Devoirs

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Devoirs
labo de Microbiologie 2016
Devoirs
Directives Générales
La première page doit inclure les informations suivantes :
 Le numéro du devoir
 Cote de cours : BIO3526
 Votre nom ou vos noms
 Votre numéro de groupe
 La date
Les devoirs peuvent être faits et remis individuellement ou en groupe de deux (vous et votre
partenaire).
Les devoirs doivent être dactylographiés sauf pour les calculs qui peuvent être faits à la main.
Les tableaux et les graphiques doivent être générés à l'ordinateur, être clairs et concis.
Les tableaux et les graphiques doivent avoir un titre approprié et une légende si appropriée.
Seulement que des copies papier des devoirs seront acceptées. NE PAS envoyer les devoirs
par courriel.
La remise des devoirs doit être faite à l'aide enseignant approprié à la date indiquée AVANT
que vous ne quittiez le labo.
Une pénalité de 10% par jour sera imposée sur les devoirs remis en retard (les weekends
seront comptés comme une journée). Si une raison valide est donnée, telle que des raisons
médicales, une exemption pour la remise de ce devoir sera accordée.
Présentations PowerPoint:
Utiliser le gabarit noir et blanc suivant pour vos présentations PPT.
Les photos doivent être en couleur.
Sauvegarder comme un fichier PDF avec une diapositive par page.
Soumettre par courriel à l'adresse suivante : [email protected]
Le sujet du message doit indiquer : Devoir (Numéro)
Ne pas utiliser cette adresse pour d'autres messages. Ceux-ci ne seront ni lus ni
répondus.
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Rubrique de correction pour les tableaux
(Chaque cellule vaut 0.25 point)
Présentation
Tableau 1
Tableau 2
Tableau 3
Tableau 4

Légende, entêtes des colonnes, et des
rangées sont présents
 Données appropriées sont incluses
 Tableau généré à l’ordinateur
 Les espaces et/ou les lignes sont utilisés
judicieusement pour regrouper les données ou
séparer les composantes du tableau
 Lecture du tableau (indépendant, texte non
redondant, clair et simple)
Légende
 Débute avec le numéro du graphique
 La première phrase est un titre spécifique et
complet
 Tous les symboles et les abréviations non
standards sont expliqués dans la légende
Totaux
Notes converties d’après les points attribués
sur les devoirs respectifs
/2.0
/2.0
/2.0
/2.0
Rubrique de correction pour les graphiques
(Chaque cellule vaut 0.25 point)
Présentation

Fig 1
Fig 2
Fig 3
Le bon type de graphique



Les variables appropriées sont présentées
Le graphique est fait à l’aide d’ordinateur
Mise en page appropriée – le graphique remplit 1/2 à 2/3 de la page
et fait à l’échelle afin d’utiliser l’espace disponible
 La légende occupe le tiers de la page qui reste sous le graphique
Données
 Les unités des axes et les échelles (l’intervalle pour l’abscisse et
pour l’ordonnée englobe l’étendue des données)
 Identification des axes (appropriée pour les variables choisies)
 Type d’ajustement de la courbe (meilleure tendance est illustrée)
Légende
 Débute avec le numéro du graphique
 La première phrase est un titre spécifique et complet
Totaux
Notes converties d’après les points attribués sur les devoirs respectifs
/2.5
/2.5
/2.5
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Rubrique de correction pour les images microscopiques
(Chaque cellule vaut 0.25 point)
Présentation
 Le format exigé est respecté et le bon nombre d’images
est fourni
 Une diapo avec le titre est incluse et contient toute
l’information requise
Données: Qualité des images
 Images claires (In focus)
 Bon frottis uniforme
 Coloration uniforme (couleur)
 Bonne coloration (couleur)
Légende
 Débute avec le numéro de la figure
 Fournis un titre spécifique et complet
 Type de coloration et le colorant utilise si approprié
 Forme cellulaire
 Agrégation
 Grossissement
Totaux
Notes converties d’après les points attribués sur les devoirs
respectifs
/3.0
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Devoir 1
Partie 1: Problèmes. Résoudre les problèmes suivants. Vous n'avez pas à montrer vos calculs.
Soumettre seulement vos réponses finales. Indiquer vos réponses à deux chiffres après la
virgule. Notez : NE PAS arrondir les résultats de vos calculs jusqu’à la réponse finale. (3
points/question)
1. Quelle est la molarité d'une solution de chlorure d'ammonium préparé en diluant 155.0 mL
d'une solution de 2.15 M NH4Cl à 2.5 L?
2. Un étudiant prend un échantillon d'une solution de 3.1 M KOH et le dilue en ajoutant
100.0 mL d'eau. Ensuite, l’étudiant dilue cette solution 3X et détermine que la concentration
de la solution finale est 0.16 M KOH. Quel était le volume original de l'échantillon?
3. Un microbiologiste désire préparer une solution stock de H2SO4 pour que des échantillons
de 20.0 mL génèrent des solutions de 0.50 M quand ils sont ajoutés à 100.0 mL d'eau.
Quelle devrait être la molarité de la solution stock?
4. Quel volume d'eau devrait être ajouté à 2.5 mL d'une solution d'acide acétique de 8.0 M
afin d'obtenir une concentration finale de 3.0 M d'acide acétique?
5. Trois solutions "A"', "B" et "C" sont mélangés pour obtenir le rapport suivant : A:B:C =
1:2:10. Quels sont les facteurs de dilutions pour chacun des composés?
6. Un microbiologiste possède trois cultures microbiennes: E. coli à une densité de 2 X 108
cellules/mL, B. subtilis à une densité de 2 X 109 cellules/mL, et P. notatum à une densité de
1 x 109 cellules/mL. De celles-ci, il désire préparer un seul mélange contenant 5 X 106
cellules/mL d'E. coli, 1.25 x 108 cellules/mL de B. subtilis, et 1 X 107 cellules/mL de P.
notatum dans un volume final de 10 mL de milieu de culture. Quel volume du milieu de
culture et de chacune des cultures d'origine devrait être utilisé pour atteindre cet objectif?
7. Le microbiologiste mentionné dans la question précédente réalise qu'il n'a que 5 mL de
milieu de croissance. Étant donné cette information, quel est le volume maximal du
mélange microbien décrit précédemment qui peut être préparé?
8. 3 parties d'eau sont ajoutées à 2 parties d'une solution de 2.5 M FeSO4 et une partie d’une
solution de 1.0M FeSO4. Quelle est la molarité de la solution diluée?
9. Un microbiologiste prépare 150 mL d'une solution de 3.5 M K2Cr2O7 dans de l'eau. Une
semaine plus tard, 30 mL de l'eau se sont évaporés. Combien d’eau est-ce que le
microbiologiste doit-il ajouter à la solution évaporée afin d’obtenir une molarité finale de
0.5M K2Cr2O7?
10. Un test chimique a permis de déterminer que 100 mL d'une solution d'une substance
inconnue est à une concentration de 5.0 M. La solution est évaporée en totalité laissant
45 g de cristaux du soluté inconnu. Quelle est la masse molaire de la substance inconnue?
11. Combien de millilitres d'une solution de chloramphénicol à 50 mg/mL sont nécessaires pour
une dose de 400 µg?
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12. Un pharmacien vous remet une bouteille de 1.0 L d'une solution de NaCl à 5% (m/v) et
vous demande de la mélanger avec de l'eau stérile pour faire autant d'une solution de 0.2
M que possible. Quelle quantité d'eau stérile utiliseriez-vous? (MM de NaCl 58g/mole)
13. Les dilutions suivantes ont été réalisées pour déterminer la concentration de bactéries dans
une culture. Quelle était la concentration de bactéries dans la solution stock?
2 mL
1 mL
5 mL
10 mL
150
colonies
0.1 mL
stock 6 mL
8 mL
20 mL
10 mL
14. Il y a eu une fuite de 50mL du poison le cyanure de sodium d'une bouteille, qui contenait à
l'origine 100 mL, dans un seau d'eau contenant 300mL d'eau. La concentration du poison
dans le seau a été jugée d'être 0.10 M après la fuite. Si le poids moléculaire du cyanure de
sodium est 49g/mole, combien de grammes de cyanure de sodium restent-ils dans la
bouteille?
15. L'acide chlorhydrique concentré a une concentration de 37.7% (m/m). Quelle est sa
concentration molaire? (La densité de la solution est de 1.19 g/mL et la MM de HCL:
36g/mole)
16. Quel volume d’eau est requis pour préparer une solution de 3 000 grammes deMgCl2
(M.M. : 55g/mole) à une concentration de 0.8 M?
Pour les problèmes qui suivent, présumez que le volume de solvant est égal au volume
de solution.
Le diagramme ci-dessous représente deux solutions (A et B) séparées par une membrane
perméable à l’eau, mais pas aux solutés. Utiliser ceci comme condition de départ pour
répondre aux questions 17-20.
A.
B.
480 osmoles
320 osmoles
10 litres
6 litres
17. Quelles sont les osmolarités des solutions A et B dans la condition originale?
18. Quelle est la relation osmotique de la solution A relativement à la solution B?
19. Une fois que l’osmose est complétée, quelle sera l’osmolarité dans le compartiment A?
20. Quel volume d’eau c’est déplacé dans ou hors du compartiment A?
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21. Calculer l’osmolarité des solutions suivantes: (Notez, tous les solutés sont imperméables
sauf pour l’urée)
0.05 M Na2CO3 + 1M urée
0.5 M Al(NO3)3
0.14 M LiBr
0.15 M glucose (C6H12O6) + 0.2M NaCl
22. L’osmolarité du des cellules sanguines 0.28 osmol. Indiquer si le sang est isotonique,
hypotonique, ou hypertonique comparativement à chacune des solutions indiquées dans la
question 21.
23. Qu’est qui arriverait à des globules rouges placés dans chacune des solutions indiquées à
la question 21? (Crénation, hémolyse, ou rien)
24. Combien de grammes de KCl est-ce que vous devez dissoudre dans 1 L d’eau afin
d’obtenir une solution qui est isotonique au plasma? (M.M. du KCl 74.55 g/mole)
25. Quelle est la relation en termes d’osmolarité et de tonicité d’une cellule avec une osmolarité
de 300 mOsm comparativement aux solutions suivantes :
La cellule est
osmotique et
tonique relativement à 300mM NaCl.
La cellule est
osmotique et
tonique relativement à 300mM d’urée.
*Notez : l’urée est perméable.
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Partie 2 : Données expérimentales et leurs interprétations (4 points/question)
EXERCICE 1.0 : GÉNÉRER UNE COURBE ÉTALON ET DÉTERMINATION D’UNE
CONCENTRATION INCONNUE DE BLEU DE MÉTHYLÈNE
1. Montrez votre calcul qui démontre comment 5mL d’une solution de 4mM de bleu de
méthylène ont été préparés à partir d’une solution mère de 0.26% (m/v).
2. Compléter le tableau suivant :
Solution
Volume de
bleu de
méthylène
(mL)
Volume
d’eau
(mL)
Volume
total
(mL)
Facteur
de
dilution
final
Abs
550nm
Concentration
finale de bleu de
méthylène (% m/v)
No1
No2
No3
No4
No5
No6
INC 1
INC 2
3. Soumettre une courbe étalon générée avec Excel qui représente la relation entre la
concentration du bleu de méthylène (% m/v) et l’absorbance à 550nm. Présenter la
meilleure droite. Indiquer l’équation de la ligne et le coefficient R2.
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EXERCICE 1.1 : DIFFUSION, OSMOSE ET TONICITÉ CHEZ LES GLOBULES ROUGES
4. Compléter le tableau suivant :
Molarité
(M)
Osmolarité
(OsM)
Hémolyse
(+/-)
Sucrose
NaCl
Glycérol
5. D’après vos résultats, quelle est l’osmolarité interne approximative des globules rouges?
Justifier votre réponse.
6. D’après vos résultats, quel soluté est probablement perméable à la membrane cellulaire?
(1 point)
EXERCICE 1.4 : STRIES POUR COLONIES SIMPLES
7. Avant de remettre ce devoir, demander à un aide enseignant d’évaluer vos stries pour
colonies simples. (Pleins points pour des colonies simples pour les deux géloses; culture
mixte et E.coli)
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Devoir 2
Partie 1 : Problèmes et questions théoriques. Vous n'avez pas à montrer vos calculs.
Soumettre seulement vos réponses finales. Indiquer vos réponses à deux chiffres après la
virgule. Notez : NE PAS arrondir les résultats de vos calculs jusqu’à la réponse finale. (3
points/question)
1. Pour évaluer le nombre de bactéries dans la viande hachée, un échantillon de 5 g de
viande est homogénéisé dans 45 mL d'eau résultant en un volume total de 50 mL. Un
échantillon de 2 mL de la suspension de viande est ensuite dilué par un facteur de 104X. 1
mL de la dilution finale est ensuite ajouté à 2 mL de solution saline. 0.1 mL de cette
dernière solution a été étalé. Si 100 colonies ont été observées sur la gélose, quel était le
nombre initial de bactéries/g de bœuf haché?
2. Vous faites les dilutions en séries suivantes : 1/12, 1/2.5, et 1:4. Quels sont votre dilution
finale et votre facteur de dilution final?
3. Considérez le schéma de dilution suivant :
a. Indiquez le nombre total d'UFC dans la totalité (100 mL) de l'échantillon original d'eau
de lac. (TNTC=Trop nombreux pour être compté.)
b. Vous attendriez-vous à une différence dans la réponse du problème ci-dessus si la
première dilution était faite en ajoutant un millilitre de l'échantillon à 9 mL de diluant?
Pourquoi ou pourquoi pas?
4. Une marque de yogourt probiotique prétend contenir approximativement 109 bactéries dans
150 mL. Vous désirez vérifier cette affirmation en faisant un compte viable. Si vous aviez
seulement deux géloses à votre disposition, 0.1 mL de quelles dilutions étaleriez-vous?
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5. Vous préparez un essai de NPP afin de déterminer le nombre de bactéries par gramme de
fromage Camembert. Pour ce faire, 10 g de fromage sont homogénéisés dans un volume
final de 100 mL. La suspension est ensuite utilisée pour faire l'essai de NPP à trois tubes.
Vous obtenez les résultats indiqués dans le tableau ci-dessous.
Dilution
No de tubes positifs
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
2
3
1
2
1
0
Vous faites aussi un compte viable de la même suspension. Quelle dilution de cette
suspension devriez-vous étaler afin de confirmer le résultat du NPP, présumant que vous
étalez 0.1 mL? Indiquer la dilution et le nombre de colonies attendues.
6. Un millilitre d'E.coli est mélangé avec 3 mL de colorant. Une goutte de cette dilution est
déposée sur la cellule de comptage d'une lame d'hématimètre. Trois grands carrés (carré
jaune dans l'image ci-dessous) sont comptés et donnent les résultats suivant : 46, 50, et 58
bactéries. Combien de bactéries est-ce qu'il y a par millilitre dans l'échantillon original?
7. Un compte viable d'une culture bactérienne des bactéries
indiquées dans cette image a été fait de deux manières
différentes. Dans le premier cas, 0.1 mL d'une dilution 10-6 a
été étalé et a donné 115 UFC. Dans le second cas, la culture
a été traitée d'abord dans un homogénéisateur puis 0.1 mL
d'une dilution 10-7 a été étalé. Dans ce cas, 102 UFC ont été
observées. Expliquer brièvement la différence dans les
comptes viables obtenus.
8. Quel objectif fournit le plus petit champ de vision?
100X
40X
10X
La grandeur du champ de vision est le même avec tous les objectifs.
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9. Un spécimen est visualisé au microscope avec un oculaire de 4X et un objectif de10X. Une
mesure du spécimen dans le champ de vision était de 0.01 mm. Quelle est la grandeur
originale du spécimen?
10. Si l’étape du lavage à l’éthanol n’était pas faite lors de la coloration de Gram, de quelle
couleur est-ce que des bactéries du genre Bacillus et des bactéries du genre Salmonella
seraient-elles?
Mauve et rouge respectivement
Rouge et mauve respectivement
Bleu et rouge respectivement
Les deux seraient rouges
Les deux seraient mauves
11. Supposons que pour une période prolongée votre alimentation est déficiente en niacine,
une vitamine essentielle que le corps humain ne peut pas fabriquer. Quel serait l’effet
direct de cette carence sur chacun des sentiers métaboliques suivants? (Une diminution
de l’activité, une augmentation de l’activité ou aucun effet)
La glycolyse
Le cycle de Kreb
La chaîne de transport d’électrons
12. Une culture bactérienne est échantillonnée à deux points dans le temps, qui représentait un
intervalle de 1h et 10 minutes. 3.2 x 106 cellules/mL étaient présentes dans le premier
échantillon et 5.12 x 107 cellules/mL dans le deuxième échantillon. Combien de fois est=ce
que la population a-t-elle doublée dans le laps de temps examiné?
13. Des cultures à partir des tissus d’un patient avec la syphilis sont faites sur des
prélèvements faits à une semaine d'intervalle. Le premier échantillon a 5000 UFC, tandis
que le second échantillon a 32000 UFC. Quatre jours plus tard, un troisième échantillon a
58000 UFC. La population est-elle en croissance exponentielle?
14. Un biologiste étudie une espèce nouvellement découverte de bactéries. Au temps t = 0 h, il
introduit une centaine de bactéries dans un milieu de croissance favorable. Six heures plus
tard, il compte 450 bactéries. En supposant une croissance exponentielle, quel est le taux
de croissance (µ) de ces bactéries?
15. La population d’une bactérie double toutes les 3 heures. Étant donné qu'initialement il y
avait environ 100 bactéries, combien de bactéries est-ce qu'il y aurait après un jour et
demi?
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Partie 2 : Données expérimentales et leurs interprétations
EXERCICE 2.0 – 2.2 : COMPTES MICROBIENS DANS LE SOL (5 points)
1. Soumettre la démarche qui démontre le calcul du nombre de bactéries par gramme de sol.
2. Soumettre la démarche qui démontre le calcul du nombre d’actinomycètes par gramme de
sol.
3. Soumettre la démarche qui démontre le calcul du nombre de fungi par gramme de sol.
EXERCICE 2.3 : NPP DES BACTÉRIES DANS LE SOL (5 points)
4. Remplir le tableau suivant. Sous le tableau, indiquer la combinaison utilisée pour
déterminer l’indice NPP. Soumettre la démarche qui démontre le calcul du NPP par
gramme de sol.
Dilution
1
Croissance : Tube
2
3
EXERCICE 2.4 : COMPTE DIRECT D’UNE SUSPENSION DE LEVURE (5 points)
5. Soumettre la démarche qui démontre le calcul du nombre de cellules de levure par millilitre
dans la suspension originale. Assurez-vous d’inclure les informations suivantes :
Dimensions des carrés desquels les comptes ont été obtenus, les trois comptes, et le
nombre moyen de cellules par carré.
EXERCICE 3.2 – 3.5 : MICROSCOPIE (3 points/section pour un total de 15 points)
6. Soumettre une présentation PPT à l’adresse indiquée dans les directives générales qui
inclut les images prises pour les exercices 2.6 - 2.10.
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EXERCICE 4.0 : COURBE DE CROISSANCE D’E.COLI (5 points/question)
7. Soumettre un graphique avec deux courbes de croissance (température de la pièce et
37oC) qui se conforment aux critères suivants :
o Changement de la densité optique en fonction du temps
o Chaque courbe doit avoir 32 points de temps qui représentent l’intervalle T0 –
T16h
o Considérer que les cultures inoculées à 10h = T0, celles inoculées à 11h =T1h,
celles inoculées à 12h = T2h et celles inoculées à 1h = T2h
8. Déterminer à partir de vos profils de croissance le temps de génération et le taux de
croissance de chacune des deux cultures.
EXERCICE 4.1 : BIOESSAI DE FERMENTATION PAR LA LEVURE (5 points/question)
9. Soumettre un graphique avec 4 courbes qui démontrent la production de moles
d’éthanol en fonction du temps avec chacune des sources de carbones.
10. Soumettre un tableau qui présente les taux de productions d’éthanol (moles/min.) et les
rendements finaux après une heure en fonction de la source de carbone (moles
d’éthanol/mole de la source de carbone) pour chacune des sources de carbones.
11. Utiliser des schémas pour illustrer le sentier utilisé pour la production d’éthanol à partir
de chaque source de carbone. Vos sentiers doivent illustrer les équivalences de
réductions et les ATP produites.
Ex.
1 Glucose + 2 NAD+
2 Pyruvate + 2 NADH + 2 ATP (net)
2 Éthanol + 2CO2 + 2 NAD+
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Devoir 3
Partie 1 : Problèmes et questions théoriques. Vous n'avez pas à montrer vos calculs.
Soumettre seulement vos réponses finales. Indiquer vos réponses à deux chiffres après la
virgule. (3 points/question)
1
6
5
2
3
4
1. D’après l’essai de Kirby Bauer illustré, quels antibiotiques possèdent le CMI le plus élevé et
le CMI le plus faible?
2. D’après l’E-test illustré, quelle bande sur l’E-test correspond à l’antibiotique « E » sur l’essai
de Kirby Bauer?
3. D’après l’E-test illustré, quelle est la concentration de l’antibiotique
testé au point indiqué par la flèche? Si cette information ne peut
pas être déterminée, indiquez-le.
4. Le plus élevée
A.
B.
C.
D.
E.
L’indice thérapeutique
La dose toxique
La dose thérapeutique
La toxicité sélective
Le spectre d’action
, le meilleur est l’antibiotique.
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5. Un antibiotique qui cible laquelle des composantes suivantes serait attendu d’avoir la
toxicité sélective la plus faible?
A. La synthèse de l’ADN bactérien
B. La synthèse de l’ARN bactérien
C. La synthèse des parois bactériennes
D. La membrane plasmique bactérienne
E. Les ribosomes bactériens
6. Lequel des composés suivants est un antibiotique naturel avec un anneau de bêtalacatmine?
A. Céphalosporine
B. Pénicilline
C. Tétracycline
D. Chloramphénicol
E. Streptomycine
7. Quelle drogue antibactérienne n’inhibe pas la synthèse protéique?
A. Un aminoglycoside
B. La tétracycline
C. L’ampicilline
D. Le chloramphénicol
E. L’érythromycine
8. Les antibiotiques qui agissent sur la paroi cellulaire sont seulement efficaces contre quel
type de cellules?
A. Gram négative
B. En dormance
C. En croissance active
D. Qui forme des endospores
E. Gram positives
9. Un échantillon de lait contient 108 cellules/mL de B. cereus, qui possède une valeur D à
75oC de 30 secondes, et 109 cellules/mL de S. sonnei, qui possède une valeur D à 75oC de
15 secondes. Afin de faire la pasteurisation du lait, vous désirez réduire le compte
bactérien à 106 bactéries/mL. D’après ces informations, quelle devrait être le temps
d’exposition minimum à 75oC pour atteindre ce but?
10. Un échantillon de poulet qui contenait initialement 107 cellules de S. typhimurium avait 10
cellules après un traitement de 1 heure à 90oC. D’après ces informations, quelle est la
valeur D de Salmonella à 90oC?
11. Un nouveau rince-bouche affirme réduire la population bactérienne dans la bouche par
99.99%. L’utilisation recommandée, stipule que les individus doivent se rincer la bouche
pour un total de 2 minutes. Présumant un charge bactérienne moyenne de 108 cellules/mL,
combien de temps serait requis pour que l’ingrédient actif du rince-bouche réduisent la
population bactérienne par un log?
12. Considérez l’information présentée dans la question précédente. 0.1 mL d’une dilution de
quelle facteur de dix devriez-vous étaler afin de vérifier les affirmations de ce rince-bouche?
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Partie 2 : Données expérimentales et leurs interprétations (4 points/question)
EXERCICE 4.0 : QUANTIFICATION DES BIOFILMS



Obtenir la moyenne des absorbances des 2 lamelles témoins (non inoculés)
Obtenir la moyenne des absorbances des traitements expérimentaux
Soustraire la valeur moyenne obtenue pour les témoins de la moyenne des traitements
expérimentaux
1. Compléter le tableau suivant :
Glucose
% m/v
ABS 630
NaCl
% m/v
ABS 630
2. Brièvement présenter quel était l’effet de chacune des conditions environnementales sur la
formation des biofilms.
3. Quelles étaient les concentrations optimales de glucose et de NaCl pour la formation de
biofilms?
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EXERCICE 6.0 : ESSAIE TTC - CONCENTRATION D’AMPICILLINE DANS LE LAIT
4. Remplir le tableau suivant, puis répondre aux questions qui suivent.
Conc. Pénicilline
Couleur
Série 1
Série 2
a. D’après vos résultats, quelle est la concentration minimale de pénicilline qui peut être
décelée par l’essai TTC après 1h et 2h? Justifier votre réponse.
EXERCICE 6.1 : BIOESSAI POUR LA DÉTERMINATION DE LA DL50 DE MÉTAUX LOURDS
5. Soumettre un graphique à barres qui démontre le pourcentage de mortalité en fonction de la
concentration des métaux lourds.
6. D’après vos résultats, quel est le DL50 de chacun des métaux lourds?
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EXERCICE 6.2 : ESSAI DE KIRBY-BAUER

Obtenir les diamètres des zones d’inhibitions pour chacune des bactéries testées et
chacun des antibiotiques.
7. Compléter les tableaux suivants :
Antibiotiques
Antibiotiques
S. aureus
Diamètres d’inhibitions (mm)
S. faecalis
E. coli
S. aureus
Sensibilité
S. faecalis
E. coli
R = résistant, RI = résistance intermédiaire, S = sensible
8. Répondre aux questions suivantes d’après les données présentées ci-dessus :
a. Quel antibiotique possède le spectre d’action le plus étroit? Justifier votre réponse.
b. Quel antibiotique possède le spectre d’action le plus large? Justifier votre réponse.
c. Quel type de bactérie, Gram positive ou négative, est le moins susceptible à
l’antibiothérapie? Justifier votre réponse.
d. Quelle bactérie est plus susceptible aux macrolides? Justifier votre réponse.
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EXERCICE 6.4 : DÉTERMINATION DES CMI

Déterminer le pourcentage de réduction de la croissance de chaque espèce
bactérienne obtenue à chacune des concentrations de chacun des antibiotiques. ((D.O.
sans antibiotique – D.O. avec antibiotique) /D.O. sans antibiotique) X 100).
Déterminer le CMI (µg/mL) de chacun des antibiotiques pour chacune des espèces
bactériennes (la plus faible concentration qui cause une réduction d’au moins 99%).
Déterminer les indices thérapeutiques pour chacun des antibiotiques pour chaque
espèce bactérienne. (CMI /dose toxique)
Déterminer si chacune des bactéries était sensible, résistante ou de résistance
intermédiaire à chacun des antibiotiques



Antibiotique
Ampicilline
Kanamycine
Acide naladixique
Érythromycine
Cmax et Cmin (µg/mL)
34 – 1.8
12 – 2
4.5 – 0.2
8.3 – 2.7
9. Compléter le tableau suivant :
CMI (µg/mL)
Antibiotique
S. aureus
S. faecalis
Ampicilline
E.coli
DL50 (µg/mL)
530
400
204
460
Indices thérapeutiques
S. aureus
S. faecalis
E.coli
Kanamycine
Acide naladixique
Érythromycine
10. Répondre aux questions suivantes d’après les données présentées ci-dessus :
a. Indiquer quel (s) antibiotique (s) serait (ent) recommandé (s) pour traiter une infection
par chacune des bactéries. Justifier votre réponse.
6.5: EFFICACITÉ DES RINCES BOUCHES
11. Compléter le tableau suivant pour indiquer les CMI des ingrédients actif de chacun des
rinces bouches sur chacun des organismes tests :
Rince-bouche
Listerine original
Listerine zero
Scope outlast
Éthanol
12. Interprétation
Ingrédient actif
S. faecalis
CMI (% m/v)
Personne
E.coli
1
Personne
2
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EXERCICE 6.6: VALEUR D D’UN DÉSINFECTANT
13. Compléter le tableau suivant pour indiquer le facteur de dilution le plus élevée auquel de la
croissance pouvait être observé pour chacun des temps :
Temps
Facteur de dilution
E. coli
B. subtilis
T0
T5
T10
T15
14. Soumettre un graphique du profil de mortalité en fonction du temps. Votre graphique doit
respecter les critères suivants : L’axe des Y doit être une échelle logarithmique qui
représente le facteur de dilution le plus élevé auquel de la croissance pouvait être
observé pour chacun des temps. Présenter la meilleure droite. Indiquer l’équation de la
ligne et le coefficient R2.
15. D’après vos données, quels sont les temps de réduction décimale (valeurs D) de B.
subtilis et d’E. coli? Montrer votre calcul.
16. D’après les valeurs D déterminées dans la question précédente, quelle durée de temps
serait requise pour réduire la population initiale par un facteur de 99.999%? Montrer
votre calcul.
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Devoir 4
Partie 1 : Problèmes et questions théoriques. Vous n'avez pas à montrer vos calculs.
Soumettre seulement vos réponses finales. Indiquer vos réponses à deux chiffres après la
virgule. (2 points/question)
1. Lequel des énoncés suivants à propos des bactéries retrouvées dans l’environnement est
faux?
A. Un gramme de sol peut contenir un milliard de cellules bactériennes.
B. Il n’y a pas de bactéries sur la peau humaine à moins d’une infection.
C. Il y a toujours des bactéries dans votre bouche même si vous vous brossez les dents
régulièrement.
D. Les bactéries retrouvées sur les surfaces externes du corps humain sont
majoritairement Gram positives.
2. Lorsque Staphylococcus epidermidis est inoculé sur une gélose d’Agar de Phénoléthanol,
les cellules individuelles génèrent des colonies visibles. Tandis que quand Esherichia coli
est inoculé sur ce milieu, elle meurt. L’Agar de phénoléthanol est un exemple d’un milieu:
A.
B.
C.
D.
Un milieu à usage général
Un milieu différentiel
Un milieu sélectif
Un milieu complexe
3. Qu’est que l’Agar?
A.
B.
C.
D.
Un polymère de polysaccharides dérivé d’une algue.
Une source d’azote dans les milieux solides.
Un polymère d’acides aminés dérivé des tendons.
Un polymère qui peut être dégradé par la majorité des bactéries d’importance médicale.
4. Quel (s) composé (s) peut (peuvent) être utilisé (s) comme source de carbone et d’azote
dans le bouillon de phénol rouge sucrose?
A.
B.
C.
D.
Le sucrose.
Le sucrose et le glucose.
Des acides aminés.
Des acides aminés et le sulfate d’ammonium.
5. Quel énoncé décrit possiblement la fermentation d’un hydrate de carbone dans le bouillon
de phénol rouge?
A.
B.
C.
D.
Le milieu est limpide et a viré au jaune.
Le milieu est turbide et a viré au rouge foncé.
L’indicateur de pH a changé à une couleur qui indique la présence d’un produit alcalin.
Le milieu est turbide et démontre l’accumulation d’un gaz dans la fiole inverse.
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6. Lequel des énoncés suivants à propos de l’utilisation d’acides aminés dans les milieux de
culture est vrai?
A.
B.
C.
D.
E.
Les acides aminés peuvent être utilisés comme source de carbone.
Les acides aminés peuvent être utilisés comme source d’azote.
Les acides aminés peuvent être utilisés comme source d’électrons.
Tous les énoncés (A – C) sont vrais.
Les énoncés A et B sont vrais, mais pas C.
7. Vous faites croître deux bactéries sur des géloses avec de l’amidon comme source de
carbone unique et observez les résultats suivants:
A
B
A
B
Quelle conclusion est valide?
A.
B.
C.
D.
Les bactéries A et B sécrètent de l’amylase.
Les bactéries A et B peuvent utiliser le glucose comme source de carbone.
La bactérie A dégrade l’Agar.
La bactérie B sécrète de l’amylase, mais pas la bactérie A.
8. Quelle (s) caractéristique est (sont) commune (s) au bouillon de phénol rouge, la pente
d’urée et la pente TSI?
A.
B.
C.
D.
Ces milieux contiennent du phénol rouge.
Ce sont des milieux qui permettent de déceler la fermentation.
Ce sont des milieux qui permettent de déceler la production d’acides.
Ce sont des milieux qui permettent de déterminer la source d’azote utilisée.
9 – 12 Jumeler la réponse appropriée à chacun des énoncés. Certaines réponses peuvent
être utilisées plus d'une fois, d'autres ne sont pas utilisés du tout.
A. Phénol rouge sucrose
D. Pente d’Agar de phénylalanine
B. Gélose de lait
E. SIM
C. Pente de citrate de Simmon
9. Utiliser pour vérifier la dégradation du tryptophane.
10. Utiliser pour vérifier la production de l’acide phénylpyruvique.
11. Utiliser pour vérifier la sécrétion d’enzyme extracellulaire.
12. Utiliser pour vérifier la dégradation de la cystéine.
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13 – 16 Jumeler chacun des réactifs, ingrédient ou compose avec son bût approprié.
Certaines réponses peuvent être utilisées plus d'une fois, d'autres ne sont pas utilisés du
tout.
A. Réactif de Kovacs
D. Iode
B. Sulfate ferreux
E. Extrait de levure
C. Huile minérale stérile
13. Utiliser pour déceler la présence d’H2S.
14. Utiliser pour réduire la disponibilité d’oxygène.
15. Utiliser comme source de vitamines, d‘acides aminés et d’autres nutriments.
16. Utiliser pour déceler la présence de l’amidon.
17 – 20 Jumeler chacun des tests bactériologiques avec les observations pour un test
positif. Certaines réponses peuvent être utilisées plus d'une fois, d'autres ne sont pas
utilisés du tout.
Apparence d’un résultat positif
A. Zone claire après l’ajout d’un réactif chimique.
B. Zone d’éclaircissement autour de la croissance bactérienne.
C. Le milieu devient bleu.
D. Le réactif vire au rouge suite à son ajout.
17. Test d’amylase.
18. Test d’hémolyse.
19. Test d’indole.
20. Test d’utilisation du citrate.
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Partie 2 : Données expérimentales et leurs interprétations (3 points/question)
EXERCICE 7.0 et 8.0 : DÉGRADATION DE SOURCES DE CARBONES COMPLEXES
1. Indiquer dans le tableau ci-dessous la présence (+) ou l’absence (-) de l’enzyme
exocellulaire étant testée pour chacune des bactéries ainsi que le produit de la dégradation
du polymère par l’enzyme.
Bactérie
Gélose de lait
+/Produit
Gélose d’amidon
+/Produit
Gélose Spirit Blue
+/Produit
Gélose d’ADN
+/Produit
B. cereus
B. subtilis
E. coli
EXERCICE 7.1 et 8.1: MÉTABOLISME EN MILIEU DE PHÉNOL ROUGE
2. Indiquer dans le tableau ci-dessous la couleur du milieu, la présence (+) ou l’absence (-)
d’acide, et le métabolisme (O : oxydatif ou F : fermentatif) pour chacune des bactéries.
Bactérie
P. miribalis
P. aeruginosa
E. coli
E. aerogenes
Couleur
Glucose
Gaz Métabolisme
Couleur
Lactose
Gaz Métabolisme
Couleur
Sucrose
Gaz Métabolisme
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EXERCICE 7.2 et 8.2: CROISSANCE EN MILIEU TSI
3. Indiquer dans le tableau ci-dessous la couleur du milieu, la présence (+) ou l’absence (-)
d’acide, et le métabolisme (O : oxydatif ou F : fermentatif) pour chacune des bactéries.
Bactérie
Couleur
Pente
Métabolisme
Couleur
Bout
Gaz Métabolisme
P. miribalis
P. aeruginosa
E. coli
EXERCICE 8.3 TEST DE MÉTHYL-ROUGE-VOGUES-PROSKAUER
4. Indiquer pour chacune des bactéries les observations enregistrées et les conclusions
appropriées.
E. coli
E. aerogenes
EXERCICE 7.3 et 8.4 CROISSANCE SUR PENTE DE CITRATE DE SIMMON
5. Indiquer pour chacune des bactéries les observations enregistrées et les conclusions
appropriées.
E. coli
E. aerogenes
EXERCICE 7.4 et 8.5: CROISSANCE SUR PENTE D’URÉE
6. Indiquer pour chacune des bactéries les observations enregistrées et les conclusions
appropriées.
E. coli
P. mirabilis
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EXERCICE 7.5 et 8.6 : ESSAIS DÉCARBOXYLASES ET DÉSAMINASES
Indiquer pour chacune des bactéries les observations enregistrées et les conclusions
appropriées.
7. E. coli
Bouillon de décarboxylase avec ornithine
Pente d’Agar de phénylalanine
Pente d’Agar de lysine avec fer
8. P. mirabilis
Bouillon de décarboxylase avec ornithine
Pente d’Agar de phénylalanine
Pente d’Agar de lysine avec fer
9. E. aerogenes
Bouillon de décarboxylase avec ornithine
Pente d’Agar de phénylalanine
Pente d’Agar de lysine avec fer
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EXERCICE 7.6 et 8.7: TEST SIM
10. Indiquer pour chacune des bactéries les observations enregistrées et les conclusions
appropriées.
E. coli
P. mirabilis
E. aerogenes
EXERCICE 7.7 et 8.8: ESSAI DE RÉDUCTION DU NITRATE
11. Indiquer pour chacune des bactéries les observations enregistrées et les conclusions
appropriées.
E. coli
P. aeruginosa
P. mirabilis
EXERCICE 7.8 et 8.9 : TEST ENTEROPLURI
12. Compléter le tableau suivant :
Test
Code de
positivité
Résultat
Somme des
codes
Code
numérique
Groupe 1
4
2
1
Groupe 2
4
2
1
Groupe 3
4
2
Microorganisme:
1
Groupe 4
4
2
1
Groupe 5
4
2
1
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EXERCICE 8.11 : TESTS DIFFÉRENTIELS POUR L’IDENTIFICATION DES COCCI GRAM
POSITIFS
Numéro de votre inconnu :
Réaction de la catalase :
12. Identité de l’inconnu :
EXERCICE 8.12 : LES COLORANTS DIFFÉRENTIELS ET LA STÉRILISATION
13. Compléter le tableau suivant pour indiquer le pourcentage de réduction de viabilité de la
levure après chacun des traitements :
Traitement
UV
préparation
sèche
UV
préparation
humide
Microondes
préparation
sèche
Microondes
préparation
humide
Ébullition
préparation
sèche
Ébullition
préparation
humide
% de
viabilité
EXERCICE 9.1 : ESSAI DU LYSOZYME
14. Soumettre une courbe étalon générée par Excel de l’absorbance à 540nm en fonction de la
concentration de lysozyme. Présenter la meilleure droite. Indiquer l’équation de la ligne et le
coefficient R2.
15. ESSAI DU LYSOZYME PURIFIÉ DES ŒUFS : Déterminer la concentration approximative
de lysozyme dans les œufs en mg/œuf. Montrer votre démarche.
16. ESSAI DU LYSOZYME DE LA SALIVE : Déterminer la concentration approximative de
lysozyme dans la salive en mg/mL. Montrer votre démarche.
EXERCICE 9.2 : ELISA DU LYSOZYME
17. Soumettre une courbe étalon générée par Excel des lectures d’absorbances obtenues de
votre essai d’ELISA en fonction de la concentration de lysozyme. Présenter la meilleure
droite. Indiquer l’équation de la ligne et le coefficient R2.
18. Déterminer la concentration approximative de lysozyme dans les œufs en mg/œuf. Montrer
votre démarche.
19. Déterminer la concentration approximative de lysozyme dans la salive en mg/mL. Montrer
votre démarche.
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EXERCICE 9.3 : COMPTE DES LEUCOCYTES
20. Compléter le tableau suivant :
Compte différentiel de globules blancs
Type cellulaire
No de chaque
% de chaque
Neutrophiles
Éosinophiles
Basophiles
Lymphocytes
Monocytes
Total: