Master de Biochimie - M1 UE2

Structures et propriétés des membranes biologiques
I. Rappels
II. Interactions entre les constituants membranaires
III. Caractérisation des constituants membranaires
III.1 – Isolement et caractérisation des membranes
III.2 – Extraction et purification des lipides
III.2 – 1. Extraction des lipides
III.2 – 2. Purification et caractérisation
III.2 – 3. Composition lipidique des membranes
III.3 – Utilisation des détergents
Caractérisation fonctionnelle et structurale
=> purification
=> solubilisation
Structures et propriétés des membranes biologiques
I. Rappels
II. Interactions entre les constituants membranaires
III. Caractérisation des constituants membranaires
III.1 – Isolement et caractérisation des membranes
III.2 – Extraction et purification des lipides
III.3 – Utilisation des détergents
III.3 – 1. Nature et propriétés des détergents
Détergent = agent de surface = surfactant
= molécule tensio-active
Détergent
Lipide membranaire
Equilibre : n monomère
(monomère)n
Formation de micelles en fonction de la
concentration totale en détergent
Formation de micelles en fonction de la
concentration totale en détergent
Formation de micelles en fonction de la
concentration totale en détergent
Zone hydrophyle importante CMC
Zone hydrophobe importante CMC
Lipides membranaires : zone hydrophobe importante
Cholestérol : CMC 10nM
Phosphatidyl choline (lécithine) :
CMC 0,001 nM
=> insolubles
Types de détergents
Type A : zone hydrophobe = chaîne aliphatique
Type B : zone hydrophobe = cycles aromatiques ou alicycliques
sels biliaires
Type A : zone hydrophobe = chaîne aliphatique
=> ioniques : anioniques ou cationiques
SDS
Sodium dodecyl sulfate
Bromure de cétyl triméthyl
ammonium (CTAB)
+
-
Type A : zone hydrophobe = chaîne aliphatique
=> amphotériques (zwitterioniques)
Lyso PC
Type A : zone hydrophobe = chaîne aliphatique
=> neutres : Polyoxyethylene alcools ou alkylglucosides
Triton X100
Brij 98 : Polyoxyethylene(20)
oleyl ether
Octyl glucoside
Type B : zone hydrophobe = cycles aromatiques ou alicycliques
=> sels biliaires
Cholate
=> zwitterionique
CHAPS
+ la CMC est basse
+ N est grand
Structures et propriétés des membranes biologiques
I. Rappels
II. Interactions entre les constituants membranaires
III. Caractérisation des constituants membranaires
III.1 – Isolement et caractérisation des membranes
III.2 – Extraction et purification des lipides
III.3 – Utilisation des détergents
III.3 – 1. Nature et propriétés des détergents
III.3 – 2. Solubilisation des membranes
III.3 – 2.1 Bicouches lipidiques en détergent
PC + Triton
PC + Triton
PC + SDS
Modèle
PC/DMTAP + HTAB
Modèle
PC/DMTAP + SDS
Modèle
PC/PE + CHAPS
Modèle