Manuel de prélèvement

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1-R1DOC19
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7. 3
UNIBIO
BIOMED34
Applicable au :
2015-07-20
Manuel de Prelevement
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Approbation
SCHLUP Nicolas
ALMABOUDI David
2015-07-20
2015-07-20
2015-07-02
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Il ne peut être communiqué à une tierce partie sans l’accord préalable de la Cellule Qualité. (Editée le 28/08/15).
Manuel de Prelevement - 1-R1DOC19 - Version 7. 3
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SOMMAIRE
A partir de ce sommaire, des liens hypertextes permettent de vous diriger vers le
paragraphe de votre choix en cliquant sur l’intitulé du paragraphe.
En bas de chaque page, un lien vous permet de retourner au sommaire.
1. RECOMMANDATIONS GENERALES .............................................................. 4
A. POURQUOI ETRE A JEUN ? .......................................................................... 4
B. POURQUOI PRELEVER A CERTAINES HEURES ? .................................................. 4
C. POURQUOI, ET COMMENT, IDENTIFIER LES PRELEVEMENTS ET LES FICHES DE
TRANSMISSIONS ? ................................................................................................ 5
2. CATALOGUE DES EXAMENS...................................................................... 7
3. INTERET CLINIQUE DES EXAMENS............................................................. 7
4. LES PRELEVEMENTS .............................................................................. 8
A. LES PRELEVEMENTS SANGUINS .................................................................... 8
a) Avant le prélèvement ...................................................................... 8
b) Le prélèvement .............................................................................. 8
c) Identification du prélèvement et Renseignements de la fiche de
transmission ................................................................................................... 10
d) Conservation et transport des prélèvements .................................... 11
e) Critères d’acceptation des prélèvements sanguins ............................ 11
B. RECOMMANDATIONS POUR LES PRELEVEMENTS BACTERIOLOGIQUES....................... 13
a) Examen cytobactériologique des urines ........................................... 13
b) Prélèvements génitaux et urétraux ................................................. 13
1) Pour un prélèvement vaginal : ................................................................................................................ 14
2) Pour le prélèvement vulvaire : ................................................................................................................ 14
3) Pour le prélèvement urétral : .................................................................................................................. 14
4) Cas particulier recherche des HPV : papillomavirus ........................................................................ 15
c) Prélèvements conjonctival .............................................................. 15
d) Prélèvements de peau et phanères ................................................. 15
1) Recueil
2) Recueil
3) Recueil
4) Recueil
de
de
au
au
squames ..................................................................................................................................... 16
cheveux ...................................................................................................................................... 16
niveau des ongles ................................................................................................................... 16
niveau des cils ......................................................................................................................... 16
e) Prélèvements oropharyngés ........................................................... 16
1) Prélèvement de gorge ................................................................................................................................ 17
2) Prélèvement lingual et ou buccal ........................................................................................................... 17
3) Prélèvement au niveau des fosses nasales ........................................................................................ 17
4) Prélèvements particuliers .......................................................................................................................... 17
f) Prélèvements de Pus ..................................................................... 17
1) Abcès,écoulement spontané, morsure, escarre, plaie opératoire .............................................. 18
2) Conduit auditif externe .............................................................................................................................. 18
g) Ponction articulaire ....................................................................... 18
h) Critères d’acceptation des prélèvements bactériologiques……………………18
5. LES PRELEVEMENTS REALISES PAR LE PATIENT .......................................... 20
6. LES PRELEVEMENTS A CARACTERE PARTICULIER ......................................... 20
A. LES TESTS DYNAMIQUES ..........................................................................
a) HGPO (HyperGlycémie Provoquée par voie Orale) .............................
b) Dépistage du diabète gestationnel ..................................................
c) Prolactine ....................................................................................
d) Hélikit .........................................................................................
B. LES SUIVIS THERAPEUTIQUES ....................................................................
a) Traitement Antibiotiques – Protocole de Prélèvement ........................
b) Traitement à l’Héparine – Protocole de prélèvement .........................
20
20
21
21
21
21
22
23
7. DECHETS A RISQUE INFECTIEUX - RISQUES D’A.E.S .................................. 25
8. STOCKAGE DES ECHANTILLONS EXAMINES ................................................ 25
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Ce manuel a pour objectif de guider les préleveurs dans leurs pratiques
quotidiennes. Il permet d’avoir une vue d’ensemble de l’organisation mise en
place au sein du laboratoire afin que les examens soient réalisés dans des
conditions optimales.
Sa mise en ligne sur notre site Internet (www.unibio.fr ou www.biomed34.fr),
permet une consultation par l’ensemble des préleveurs et la diffusion rapide
d’informations en cas de nouveaux examens ou nouvelles techniques
disponibles.
1. RECOMMANDATIONS GENERALES
A. Pourquoi être à jeun ?
 Certains dosages varient après le repas parce que l’alimentation apporte
elle-même certains des éléments dosés (ex : triglycérides, glucose, …)
 Après un repas, la qualité du sérum ou du plasma est modifiée (trouble,
viscosité).
 Ces modifications de la qualité des prélèvements peuvent perturber le
fonctionnement des appareils d’analyse de plus en plus sensibles et
précis.
 De manière générale, le jeun est recommandé pour l’ensemble des
examens.
B. Pourquoi prélever à certaines heures ?
Le cycle nycthéméral a une influence importante sur certains paramètres
biologiques (ex : cortisol, prolactine) et dans ce cas le prélèvement doit être
fait à des heures particulières de la journée. Pour d’autres paramètres,
l’influence est modérée mais réelle.
Dans chaque boite de prélèvement, la « Table de préconisation » reprend les
principaux paramètres dont les résultats dépendent de ces facteurs
d’influence:
Cholestérol
Jeun
strict
X
Triglycérides
X
Glycémie
X
Fer sérique (saturation)
Hormones
Cortisol Sanguin
Prolactine
Remarques
Respecter les heures pour les cycles et la glycémie
postprandiale (2h après le début du repas)
De préférence le matin
De préférence le matin
Respecter les heures mentionnées sur la prescription (en
général 8h et 18h)
Entre 8h et 10h, éviter la période post-prandiale et repos
de 15min avant le prélèvement
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C. Pourquoi, et comment, identifier les prélèvements ET les fiches
de transmissions ?
a) Identification du prélèvement:
Selon la législation en vigueur, applicable à tous les préleveurs, il est impératif
de noter sur TOUS les échantillons :
 Sexe
 Nom de naissance
 Nom de Jeune fille
 Prénom
 Date de naissance
L’absence ou l’erreur d’identification d’un échantillon constitue une nonconformité ; elle est enregistrée comme telle dans le système qualité du
laboratoire car le laboratoire ne peut pas garantir avec certitude la provenance
des échantillons.
La non-conformité peut entraîner la non-exécution des examens en fonction du
niveau de gravité de l’anomalie.
Toute dérogation est soumise à l’accord d’un biologiste mais des réserves
éventuelles concernant l’identité du patient pourront être mentionnées sur le
compte-rendu.
Aucune dérogation ne sera concédée pour les analyses d’Immuno-Hématologie
(Groupes et RAI).

Le préleveur ne doit pas se contenter d’une parfaite identification d’un ou
plusieurs échantillons sans une complète identification de Tous les échantillons
constitutifs du prélèvement.
Même si l’ensemble de ces échantillons (ex: tubes) sont réunis dans un seul et
même emballage fermé (boite, sachet) à l’issue du prélèvement, il est possible
qu’ils soient dissociés, à l’ouverture de cet emballage, lors de leur traitement
au laboratoire.
Dans ce cas, chacun des échantillons doit pouvoir être identifiés
individuellement avec le maximum de sécurité afin d’être ré-appariés entre eux
Les échantillons mal identifiés seront écartés.
b) Renseignement de la Fiche de Transmission : Le complément
essentiel au prélèvement
Mise à disposition dans chaque kit de prélèvement fourni par le laboratoire, ces
fiches doivent obligatoirement être renseignées, de façon lisible, et associées
aux échantillons.
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Les items à renseigner sont les suivants :
Dans tous les cas :
o Date et heure de prélèvement.
Ces indications sont nécessaires à la validation des délais d’acheminement
au laboratoire.
Ces délais, sont spécifiques de chaque examen et sont consultables au
chapitre « Critères d’acceptation des prélèvements sanguins».
o sexe du patient.
Cette indication est essentielle notamment en cas de prénom « androgyne »
(type « Dominique, Camille, Claude… ») car les normes associées aux
résultats sont différentes en fonction du sexe. L’interprétation des résultats,
et donc la prise en charge du patient, en dépendent.
o Nom, Prénom, nom de jeune fille, ddn, et adresse
Outre les données déjà portées sur les échantillons, les fiches de
transmission mentionnent l’adresse du patient qui est un élément
d’identification supplémentaire en cas d’homonymie.
o Eléments administratifs (n° sécu – mutuelle)
Au-delà de leur nécessité dans la gestion du dossier, ils constituent des
éléments supplémentaires d’identification.
o Le prescripteur (en cas d’absence provisoire d’ordonnance)
Cette mention permet au laboratoire de disposer d’un interlocuteur capable
d’une prise en charge du patient lorsque les résultats présentent un
caractère préoccupant (ex : sérologie), voire
vital (surdosage en
anticoagulant).
o mode de transmission des résultats
Pour que les résultats puissent parvenir à leur(s) destinataire(s) dans les
meilleures conditions.
Le cas échéant :
Poids du patient : indispensable pour certains examens
Posologie et heure de la dernière prise pour les dosages de
médicaments et tout renseignement clinique supplémentaire que le
préleveur jugera utile à l’interprétation du dossier (date des dernières
règles, affection chronique….)
o caractère d’urgence s’il y a lieu
o
o
Le préleveur doit également noter ses coordonnées de façon à ce que l’on
puisse le contacter en cas de problèmes concernant le prélèvement.

Le préleveur ne doit pas se contenter d’une parfaite rédaction de la fiche de
transmission sans une complète identification de Tous les échantillons.
CLIQUER ICI POUR
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Même si l’ensemble de ces éléments sont réunis dans un seul et même
emballage fermé (boite, sachet) à l’issue du prélèvement, il est possible qu’ils
soient dissociés, à l’ouverture de cet emballage, lors de leur traitement au
laboratoire.
Dans ce cas, chacun des échantillons doit pouvoir être identifiés
individuellement avec le maximum de sécurité afin d’être ré-appariés entre eux
et avec la fiche de transmission correspondante.
[NB] Documents à fournir pour certains examens spécifiques:
Les examens de génétique et les diagnostics ante-nataux doivent être
accompagnés de formulaire(s) spécifique(s), fourni(s) par le laboratoire
spécialisé en charge de ces analyses (consentement éclairé, attestation de
consultation, etc…).
Ces documents sont téléchargeables sur le site du laboratoire Biomnis en
cliquant sur le lien suivant (http://www.biomnis.com)
2. CATALOGUE DES EXAMENS
La liste des examens pris en charge par le laboratoire correspond au
« référentiel des examens » disponible sur notre site Internet.
Les examens pour lesquels le moteur de recherche ne trouve pas de
correspondance sont sous traités dans les laboratoires spécialisés partenaires.
Leurs référentiels sont disponibles depuis les sites Internet (www.unibio.fr et
www.biomed34.fr) ou en cliquant sur les liens suivants :
« Reférentiel des examens de Biomnis »
« Référentiel des examens de BPR »
3. INTERET CLINIQUE DES EXAMENS
Vous trouverez les intérêts cliniques des examens de biologie médicale
dits « de routine » sur le site www.labtestsonline.fr
Pour toute autre information concernant d’autres analyses prises en charge par
le laboratoire, contactez un biologiste.
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4. LES PRELEVEMENTS
A. Les prélèvements sanguins
a) Avant le prélèvement
Le laboratoire fournit le matériel de prélèvement nécessaire dans des kits
unitaires conformes à la réglementation en vigueur. Les « Table de
Préconisations » et « Fiche de Transmission » sont placées dans ces unités de
prélèvement.
La table de préconisation est un document volontairement succinct qui précise
les types de tubes à prélever pour les analyses les plus couramment prescrites.
Le référentiel des examens, disponible sur le site Internet du laboratoire
(www.unibio.fr ou www.biomed34.fr), reprend tous les examens pris en charge
par le laboratoire.
Pour chaque examen, vous pouvez vérifier le type du tube à prélever et les
conditions pré-analytiques à respecter (ex : jeûne, délai d’acheminement au
laboratoire, traitement particulier de l’échantillon, condition de conservation,
etc…).
Les examens pour lesquels le moteur de recherche ne trouve pas de
correspondance sont sous traités dans les laboratoires spécialisés partenaires.
Leurs référentiels sont disponibles depuis les sites Internet (www.unibio.fr et
www.biomed34.fr) ou en cliquant sur les liens suivants :
« Reférentiel des examens de Biomnis »
« Référentiel des examens de BPR ».
Veiller à n’utiliser que des tubes non périmés : pour vous aider, la Date Limite
d’Utilisation est visible sur l’étiquette collée sur tous les tubes. N’hésitez pas à
nous retourner les coffrets anciens pour des échanges.
b) Le prélèvement
Quantité de prélèvement
Elle dépend :
- De la facilité du recueil (enfant, patient sous chimio…….)
- Du type de tube utilisé : il existe, pour chaque tube contenant un
anticoagulant, un volume à respecter (matérialisé par un trait noir pour ceux
que nous utilisons)
- Des préconisations pour la réalisation du ou des examens (volume mort
et prise d’essai)
- De la quantité de paramètres à doser sur chaque tube.
Dans les cas d’un nombre important d’examens à réaliser sur un même type
de tubes (ex : VS, Groupage, numération : sur EDTA), il est préférable de
prélever plusieurs tubes de ce même type sous peine de ne pouvoir réaliser la
totalité des analyses. De même, dans les cas d’un nombre important
d’examens sur tubes secs, privilégier les « grands » tubes aux « petits ».
CLIQUER ICI
POUR
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Modalité de recueil
Avant chaque recueil le préleveur doit effectuer une désinfection de ses mains
avec du savon ou du gel hydro alcoolique.
► Le patient est en position assise, légèrement inclinée, ou couchée.
► Demander au patient s’il est allergique à certains produits (latex, iode…..)
de façon à adapter le type de matériel ou de produit désinfectant à utiliser.
► Placer le garrot autour du bras (sauf demande explicite du prescripteur ou
choix du préleveur). Demander au patient de fermer la main sans contracter
les muscles.
► Désinfecter le site de prélèvement à l’alcool modifié à 70°, sauf en cas de
dosage d’alcoolémie (utiliser alors de la Bétadine).
[NB] - en cas de perfusion, ne pas prélever sur le bras perfusé (sauf si
impossible : ex. bras plâtré).
- ne pas utiliser de gants poudrés en cas de dosage de Calcium ou de
Magnésium.
► Prélever à l’aide du système adapté au patient : vacutainer, seringue,
épicrânienne, écoulement libre, KT ; Le garrot doit rester en position le moins
longtemps possible; le desserrer lors du remplissage du premier tube (éviter la
stase veineuse prolongée).
Si plusieurs types de tubes sont nécessaires, respecter l’ordre suivant :
Citrate Sec (avec ou sans Gel) Hépariné EDTA Iodo-acétate ou Fluoré.
Le tube citrate ne doit jamais être rempli après l’héparine ou l’EDTA.
Son remplissage est obligatoire (respect du rapport anticoagulant / sang total)
- au moins à 80 % - pour le TP – TCA et Fibrinogène.
- au moins à 90 % - pour les autres paramètres d’hémostase
Aucun examen ne pourra être effectué sur un tube CITRATE (bleu) ou sur un
tube EDTA (violet) coagulé.
D’une manière générale, bien remplir les tubes, en particulier les tubes secs en
cas de dosage des bicarbonates.
► Lorsque le dernier tube est retourné et homogénéisé (retourné délicatement
2-3 fois), ou que le seringue est pleine, ôter lentement et avec précaution
l’aiguille de la veine.
En cas de prélèvement à l'écoulement libre, transvaser sans tarder le sang
dans les tubes sélectionnés.
En cas de prélèvement à la seringue, ne jamais pousser sur le piston – risque
accru d’hémolyse - : percer l’opercule des tubes sous vide avec l’aiguille.
Ne pas transmettre directement la seringue. C’est un "récipient" qui n'est pas
suffisamment étanche et sécurisé en raison du risque potentiel d'enfoncement
du piston lors de différentes manipulations.
► Homogénéiser les tubes par retournements successifs. Ne pas les agiter.
► Pendant ce temps, demander au patient (si son état le permet, sinon le
préleveur procède lui-même), de comprimer le site de ponction avec une
compresse ou un coton sec pendant le temps nécessaire. Ne pas faire replier
l’avant-bras pour éviter l’hématome.
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Adapter la durée de compression en fonction de l’état du patient (ex :
l’augmenter en cas de traitement anticoagulant)
► Désadapter et éliminer l’aiguille du corps de pompe ou de la seringue.
(encoche crantée dans le couvercle de la poubelle spéciale DASRI).
NE JAMAIS RECAPUCHONER
NE JAMAIS REPLACER LES AIGUILLES UTILISEES DANS LES BOITES
► Eliminer tout autre déchet (cotons, capuchons d’aiguilles, papiers…) dans
une poubelle pour déchets contaminés.
► Placer un pansement hypoallergénique après arrêt du saignement.
Cas particuliers
Prélèvement pour hémoculture :
- Prélever avant toute antibiothérapie.
- les hémocultures doivent être prélevées avant le reste du bilan
- Une fois la peau désinfectée, ne pas toucher le point de ponction.
- Désinfecter à l’alcool les bouchons en caoutchouc des flacons à hémoculture.
- Visser une épicrânienne sur un corps de pompe spécifique (diamètre adapté)
- Remplir les flacons avec 10 ml de sang (2 graduations maximum) pour les
adultes et 4 ml pour les flacons pédiatriques
Remplir le flacon aérobie (bouchon vert) avant le flacon anaérobie (bouchon
orange) impérativement.
Prélèvement par cathéter
Ce type de prélèvement peut se révéler nécessaire en cas de prélèvement
multiples au cours d’une même séance (HGPO, cycle hormonaux, prolactine)
surtout si le capital veineux du patient est faible.
En utilisant des gants à usage unique, introduire l’aiguille, placer un coton sous
l’orifice de la tubulure et fixer l’ensemble avec des sparadraps sans inclure
l’aiguille; ôter le garrot; retirer rapidement l’aiguille et visser prestement
l’obturateur. Celui-ci sera, lors de chaque manipulation ultérieure, replacé dans
son étui ou posé sur une compresse stérile.
Pour recueillir le sang, procéder comme pour l’écoulement libre.
Prélèvement pour groupage
Le prélèvement d’un groupage sanguin nécessite :
- 2 prélèvements sur tube EDTA effectués à des moments réellement
différents de préférence par deux personnes différentes.
- L’identification du patient doit être notée de façon manuscrite : nom de
naissance, prénom, nom marital, sexe et date de naissance.
Si possible, ces informations doivent être vérifiées à l’aide de la carte
d’identité.
c) Identification du prélèvement et Renseignements de la fiche de
transmission
Cliquer sur le lien suivant pour accéder au chapitre correspondant :
« Pourquoi, et comment, identifier les prélèvements ET les fiches de
transmissions ? »
CLIQUER ICI
POUR
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d) Conservation et transport des prélèvements
Après le prélèvement, des altérations de l'échantillon peuvent être induites par
le délai ou les conditions de stockage. La rapidité du transport, un temps de
stockage limité et le respect des conditions de température optimales
améliorent la qualité du résultat.
Les prélèvements doivent être transportés dans les kits de prélèvement fournis
par le laboratoire et à une température ambiante (< 25°C), sauf exigence
particulière indiquée dans le référentiel des examens, disponible sur le site
Internet du laboratoire (www.unibio.fr ou www.biomed34.fr).
Nous vous demandons de prendre toutes les dispositions pour respecter ces
impératifs.(Exemple : ne pas déposer les kits de prélèvement près de la
bouche de chauffage ou de climatisation de votre véhicule, sur le tableau de
bord,…).
Il est impératif d’utiliser les mallettes isothermes, qui vous ont été
fournies par le laboratoire, pour limiter les variations thermiques.
Il est également recommandé de stocker dans votre véhicule le minimum de
kits de prélèvement non-utilisés afin d’éviter d’éventuels chocs thermiques
préjudiciables à la bonne conservation des anticoagulants contenus dans les
tubes.
e) Critères d’acceptation des prélèvements sanguins
Le laboratoire se réserve le droit de refuser de prendre en charge des
prélèvements lorsque ceux-ci ne répondent pas aux critères d’acceptation
définis dans le référentiel des examens.
A l’exception des examens courants listés dans le tableau suivant, les
paramètres supportent en général des délais de 8 heures et davantage entre
l’heure de prélèvement et l’heure de pré-traitement au laboratoire.
Les collectes de prélèvements ont été organisées de telle sorte que ces délais
soient inférieurs à 8h (sauf anomalie tracée en non-conformité et traitée
comme telle)
Les paramètres pour lesquels les délais acceptables sont moindres imposent
une vérification des délais entre l’heure de prélèvement et l’heure de prétraitement au laboratoire.
[NB]
- Les délais acceptables peuvent varier en fonction du type de tubes utilisés et
du traitement pris par le patient ;
- le tableau précise également le niveau de remplissage minimum des tubes
pour les examens d’hémostase en fonction de l’examen et du type de tube
prélevé ;
- tous ces critères sont repris dans le référentiel des examens disponible sur
notre site Internet (www.unibio.fr ou www.biomed34.fr).
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Délai entre le prélèvement et le pré-traitement
Examen
TP
TCA, TCK
FIB
DDI
Héparine, AXA
Facteur VIII
Autres cofac., ATIII
Volume
80%
80%
80%
80%
80%
90%
90%
90%
90%
90%
Tube
Alt.
Citrate
CTAD
Citrate
Citrate
CTAD
Citrate
CTAD
Citrate
CTAD
Citrate
CTAD
Citrate
CTAD
Citrate
CTAD
K+
Glycémie
Phos, Lithium, Dépak.
Carbamaz.(tegretol)
Genta.
Vanco.
Lactate
Gel
Gel
Gel
Gel
Gel
Gel
Fluoré
T21
SST BD
<1H
<2H
<4H
<6H
12H Si le délai entre le prélèvement et
l’arrivée sur le site exécutant est
patient sous Héparine
supérieur aux délais ci-contre :
patient sans Héparine
congeler un aliquote avec une étiquette
avec ou sans Héparine
primaire
8H
Tube primaire à part.
Congeler un aliquote avec une étiquette
secondaire
(Carré : pas de tube à part pour hep, AXA)
Centrifugation
Genta et Lactate :
Aliquotage / étiquette secondaire
Centrifugation / Congélation
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B. Recommandations pour les prélèvements bactériologiques
Le laboratoire met à votre disposition des écouvillons et/ou kits de
prélèvements adéquats. Comme pour les tubes de prélèvements sanguins,
nous vous demandons de vérifier régulièrement la péremption de ce matériel
et de nous le retourner pour échange si besoin.
Les principes d’identification des échantillons et de remplissage des fiches de
transmissions sont identiques. Nous vous proposons ci-dessous des
recommandations pour les prélèvements les plus courants.
Afin de ne pas contaminer le prélèvement – et pour minimiser les risques
d’accident d’exposition aux agents biologiques -, il est impératif que le
préleveur s’équipe de gants à usage unique lorsque le recueil n’est pas effectué
par le patient lui-même.
Afin d’optimiser l’interprétation des résultats, des Questionnaires Cliniques
pour les Prélèvements Bactériologiques sont à renseigner et à renvoyer au
laboratoire avec le prélèvement. Ceux-ci sont disponibles sur le site internet
www.unibio.fr ou www.biomed34.fr (onglet Espace Pro/ Fiche de
Renseignements Cliniques et Préconisations/ Télécharger le fichier).
a) Examen cytobactériologique des urines
Le recueil des urines pour effectuer un ECBU ne nécessite pas d'être à jeun.
Le prélèvement peut s'effectuer à tout moment de la journée à condition qu'il
soit éloigné de 4h de la dernière miction.
En cas de demande conjointe à un prélèvement vaginal ou urétral, le recueil
doit s'effectuer en dernier lieu.
Le volume minimum nécessaire est d'environ 1 ml.
Toute la démarche à suivre par le patient est décrite dans le document
« Recueil des Urines pour ECBU » également disponible avec les questionnaires
Cliniques sur le site internet.
b) Prélèvements génitaux et urétraux
Le recueil doit de préférence s'effectuer avant toute toilette intime, tout
traitement local et tout rapport sexuel. Le préleveur doit noter la nature de
l’écoulement éventuel, car il constitue un des éléments de diagnostic.
Exemple chez la femme :
Ecoulement
En faveur de
Pus épais jaune verdâtre
Gonococcie
Leucorrhées blanches, granuleuses et abondantes
Mycose
Pertes mousseuses blanches jaunâtres, et abondantes
T.vaginalis
Leucorrhées grises malodorantes
Vaginose (Gardnerella)
Pendant l'ensemble des manipulations, le préleveur doit s’assurer que le
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patient ne ressente pas de douleur trop aigue.
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1) Pour un prélèvement vaginal :
 installer la patiente le plus près du bord du fauteuil, puis la faire allonger.
 dégager le sphincter vaginal et engager délicatement le spéculum stérile
fermé (à usage unique); le faire pivoter de 90° puis l'ouvrir par pression sur
les poignées pour voir le col de l'utérus.
 modifier l'enfoncement ou l'inclinaison jusqu'à ce que le col soit visible.
 bloquer le spéculum.
Si l’ordonnance précise plusieurs examens, merci de respecter le prélèvement
dans l’ordre ci-dessous :
 Recherche de mycoplasmes et/ou de Chlamydia
 Bactériologie classique (prélèvement vaginal)
Pour réaliser les prélèvements de ces deux types d’examen, se référer aux
« Préconisations pour l’Utilisation dans les Prélèvement Génitaux » disponibles
sur le site internet www.unibio.fr ou www.biomed34.fr (onglet Espace Pro/
Fiche de Renseignements Cliniques et Préconisations/ Télécharger le fichier).
 Recherche d'herpes : repérer les vésicules et prélever à l'aide d'un kit
spécifique fourni sur simple demande
2) Pour le prélèvement vulvaire :
Après avoir dégagé la vulve, prélever un écouvillon en insistant sur les zones
irritées s’il y a lieu, puis casser l’écouvillon dans le milieu de transport fourni
par le laboratoire.
3) Pour le prélèvement urétral :
 demander au patient de s'asseoir au fond du siège en calant son bassin au
dossier (cette position permet de contrôler le réflexe de recul lors du
prélèvement).
 demander au patient de faire sortir du pus, le cas échéant, par pression sur
le gland.
 Pour recueillir le prélèvement urétral sur l’écouvillon, se référer aux
« Préconisations pour l'Utilisation des Ecouvillons dans les Prélèvements
Génitaux ».
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4) Cas particulier recherche des HPV : papillomavirus
Les prélèvements destinés à cette recherche particulière doivent être effectués
grâce à un kit spécifique fourni par le laboratoire sur simple demande.
c) Prélèvements conjonctival
Le préleveur interroge le patient sur les raisons de sa demande (contrôle,
récidive éventuelle, intervention chirurgicale…) et sur un traitement éventuel
(antibiotique..) pouvant influer le résultat de l’examen et l’interprétation des
résultats.
Ce type de prélèvement est particulièrement délicat car les risques de
contamination (notamment par les cils) sont importants. Il est donc primordial
de bénéficier de l’entière collaboration du patient.
Prélever 1 écouvillon avec milieu de transport.
Attention car le prélèvement est relativement désagréable.
Modalité de recueil
Quelle que soit la nature du prélèvement (larmes, écoulement…) il n’y a pas de
conditions préalables mais il faut éviter tout usage de gouttes ophtalmiques
avant le prélèvement.
Le préleveur installe confortablement le patient, puis :
- demander au patient de regarder en l’air,
- maintenir les paupières supérieures et inférieures bien ouvertes avec le
pouce et l’index,
- découvrir le cul de sac conjonctival inférieur,
- tamponner l’écouvillon 2 à 3 fois (sans trop insister : le prélèvement est
douloureux)
d) Prélèvements de peau et phanères
Le préleveur interroge le patient sur les raisons de la demande (contrôle,
récidive, éventuelle intervention chirurgicale…) et un traitement éventuel
(antibiotique, antifongique..) pouvant influer le résultat de l’examen et
l’interprétation des résultats.
Le prélèvement doit être réalisé avant tout traitement spécifique, qu'il soit
local ou général. Dans le cas contraire, une abstention thérapeutique est
nécessaire, de 15 jours pour les lésions de la peau ou des plis et de 2 mois
pour les ongles.
Il n’y a pas de quantité minimale requise, tout dépend de la nature du
prélèvement.
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1) Recueil de squames
Utiliser un vaccinostyle ou une curette pour gratter les squames, si possible en
périphérie de la lésion et le recueillir dans une boite de Pétri disposée juste audessous.
2) Recueil de cheveux
En cas de suspicion de teigne (ce diagnostic peut être orienté par la réalisation
d’un examen à la lumière de Wood pour ceux qui dispose du matériel), utiliser
une pince à épiler pour recueillir les cheveux au centre et en périphérie des
lésions, en prenant soin de les prélever si possible avec le bulbe puis les placer
dans une boite de Pétri.
[NB] : pour ces deux types de recueil, on peut aussi frotter les « régions
suspectes » (zone d’alopécie) avec :
- écouvillon: à sec si les lésions suintent ou humidifié à l’eau physiologique
stérile sur une zone «sèche».
- une curette pour recueillir des squames.
3) Recueil au niveau des ongles
Eliminer les parties mortes de l’ongle avec une pince ; compléter le
prélèvement en grattant sous l’ongle le plus profondément possible avec une
curette de Broque à la jonction ongle sain/malade.
4) Recueil au niveau des cils
Pour la recherche de DEMODEX, arracher quelques cils de la paupière sup et
inf en choisissant ceux dont le follicule est irrité (rouge et/ou gonflé) puis les
déposer dans une boite de Pétri.
e) Prélèvements oropharyngés
récidive, programmation d’une intervention chirurgicale) et la prise éventuelle
d’un traitement (antibiotiques, levure) pouvant influer sur le résultat et/ou sur
l’interprétation de l’examen.
Pour tout prélèvement prendre un écouvillon avec milieu de transport.
Quel que soit la localisation du recueil des sécrétions, il n’y a pas de conditions
préalables à remplir.
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1) Prélèvement de gorge
- demander au patient de tirer la langue et de dire « aaaaah » afin de dégager
les amygdales et l’oropharynx
- abaisser la langue (à l’aide d’un abaisse-langue)
- frotter avec l’écouvillon chaque amygdale et éventuellement le pharynx.
2) Prélèvement lingual et ou buccal
- gratter la langue avec un abaisse-langue
- récupérer les « éléments » avec l’écouvillon.
3) Prélèvement au niveau des fosses nasales
Introduire puis faire pivoter plusieurs fois l’écouvillon dans chaque narine.
4) Prélèvements particuliers
- Angine de Vincent : effectuer le prélèvement au niveau des ulcérations d’un
pilier ou du pharynx
- Angine virale explicite : frotter les vésicules ou les ulcérations avec un
écouvillon, le transvaser dans un milieu de transport spécifique.
- Coqueluche par PCR : demander au laboratoire un kit de prélèvement adapté
et la documentation décrivant le mode opératoire.
La recherche de coqueluche par PCR peut être faite à la place d’une sérologie
lorsque le patient tousse depuis moins de 3 semaines et n’a pas été vacciné
dans les 3 dernières années.
f) Prélèvements de Pus
récidive, éventuelle intervention chirurgicale…) et le traitement éventuel
(antibiotique..) pouvant influer sur le résultat de l’examen et/ou l’interprétation
des résultats.
Pas de quantité minimale requise : tout dépend de la nature du prélèvement,
les écouvillons prélevés doivent être cassés dans le milieu de transport.
Quelle que soit la nature du prélèvement, il n’y a pas de conditions préalables
à remplir.
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1) Abcès, écoulement spontané, morsure, escarre, plaie opératoire
- Nettoyer au sérum physiologique
- Appuyer au niveau de l’orifice ou de la plaie, pour récupérer sur l’écouvillon le
maximum de « matière » (on peut aussi demander au patient de faire sourdre
lui-même les sérosités par pression en évitant de contaminer le prélèvement)
2) Conduit auditif externe
Enfants :
- bloquer la tête du patient pendant le prélèvement
- éliminer les débris et croûtes à l’aide d’un écouvillon sec, humidifier avec de
l’eau physiologique stérile
- éclairer le conduit auditif
- introduire l’écouvillon délicatement (s’il en dispose, le préleveur s’aide d’un
miroir de clar ou d’un otoscope) en tirant le lobe de l’oreille vers le bas pour
faciliter la vision du conduit et du tympan
- recueillir les sécrétions
Si l’oreille « coule », le recueil s’effectue en introduisant l’écouvillon dans le
1/3 externe du conduit
Adulte :
Pour éviter toute manipulation trop douloureuse, le patient peut procéder luimême après que le préleveur lui aura expliqué le mode opératoire : introduire
délicatement et profondément l’écouvillon tout en le tournant.
g) Ponction articulaire
Transférer systématiquement l’échantillon biologique, immédiatement après
son prélèvement en seringue, dans des flacons adaptés afin que nous puissions
procéder à son acheminement et à son analyse dans des conditions optimales
et sûres.
Pour cela, utiliser des :
 TUBES CITRATES (BOUCHON BLEU CLAIR), pour la recherche de
microcristaux.
 TUBES HEPARINE (BOUCHON VERT), à rajouter pour toute analyse
biochimique.
 FLACONS STERILES ou FLACONS D’HEMOCULTURE, pour la cytobactériologie.
h) Critères d’acceptation des prélèvements bactériologiques
Comme pour les prélèvements sanguins, le laboratoire se réserve le droit de
refuser de prendre en charge des prélèvements bactériologiques lorsque ceuxci ne répondent pas aux critères d’acceptation définis dans le référentiel des
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examens et dans le tableau ci-dessous.
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Examen
Matériel
<2H
<4H
<6h
<12H
<24H
T° ambiante
Flacon stérile (adulte) ou poche
(nourrisson)
EBCU
<48H
2-8°C
Tube boraté
T° ambiante
Ecouv. avec milieu de transport
PV
T° ambiante
Ecouv. sans milieu de transport
PU
T° ambiante
Tous les autres prélèvements sur écouv. avec milieu de
transport
T° ambiante
Spermoculture
Flacon stérile
Coproculture
standard et parasito
des selles
Flacon stérile
T° ambiante
T° ambiante
2-8°C
Milieu de transport ou de concentration
T° ambiante
C.difficile
Flacon stérile
2-8°C
Rota/Adenovirus
Flacon stérile
2-8 °C
bronchopulmonaires
Flacon stérile
T° ambiante
Liquide de ponction
Flacon stérile ou Flacon d'hémoculture
T° ambiante
LCR
T° ambiante
Hémoculture
Flacon hémoculture
T° ambiante
Collection fermée
T° ambiante
Flacon stérile
T° ambiante
Flacon stérile
T° ambiante
Mycologie
Flacon stérile ou boîte de Petri
T° ambiante
Chlam. : PU/PV
2-25 °C
Flacon stérile
T° ambiante
Milieu de transport
2-25 °C
Liquide gastrique,
placenta
Matériel
implantable
er
Chlam.: urine 1 jet
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5. LES PRELEVEMENTS REALISES PAR LE PATIENT
En dehors des prises de sang et de certains prélèvements bactériologiques
réalisées par des personnes habilitées (IDE, biologistes, personnel de
laboratoire qualifié…), les patients sont amenés à réaliser eux-mêmes certains
types de prélèvements.
Afin d’optimiser ces recueils, le laboratoire met à disposition de ses patients
des fiches d’aide à leur correcte réalisation.
Ces
fiches
sont
téléchargeables
sur
le
site
Internet
du
laboratoire www.unibio.fr ou www.biomed34.fr (onglet Espace Pro/ Fiche de
Renseignements Cliniques et Préconisations/ Télécharger le fichier).
Afin que le laboratoire dispose d’éléments suffisants à la correcte interprétation
du dossier, ces fiches sont accompagnées d’un questionnaire clinique.
Le patient doit le renseigner et le retourner au laboratoire en même temps que
son prélèvement.
Si le patient éprouve des difficultés à remplir ce formulaire, il peut contacter le
laboratoire qui se chargera de l’orienter.
6. LES PRELEVEMENTS A CARACTERE PARTICULIER
A. Les tests dynamiques
Certains examens nécessitent de prévoir un temps de réalisation plus ou moins
important (ex : HGPO), ou un jour précis. Pour l’ensemble de ces tests, la
réalisation au laboratoire est recommandée.
a) HGPO (HyperGlycémie Provoquée par voie Orale)
Principe : stimuler la sécrétion d’insuline et freiner la sécrétion hypophysaire
de la GH.
Indications : dépistage des états diabétiques, évaluation de l’insulinosécrétion, diagnostic de l’acromégalie et suivi thérapeutique, confirmation de
diabète gestationnel, diagnostic étiologique des hypoglycémies.
Dosage : glycémies à 4 temps.
Modalités de l’examen :
- Le patient doit être à jeun depuis 12 h.
- Poser si possible un cathéter, prélever un tube fluorure et faire un recueil
d’urine. C’est le temps 0. Noter T0 sur le prélèvement en plus de
l’identification.
- Administrer par voie orale la dose de glucose prescrite.
- Prélever ensuite aux temps : T60, T120 et T180 minutes sur tube fluorure,
bien noter les temps sur les tubes en plus de l’identification.
- Effectuer un recueil d’urine en fin de test.
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b) Dépistage du diabète gestationnel
Principe : évaluation de la glycorégulation.
Indications : dépistage du diabète gestationnel.
Dosage : glycémie.
Modalité de l’examen :
- La patiente doit être à jeun depuis 12h.
- Prélever un tube fluorure pour une glycémie initiale T0.
- Administrer à la patiente par voie orale la dose de glucose prescrite.
- Prélever de nouveau aux temps : T60, T120 sur tube fluorure ; bien noter les
temps sur les tubes en plus de l’identification.
c) Prolactine
Dosage : prolactine.
Conditions initiales : à jeun de préférence.
Pas de stimulation mammaire dans les heures précédant le prélèvement.
Exemple : palpation, allaitement,…
En début de cycle chez la femme :
Pendant les règles (1er au 5ième jour du cycle).
Prélèvement entre 8 et 10H et activité normale (pas d’activité intensive).
Mise en oeuvre : au repos pendant tout le test. Selon la prescription,
procéder comme décrit ci-dessous :
- 1 prélèvement prescrit :
Attendre 20 minutes au repos et réaliser un seul prélèvement.
- 2 prélèvements prescrits à ¼ h d’intervalle – Prescription à T0 et T15 (ou
20minutes) :
o Réaliser le 1er prélèvement, noter T0 en plus de l’identification.
o Laisser au repos pendant le temps choisi (15 ou 20 min).
o Réaliser le 2nd prélèvement et noter le temps sur le tube en plus de
l’identification.
d) Hélikit
Principe : recherche de la présence d’hélicobacter pilori; suivi thérapeutique.
Dosage : envoyé au laboratoire sous-traitant spécialisé.
Conditions initiales : Arrêt de tout traitement antibiotique depuis 4
semaines, arrêt des anti-sécrétoires depuis 2 semaines, être à jeun, ne pas
fumer.
Mise en oeuvre : Suivre les indications fournies avec le kit.
B. Les suivis thérapeutiques
Dans le cas de Dosages de médicaments (Digoxine, Dépakine, Théophylline,
Ciclosporine, Prograf etc.), le prélèvement doit être réalisé AVANT la prise de
médicament (sauf avis contraire du médecin).
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a) Traitement Antibiotiques – Protocole de Prélèvement
Conformément à la nomenclature des actes de biologie, toute demande doit comporter : taille et poids du patient, posologie, date et heure du prélèvement,
taux résiduel ou pic
NORMES
AMIKACINE
Recommandations
ANSM/AFSSAPS de mars 2011 (*)
AVANT INJECTION.
Taux RESIDUEL
APRES INJECTION.
Taux au PIC de concentration
48h après début du traitement
puis 2 fois/semaine si tt
>5jours ou IR :
Conseillé après 1ère injection chez patients à risque (IR,
choc septique, volume distribution augmenté…)
Dose unique journalière recommandée.
Perfusion IV de 30 minutes.
30 minutes après fin de perfusion : 60 à 80 mg/l
Efficacité maximale si pic >ou= 8-10 x CMI
Conseillé après 1ère injection chez patients à risque (IR,
choc septique, volume distribution augmenté…)
Dose unique journalière recommandée.
Perfusion IV de 30 minutes.
< 2.5 mg/l
(Prédit la toxicité)
GENTAMICINE
Recommandations
ANSM/AFSSAPS de mars 2011 (*)
48h après début du traitement
puis 2 fois/semaine si tt
>5jours ou IR :
< 0.5 mg/l
(Prédit la toxicité)
VANCOMYCINE** Stabilisation du taux sanguin juste
avant dosage (état d’équilibre) :
48H après le début du tt
Meilleur paramètre prédictif de
l’efficacité et de la toxicité
30 minutes après fin de perfusion : 30 à 40 mg/l
Efficacité maximale si pic >ou= 8-10 x CMI
Toxicité
Taux résiduel
> 2.5 mg/l
Non corrélée à
la Cmax
Taux résiduel
> 0.5 mg/l
Non corrélée à la
Cmax
>10 mg/l
(jusqu’à 15-20 mg/l pour
améliorer la pénétration dans
les infections compliquées :
endocardites, méningites…)
Taux résiduel
Ne prédit ni l’efficacité ni la toxicité.
> 40 mg/l
(*)Mise au point sur le bon usage des aminosides administrés par voie injectable (Gentamicine, Tobramycine, Nétilmicine, Amikacine) AFSSAPS mars 2011
(**) The medical letter on drugs and therapeutics « dosage and monitoring vancomycine ». 2009
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b) Traitement à l’Héparine – Protocole de prélèvement
Conformément à la nomenclature des actes de biologie, toute demande doit comporter : taille et poids du patient, posologie, date et heure du prélèvement,
taux résiduel ou pic.
 ATTENTION : Les dosages d’Héparine et d’HBPM doivent être prélevé sur tube CTAD ou parvenir dans l’heure au laboratoire.
TRAITEMENTS PREVENTIFS
Nature de
l’Héparine
Posologie
Hep. non fractionnée
(Standard)
200 UI/kg/24h
Voie d’administration
et fréquence
S.C., 2 à 3 injections/j
de 5000 UI
Heure du
prélèvement
1h avant l’injection
suivante (résiduelle)
entre 2 injections (pic)
FRAXIPARINE :
7500 UI.AXA « choay » /j
Résultats biologiques
habituellement observés
TCA : isocoagulable
HEP : < 0,1 UI/ml
TCA = TCA témoin + 12 sec. max
HEP = 0,1 à 0,15 UI/ml
TCA : non modifié
Act AXA : < 0,3 UIAXA/ml
(1 UI AXA « choay » = 0,41 UIAXA )
2850 UI.AXA/j
2000 UI.AXA
LOVENOX
Toujours au Pic
S.C., 1 injection/j
4000 UI.AXA
Heparine de bas
poids moléculaire
(HBPM)
3ème ou 4ème heure
suivant l’injection
2500 UI.AXA
FRAGMINE
5000 UI.AXA
INNOHEP
2500 / 3500 ou 4500 UI.AXA selon contexte
4ème ou 6ème heure
TCA : non modifié
Act AXA : 0,1 à 0,3 UIAXA/ml
TCA : non modifié
TCA : non modifié
TCA : non modifié
TCA : non modifié
Act AXA < 1,5 UIAXA/ml
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TRAITEMENTS CURATIFS
Nature de l’Héparine
Hep. non fractionnée (héparine sodique)
Hep. non fractionnée (héparine calcique :
calciparine)
Posologie
400 à 600 UI/kg/24h
Voie d’administration
et fréquence
Heure du
prélèvement
I.V., perf. Continue
Bolus initial conseillé (80 UI/kg)
4h après début perfusion
puis indifférent
S.C., 2 à 3 injections / j
entre 2 injections (pic)
Résultats biologiques
habituellement
observés
TCA : 2 à 3 fois le Témoin
Act AXA : 0,3 à 0,7 UI/ml
TCA : 2 à 3 fois le Témoin
Act AXA : 0,3 à 0,7 UI/ml
ème
Mesure de l’activité anti-Xa uniquement chez patients à risque de surdosage (IR, poids extrêmes) ou risque hémorragique, après la 2 ou 3ème injection.
FRAXIPARINE
85 UI/kg/12h
Act AXA : 1.0 +/- 0.2 UI/ml
ème
ème
au pic : à la 3 ou 4 h.
FRAGMINE
Act AXA : 0,6 +/-0.25 UI AXA/ml
suivant l’injection(si patients à
100 à 120 UI/kg/12h
(surdosage 1UI/ml)
S.C., 2 injections / j
risque)
Héparine de bas poids
LOVENOX
Act AXA : 1.20 +/- 0.17 UI/ml
moléculaire (HBPM)
100 UI/kg/12h
INNOHEP
Act AXA : 0.87 +/- 0.15 UI/ml
175 UI/kg/24h
S.C., 1 injection/j
entre les 4ème et 6ème h.
Surdosage : 1.5 UI/ml
FRAXODI
Act AXA : 1.34 +/- 0.15 UI/ml
500 UI/kg/24h
171 UI/kg/24h
Surdosage 1.8 UI/ml
Sources : Diagnostica Stago, Dorosz 2006 ;
Héparine, dérivés hépariniques et antagonistes de la vitamine K : maniement, surveillance biologique, gestion des complications, GEHT décembre 2012.
Prévention et traitement de la maladie thrombo embolique veineuse en médecine, Journal des maladies vasculaires, 2010.
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7. DECHETS A RISQUE INFECTIEUX - RISQUES D’A.E.S
L’élimination des déchets à risques infectieux (DASRI) est sous la
responsabilité du préleveur.
Cette élimination est règlementée.
Pour connaître les définitions, les modalités de stockage, puis d’élimination, de
ce type de déchets, cliquer sur le lien suivant correspondant au « Guide de
l’ARS/DASRI »
- Il est rigoureusement interdit de retourner au laboratoire tout dispositif de
prélèvement souillé (aiguille, spéculum…) ou tout dispositif perforant et/ou
coupant – même non souillé - ayant été extrait de son emballage d’origine.
- En raison des risques d’enfoncement accidentel de son piston, il est
rigoureusement interdit de faire parvenir au laboratoire toute seringue, munie
ou non de son aiguille, capuchonnée ou non.
Pour les professionnels de santé, il existe une liste d’organismes collecteurs de
DASRI.
Pour les patients en auto-traitement (diabétiques insulino-dépendant, patient
sous traitement héparinique …), il existe des points de collecte de proximité.
 Pour la région Languedoc Roussillon, les informations correspondantes sont
disponibles sur le site de l’ARS. Pour y accéder cliquer sur le lien suivant :
« Collecte des DASRI »
Pour les autres régions (PACA), contacter directement l’ARS.
Le non-respect à l’ensemble de ces règles expose les personnes à des risques
accrus d’accident avec exposition au sang (A.E.S).
En cas d’accident de ce type, les mesures à prendre sont disponibles sur le site
du laboratoire www.unibio.fr ou www.biomed34.fr (onglet Espace Pro/ Maitrise
des risques/ Télécharger le fichier).
8. STOCKAGE DES ECHANTILLONS EXAMINES
Les échantillons examinés au laboratoire font l’objet d’une conservation afin de
permettre des contrôles ou des rajouts d’examens éventuels. Les délais et
conditions de stockage dépendent des paramètres, c’est pourquoi il vous est
demandé de contacter le laboratoire pour tout renseignement.
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Manuel de prélèvement

Transcription

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