n = 8 p o i s s o n s /
groupe).
Après
la 7
implantation, poissons
implantés
avec
MT
:
R G S = 33,80 ± 4,23 % ; p o i s s o n s i m p l a n t é s avec A D S D : R G S = 34,62 ± 3,05 % ;
c o n t r ô l e s : R G S = 1,68 ± 0 , 2 6 % . ' S i g n i f i c a t i v e m e n t p l u s é l e v é q u e l e s c o n t r ô l e s
(p<0,05) ; " t r è s s i g n i f i c a t i v e m e n t plus élevé q u e les c o n t r ô l e s (p<0,01).
e
2
e
Bull. Fr. PêchePiscic.
(1998)249:163-176
— 175 —
Controls
MT i m p l a n t a t i o n
ADSD i m p l a n t a t i o n
9 ^
OC
&I
E—
m
o
c
6
3
U
4)
CO
3
tn
i j
i—•
F i g u r e 10
E f f e c t s o f t h e t h i r d ( o n d a y 45) i m p l a n t a t i o n o f M T or A D S D o n s e r u m E and T
levels of m a l e s i l v e r eel. Data are r e p r e s e n t e d in m e a n ± SE. N u m b e r of fish i n
each
g r o u p = 5. A f t e r t h e t h i r d i m p l a n t a t i o n , M T i m p l a n t e d
fish
G S I = 1.52 ± 0 . 1 9 % ; A D S D i m p l a n t e d f i s h : G S I = 1.62 ± 0 . 3 5 % ; c o n t r o l s :
G S I = 0.32 ± 0.05 % . ' S i g n i f i c a n t l y h i g h e r t h a n c o n t r o l s (p<0.05) ; " v e r y
significantly higher than controls (p<0.01).
2
F i g u r e 10
E f f e t s d e la 3 i m p l a n t a t i o n ( a u j o u r 45) d e M T o u d ' A D S D s u r l e s t a u x
s é r i q u e s d e E et de T chez l'anguille m â l e argentée. Les d o n n é e s représentent
les m o y e n n e s ± e r r e u r s t a n d a r d ( n = 5 p o i s s o n s / g r o u p e ) . A p r è s la
3 i m p l a n t a t i o n , p o i s s o n s i m p l a n t é s a v e c M T : R G S = 1,52 ± 0 , 1 9 % ; p o i s s o n s
i m p l a n t é s a v e c A D S D : R G S = 1,62 ± 0 , 3 5 % ; c o n t r ô l e s : R G S = 0 , 3 2 ± 0 , 0 5 % .
' S i g n i f i c a t i v e m e n t plus élevé q u e les c o n t r ô l e s (p<0,05) ; " t r è s significativement
p l u s élevé q u e les c o n t r ô l e s (p<0,01).
e
2
e
In s u m m a r y , t h e p r e s e n t s t u d i e s p r o v i d e f u r t h e r e v i d e n c e s t h a t s e r i a l i m p l a n t a t i o n of
s t e r o i d s ( M T o r A D S D ) p e l l e t s a l o n e c a n s t i m u l a t e t h e b r a i n - p i t u i t a r y - g o n a d a x i s of the
J a p a n e s e silver e e l , t o p r o m o t e G n R H s y n t h e s i s in b r a i n a n d / o r r e l e a s e in p i t u i t a r y ; this
e n d o g e n e o u s G t H is t h e n r e l e a s e d into b l o o d c i r c u l a t i o n a n d s t i m u l a t e s t h e p r o d u c t i o n of
s e x s t e r o i d s in t h e g o n a d s , a n d t h e n r e s u l t s in t h e s t i m u l a t i o n of g o n a d a l d e v e l o p m e n t a n d
maturation.
Bull. Fr. Pêche
PISCIC
(19981349
:163-176
— 176
IV. I n d u c e d o v u l a t i o n a n d s p a w n i n g o f t h e m a t u r e d s i l v e r e e l
In t h e m a t u r e d f e m a l e e e l s w i t h o o c y t e s at t h e m i g r a t o r y n u c l e u s s t a g e
( G S I = 4 8 - 5 2 % ) after 8 i n j e c t i o n s of C P E ( e v e r y 10 d a y s ) , or, 8 i m p l a n t a t i o n s of M T or
A D S D ( e v e r y 15 d a y s ) , o v u l a t i o n a n d s p a w n i n g c a n b e i n d u c e d 1 8 - 2 2 h o u r s (in A p r i l - M a y .
2 2 - 2 5 ° C ) f o l l o w i n g a n i n j e c t i o n of C P E ( 5 - 6 p i t u i t a r y / fish) a l o n e or in c o m b i n a t i o n w i t h
L H R H - A ( 5 0 u g / kg b o d y w e i g h t ) p l u s D O M ( 1 0 m g / k g b o d y w e i g h t ) . T h e m a t u r e d m a l e
e e l s w e r e i n j e c t e d w i t h H C G ( 2 0 0 - 4 0 0 I.U. / f i s h ) in o r d e r t o i n c r e a s e milt v o l u m e . 19 of 3 5
f e m a l e s o v u l a t e d in t h e e x p e r i m e n t s in 1 9 9 6 a n d 2 2 of 4 0 f e m a l e s o v u l a t e d in t h e
e x p e r i m e n t s in 1 9 9 7 , t h e r a t e s of o v u l a t i o n w e r e 5 4 . 3 % a n d 5 5 . 0 %, respectively. A m o n g
t h e o v u l a t e d f e m a l e e e l s , e l e v e n s p a w n e d s p o n t a n e o u s l y at d a w n in t h e c o n c r e t e t a n k
( 2 X 3 m , w i t h 1.5 m d e p t h ) a b o u t 18 h o u r s f o l l o w i n g h o r m o n a l t r e a t m e n t s a n d m a t e d w i t h
m a t u r e d m a l e e e l s . In m o s t c a s e s , artificial fertilization w e r e d o n e i m m e d i a t e l y after
o v u l a t i o n by using d r y m e t h o d .
ACKNOWLEDGEMENTS
T h i s w o r k w a s s u p p o r t e d by g r a n t s f r o m N a t i o n a l N a t u r a l S c i e n c e s F o u n d a t i o n of
C h i n a a n d I n t e r n a t i o n a l D e v e l o p m e n t R e s e a r c h C e n t e r of C a n a d a .
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Comp.
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6
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9
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anguilla).
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