ndoutamia bat - Revue de Médecine Vétérinaire

ARTICLE ORIGINAL
Influence de la Trypanosomose à T. congolense
sur les paramètres hématologiques, minéraux
et protéo-énergétiques chez les chèvres
sahéliennes du Tchad
G. NDOUTAMIA, R.N. MBAKASSE, A. BRAHIM et A. KHADIDJA
Laboratoire de Recherches Vétérinaires et Zootechniques de Farcha, B.P. 433, Ndjaména, Tchad
Tél. 527475/6 Fax 527476, E-mail LRVZ <[email protected]>
RÉSUMÉ
SUMMARY
Quarante chèvres sahéliennes du Tchad dont les types d’hémoglobines
ont été préalablement établis ont été infectés avec 106 trypanosomes de
souche T. congolense IL1180, de type savane. Les paramètres cliniques
ainsi que la parasitémie, la croissance pondérale, les paramètres hématologiques et biochimiques ont été examinés en vue d’évaluer l’influence de la
maladie chez cette race caprine. Les chèvres sahéliennes se sont montrées
très sensibles et ont manifesté des symptômes cliniques aigus mortels en 4
semaines. La période prépatente est d’environ 7 jours. Les chèvres ont eu,
au fort de la crise, de l’inappétence, une muqueuse oculaire pâle, un larmoiement, une démarche chancelante et quelquefois de la diarrhée.
L’hématocrite diminue de 38,68 % à 25,72 %. Le taux de 15 % semble être
le seuil critique de l’hématocrite. Les animaux qui avaient atteint ce seuil
etaient incapables de se relever et succombaient si un traitement trypanocide n’etait pas appliqué. L’évolution de l’infection à des degrés différents
s’accompagne d’une diminution considérable des globules rouges, de l’hémoglobine, de l’albumine, du cholestérol et de la glycémie et d’une augmentation des globules blancs, de fer sérique, de calcium, des bilirubines et
de l’urée. Les enzymes les plus affectées semblent être les transaminases
dont les activités ont varié du simple au double.
Influence of Trypanosoma congolense infection on some haematological
and serum biochemical parameters in sahelian goats. By G. NDOUTAMIA, R.N. MBAKASSE, A. BRAHIM and A. KHADIDJA.
MOTS-CLÉS : Trypanomosome - paramètres hématologiques - chèvres -- Tchad.
KEY-WORDS : Trypanosomiasis - haematological parameters - goats - Tchad.
Revue Méd. Vét., 2002, 153, 6, 395-400
Forty (40) sahelian goats whose haemoglobin types had been determined,
were experimentally infected, each one with 106 trypanosomes (Trypanosome congolense IL 1180 stock savanna type). Clinical signs, body
weight, haematological and serum biochemical parameters were recorded
over 6 months. The sahelian goats were highly susceptible to the infection.
They developed an acute disease which is lethal within 4 weeks. The prepatent period was approximately 7 days. During the acute phase of the
disease, the animals displayed lack of appetite, pale ocular membranes,
watering eyes, staggering movements and occasional diarrhea.
The haematocrit droped from 38.68 % to 25.72 % and often reached the
critical point of 15 %. At that threshold the animals were unable to stand
up and died unless a trypanocide treatment was applied. The T.congolense
trypanosomiasis evolution was associated at different levels with significant
changes in haematological and serum biochemical parameters. The disease
was mainly characterised by the decrease of the red blood cells, haemoglobin, albumin, cholesterol, glycemia and the raise of the white blood cells,
serum iron, calcium, bilirubines and urea. The most vulnerable enzymes
were the transaminases whose activity varied considerably during all the
experimental period.
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NDOUTAMIA (G.) ET COLLABORATEURS
Introduction
EXAMEN PARASITOLOGIQUE
Au Tchad, les informations relatives à la trypanosomose
bovine sont relativement assez abondantes [7].
La parasitémie est estimée par examen microscopique de
l’interphase des cellules sanguines et du plasma après centrifugation différentielle en tubes capillaires [11].
L’épidémiologie de la maladie chez les petits ruminants est
probablement similaire mais très mal documentée. Il a été
prouvé que des pertes énormes peuvent être enregistrées
parmi les moutons et les chèvres infectés [9, 3]. La connaissance du statut de la maladie chez les petits ruminants pourrait permettre d’orienter les stratégies de lutte. Cette investigation a pour objectif d’évaluer les changements tant hématologiques que biochimiques qui s’opèrent lors d’une infection expériementale à T. congolense chez les chèvres sahéliennes du Tchad.
Matériel et méthodes
Quarante chèvres sahéliennes, âgées de 1 à 2 ans, ont été
achetées aux alentours de Guelendeng et Dourbali. Ces deux
localités correspondent soit au berceau, soit à la zone d’extension de ces races caprines.
Trente cinq (35) animaux ont été retenus sur la base du
resultat négatif du test de détection des antigènes circulants
de trypanosome [12]. Un groupe expérimental de 30 animaux
et un groupe témoin de 5 animaux ont été constitués.
TRAITEMENT
Les animaux, à leur arrivée au Laboratoire de Farcha, ont
été traités avec un antibiotique (oxytetracycline), 20 000
I.U/kg, un antiparasitaire interne (fenbendazole) et un trypanocide (acéturate de diminazène) : 7 mg/kg. Une mise en
quarantaine de 1 mois a été observée.
INFECTION
L’infection a été effectuée en inoculant par voie intraveineuse 106 trypanosomes par animal. La souche de T. congolense est un clone dérivé du stock de T. congolense IL1180 de
l’ILRI (Nairobi) de type savane.
SUIVI DES ANIMAUX
Le suivi des animaux a consisté à observer régulièrement
les symptômes et à déterminer les variations du poids, de
l’hématocrite, des constantes hématologiques et biochimiques selon le rythme suivant :
examen clinique
quotidien
parasitémie
quotidien
hématocrite
hebdomadaire
poids
numération globulaire
paramètres biochimiques
hebdomadaire
mensuel
mensuel
MESURE DES POIDS
Les animaux sont pesés à l’aide d’un dynamomètre auquel
ils sont suspendus par l’intermédiaire de sangles passées
entre les membres.
PARAMÈTRES HÉMATOLOGIQUES ET BIOCHIMIQUES
Prélèvements : les prélèvements ont été effectués à la veine
jugulaire avec des venojects dans des tubes sous vide avec
anticoagulant et sans anticoagulant. Le sang recueilli sur
tubes avec anticoagulant permet de faire la numération des
globules rouges et blancs, tandis que celui recueilli sur tube
sec permet d’obtenir du sérum pour les dosages biochimiques.
La numération globulaire a été faite en utilisant des unopettes (Beckton Deckinson and company). La dilution du
sang est faite au 1/200 pour les globules rouges et 1/40 pour
les globules blancs. Les numérations des hématies et des leucocytes ont été effectuées à l’aide de la cellule hématimétrique de Malassez.
La formule leucocytaire a été établie après examen microscopique de l’étalement de sang sur lame colorée au MayGuinwald-Giemsa.
Les analyses biochimiques sont effectuées à l’aide d’un
spectrophotomètre «Spectronic 601» et les réactifs sont de
type Kit Biomérieux
DÉTERMINATION DES TYPES D’HÉMOGLOBINE DES
CHÈVRES PAR ÉLECTROPHORÈSE
Préparation de l’hémolysat
3 ml de sang sont recueillis dans un tube à essais et les globules sédimentés et lavés 3 fois avec du sérum physiologique. Au dernier lavage, le tube contenant la suspension des
globules est centrifugé à 5000 tours/min pendant 5 minutes.
Le surnageant évacué, les globules concentrés au fond du
tube sont dilués 6 fois leur volume avec de l’eau distillée et
lysés ; puis 0,5 ml de toluène par ml d’hémolysat est ajouté,
suivi d’un brassage au mixer pendant 30 secondes. Le
mélange est à nouveau centrifugé pendant 10 min à 5000
tours/min pour faire décanter le déchet stromal. L’hemolysat
est ensuite transvasé dans un tube propre, bouché de façon
étanche et conservé à -20°C jusqu’à l’analyse.
L’électrophorèse de l’hémoglobine est réalisée sur papier
acétate de cellulose Phoroslide (Millipore). Le tampon de
migration est à base de véronal sodique de pH = 8,6 et de
force ionique 0,005. La migration est effectuée à une tension
constante de 100 volts pendant 20 min. La révélation des
bandes qui représentent les différents types d’hémoglobine
est faite en colorant le support en acétate de cellulose avec le
ponceau S. Le support est ensuite rincé 3 fois dans 5 % de
solution d’acide acétique puis séché à température ambiante.
Analyses statistiques
Les comparaisons entre les groupes ont été faites en utilisant l’analyse de variance des écarts entre les moyennes
par le logiciel SPSS, selon le processus préconisé par
ACHUKWI et al [1].
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INFLUENCE DE LA TRYPANOSOMOSE A T. CONGOLENSE SUR LES PARAMÈTRES HÉMATOLOGIQUES
Résultats
OBSERVATIONS CLINIQUES
La pathologie de la trypanosomose des petits ruminants,
bien que très peu précisée, est semblable à celle des autres
espèces animales. Au fort de la crise, les animaux ont de
l’inappétence, présentent une muqueuse oculaire pâle, un larmoiement et ont une démarche chancelante et quelquefois
font de la diarrhée. Dix (10) chèvres sont mortes au cours de
l’expérimentation. Les autopsies ont révélé des pétéchies.
Les Chèvres présentent une baisse régulière de poids
du début jusqu’à la fin de l’expérimentation (21,51 kg à
18,15 kg) ( Fig 1). La période prépatente, est en moyenne de
7 jours.
PARASITÉMIE
La parasitémie évolue en dents de scie. Elle évolue très
rapidement et varie de 20 à 200 trypanosomes par champ.
Les animaux ayant atteint ce taux de parasitémie sont incapables de se relever et subissent un traitement au diminazène
aceturate à la dose de 3,5 mg/kg de poids vif.
HÉMATOCRITE
L’évolution des hématocrites se décompose en une phase
de déclin suivie d’une stabilité relative (fig. 2). Chez les
chèvres Sahéliennes, les hématocrites varient de 39 % à
26 %. Ils sont stables pendant les deux premières semaines,
puis chutent brutalement à partir de la deuxième semaine. Ils
remontent lentement à la 4ème semaine pour se stabiliser
autour de 25 %. Un hématocrite de 15 % est critique pour les
Sahéliens. Les animaux ayant atteint ce taux sont incapables
de se relever et succombent si un traitement au trypanocide
n’intervient pas. Il s’est avéré nécessaire de fractionner la
dose de trypanocide en deux et de les administrer séquentiellement dans un intervalle de 6 à 10 heures, faute de quoi
l’animal meurt.
PARAMÈTRES HÉMATOLOGIQUES
Numérations erythrocytaires et leucocytaires
Chez les chèvres Sahéliennes, le nombre des globules
rouges par µl chute de 6 350 000 à 3 660 000 en fin d’expérimentation (tableau I).
La variation des globules blancs au début et à la fin d’expérimentation n’est pas significative. Il est fort possible
qu’une leucocytose passagère ait pu se produire, surtout
durant la phase aiguë de la maladie. Néanmoins on observe
une redistribution de la formule leucocytaire à la fin de l’expérimentation (tableau I).
Formule leucocytaire
Le tableau I récapitule la formule leucocytaire avant et
après l’infection.
Les taux de neutrophiles et de lymphocytes des chèvres
Sahéliennes semblent stables pendant toute la durée de l’expérimentation. Chez tous les animaux, l’éosinophilie est très
élevée et tend à diminuer pour disparaïtre en fin de d’expérimentation.
Hémoglobine
Le taux d’hémoglobine s’abaisse de 110 g/l à 60 g/l chez
les chèvres Sahéliennes.
FIG. 1. — Variation du poids en fonction du lot chez les Sahéliennes.
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NDOUTAMIA (G.) ET COLLABORATEURS
FIG. 2. — Variation de l’hématocrite en fonction du lot chez les Sahéliennes.
GR : globules rouges ; GB : globules blancs ; PN : polynucléaires neutrophiles ; PB : polynucléaires basophiles ; PE : polynucléaires éosinophiles
L : lymphocytes ; M : monocytes ; Hb : hémoglobine ; X : moyenne.
TABLEAU I. — Paramètres hématologiques avant et après infection.
Bilirubines totales
Les bilirubines varient de 4 à 39 mg/l chez les chèvres
Sahéliennes.
PARAMÈTRES PROTÉO-ÉNERGÉTIQUES
Les paramètres protéo-énergétiques les plus caractéristiques relevés au début et à la fin de l’expérimentation sont
consignés dans le tableau II.
Les protéines totales sériques semblent ne pas être influencées par la trypanosomose chez les chévres sahéliennes. Elles
se stabilisent à 84 g/l. Le taux d’albumine chute de 28 g/l à
22 g/l. La teneur en urée plasmatique également a augmente.
En effet, l’urémie augmente de 0,3 g/l à 0,6 g/l. La glycémie,
par contre, chute de 0,5 g/l à 0,2. Quant au cholesterol, il a
chuté de plus de la moitié de sa valeur initiale. Les lipides et
les triglycérides n’ont pas varié.
PARAMÈTRES MINÉRAUX
La concentration plasmatique du phosphore varie considérablement chez les chèvres Kirdimi et Sahéliennes. Ce para-
mètre varie entre 62 et 112 mg/l. L’infection n’a pas d’effet
sur la teneur plasmatique du calcium et du magnésium chez
les sahéliennes. Les taux du calcium et du magnésium varient
entre 27 et 34 mg/l.
Le fer sérique augmente de 1,6 mg/l à 3,4 mg/l.
RÉPARTITION DES TYPES D’HÉMOGLOBINE
Huit animaux sont de type A, 17 de type B et 3 de type AB.
ACTIVITÉ DES ENZYMES
L’activité de 5’ nucléotidase semble stable chez les chèvres
Sahéliennes. Elle varie de 3 à 4 U/l.
L’activité de la lactate deshydrogénase chute de 495 à
90 U/l. Chez les chèvres Sahéliennes, les transaminases ont
augmenté de façon très significative. La transaminase glutamique oxalo-acétique (TGO) a augmenté de 56 à 114 et la
transaminase glutamo-pyruvique de 0,6 à 25 U/l.
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INFLUENCE DE LA TRYPANOSOMOSE A T. CONGOLENSE SUR LES PARAMÈTRES HÉMATOLOGIQUES
Discussion
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congolense ait induit une sécrétion accrue de l’adrénaline,
connu pour son effet suppresseur de l’éosinophilie [20].
La présente investigation permet de constater que des
changements physiologiques profonds s’opèrent au niveau
de l’organisme lors de l’infection à T. congolense. Ces bouleversements sont reflétés à des degrés différents par l’anémie,
la parasitémie, la croissance pondérale et les paramètres
hématologiques et biochimiques. En effet les chèvres sahéliennes ont une période prépatente relativement plus courte,
et développent une anémie très perceptible. Elles contrôlent
difficilement la parasitémie.
PALING and DWINGER [14] suggèrent même que les
valeurs de l’hématocrite peuvent servir de critère unique pour
apprécier la résistance des animaux à la trypanosomose.
L’hématocrite s’abaisse brusquement pour se stabiliser à des
valeurs basses à partir de la 4ème semaine. Ces observations
concordent avec des résultats obtenus sur d’autres espèces
[18, 17, 16, 6] qui indiquent que l’hématocrite décroît à l’apparition de la parasitémie. Il fluctue au cours de la maladie,
avec même une tendance au rétablissement des valeurs normales chez les individus plus résistants.
L’infection à T. congolense a provoqué une chute significative du taux de l’hémoglobine, des érythrocytes et une augmentation du fer plasmatique et des bilirubines totales chez
les Sahéliennes. En effet, la trypanosomose à T. congolense
est une infection anémiante associée à une hémolyse intravasculaire [5]. La baisse des érythrocytes et de l’hémoglobine serait la conséquence d’une destruction massive des globules rouges avec une augmentation concomitante des produits de métabolisme de l’hémoglobine, en l’occurrence les
bilirubines. L’augmentation du fer plasmatique due à l’infection à T. brucei et à T. congolense a été déjà observée par
OGUNSANMI et al., [13]. Cette augmentation pourrait être
attribuée à une défaillance dans la mobilisation du fer, due à
un dysfonctionnement de la moelle osseuse [19] et de l’hématopoièse.
Les changements intervenus dans les formules leucocytaires peuvent être considérés comme des réactions normales
de défense des animaux. En effet, l’augmentation des lymphocytes peut être associée à une hausse des globulines et
particulièrement des IgM et, dans une moindre mesure, des
IgG [5]. Quant à la diminution des éosinophiles, elle est couramment rapportée lors des infections à Trypanosoma [2]. Il
est fort possible que le stress provoqué par l’infection à T.
Les animaux infectés, développent une hypoalbuminémie
et une hypoglycémie. Les variations des protéines plasmatiques ne sont pas significatives. Ces résultats ont été déjà
rapportés lors d’une trypanosomose expérimentale ovine [9,
13].
Il semble que les parasites, plus particulièrement les trypanosomes qui envahissent le sang, accroissent les besoins de
l’animal en protéines et en glucose, car ces substances constituent le principal support utilisé dans le métabolisme des
parasites [10]. C’est ce qui expliquerait la chute du taux d’albumine et de glucose chez les sahéliennes. L’augmentation
de l’urée sanguin observée chez les chèvres Saheliennes,
dans cette expérimentation concorde avec les résultats de
OGUNSANMI et al., [13] pour les infections à T. brucei.
Cette augmentation considérable de l’urée sanguin est probablement due au dysfonctionnement [13] et à la rupture de
l’équilibre physiologique des reins, sous la préssion de l’infection à Trypanosoma congolense.
Les variations du phosphore, du calcium et du magnésium
ne concordent pas avec les résultats de OGUNSANMI et al.,
[13] qui observent pour les ovins infectés avec T. brucei, une
augmentation du calcium et une baisse de phosphore. Il est
possible que les différentes espèces de trypanosomes et
d’animaux utilisés dans les expérimentations soient à l’origine de la divergence des résultats [8].
Les activités des transaminases en l’occurrence la TGO et
la TGP ont augmenté pendant toute la durée de l’infection
chez les chèvres Sahéliennes. Les transaminases sont les
enzymes qui ont une localisation spécifique dans des
organes, notamment le foie. La hausse de leur activité dans le
sérum pouvait témoigner d’une atteinte du tissu hépatique.
La détermination de la nature de l’hémoglobine des
Sahéliennes utilisées dans cette expérience, fait ressortir que
l’hémoglobine A n’est pas très caractéristique de ces animaux. Au contraire, la proportion de l’hémoglobine B est
relativement élevée. Le Ndama, taurin reconnu trypanotolérant [4], possède 100 % d’hémoglobine A et ce type d’hémoglobine serait associé à cette trypanotolérance [16]. Ce qui
n’est pas le cas chez les chèvres sahéliennes et pourrait expliquer en partie la grande sensibilité de ces chévres.
TABLEAU II. — Paramètres biochimiques caractéristiques avant et après infection.
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Conclusion
Notre étude a montré que l’infection à T. congolense chez
les chèvres sahéliennes induit une maladie aiguë, mortelle,
caractérisée par des changements profonds tant hématologiques que biochimiques. Il serait important à l’avenir d’évaluer dans quelle mesure ces changements sont spécifiques à
l’infection à Trypanosoma congolense.
Remerciements
Cette étude a été réalisée grâce à l’appui financier du Fonds
d’Aide et de Coopération, dans le cadre du projet d’appui au
secteur de l’élevage du Tchad oriental (ASETO), composante
II (projet/ CD/ 94). L’exécution de ce projet n’aurait pu être
possible sans la collaboration du personnel du Laboratoire de
Recherches Vétérinaires et Zootechniques de Farcha ; qu’il
veuille accepter l’expression de notre profonde gratitude.
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