le systeme de diagnostic fecal en parasitologie

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LE SYSTEME DE
DIAGNOSTIC FECAL EN
PARASITOLOGIE
Le systėme Biosepar de diagnostic fécal en parasitologie
Le systėme Biosepar a été développé par le groupe de recherche en parasitologie de l'institut d'hygiéne
et de microbiologie Max von Pettenkofer de l'Université de Munich et satisfait à de hautes exigences.
L'utilisation du systėme Biosepar correspond aux exigences, des ministėres de la Santé, en Europe et
aux USA ainsi qu'à celles des éminents scientifiques, médecins en laboratoire, microbiologistes et
médecins en maladies infectieuses.
Des oeufs de vers, larves, protozoen (kystes et formes végétatives) sont diagnostiqués à partir des selles
mais il est également possible de Ies saisir et conserver à partir des liquides corporels tels que l'urine et
le liquide duodénal.
Par la suite, l'echantillon sera traité en vue du diagnostic, sans aucun risque de contamination
bactérienne ou de décomposition, et la morphologie nécessaire des agents est conservée dans sa totalité.
C'est pour cela que le systėme Biosepar est tres bien adapté en vue de contrôle qualitatif et s'adresse
aussi bien à la médecine humaine qu'à la médecine vétérinaire.
Les principales valeurs du systėme Biosepar reposent sur la rationalisation et la standartisation pour
garantir un procédé rationnel au niveau des coûts et performant au niveau du diagnostic. Le systéme a
été concu de facon à utiliser tous Ies appareils et accessoires. Si ceux-ci ne sont pas utilisés tous
ensemble, le systėme permet tout de même d'effectuer toutes les recherches nécessaires, mais étaler
dans le temps. Ce procédé est particulièrement important pour la mise en application du système dans
Ies pays du Tiers Monde, pour les projets de médecine humaine et vétérinaire et les recherches
scientifiques en epidémiologie. Bien que le système Biosepar soit basé sur le procédé MIFC, il est
compatible avec la méthode de flotation.
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AVANTAGES
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conditions d'hygiènes optimales, protection contre l'infection et la contamination dans toutes Ies phases
de travail, y compris pendant le transport. Stérilisation peu de temps après le prélèvement (HIV, hépatite,
salmonelle...).
matière fécale de haute qualité des le prélèvement et sans conservation au chaud ou au froid nécessaire.
De cette manière, résultat optimal, possibilité de grands rendements et contrôles de qualité d'excellentes
qualifications.
réduction des coûts grâce à un gain de temps et manipulation allégée pour les patients et le personnel de
laboratoire.
grande flexibilité dans lorganisation du travail dû à la longue conservation du prelevement.
pas d'incommodation par l'odeur.
prix d'envoi peu élevé- 2 tubes de transport prennent la place de 2 tubes d'analyse sanguine.
le système est adapté à la nouvelle réglementation postale au niveau européen.
Le matériel de prélèvement est composé d'un tube de transport, qui est rempli d'un médium A de
conservation et de transport. Pour aider à prélever la matière fécale, une cuillère en bois pour les
prélèvements difficiles ou bien une pipette sont disponibles. La partie D est employée pour le traitement
en laboratoire et est composée d'un tube de traitement dans lequel un filtre est intégré. Le bouchon sur
le tube de transport seit à garder le filtre propre et s'enlève juste avant l'utilisation.
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LE PRELEVEMENT
Le prélèvement s'effectue à l'aide de la petite cuillère à trous qui est incorporée au bouchon du tube de
transport. Une cuillère en bois ou bien une pipette, pour les selles liquides, peuvent être également
utilisées.
INTRODUCTION DU PRELEVEMENT
La petite cuillère à trous doit être au maximum remplie à ras bord et ensuite introduit avec précaution dans le
tube rempli de médium A. Bien fermer le tube.
Important:
ne pas respirer Ies vapeurs du médium A. Nettoyer simplement à l'eau Ies parties concernées. Le mèdium A
absorbé en grande quantité (à partir de 20-30 ml) peut être toxique pour l'organisme.
TRANSPORT ET ENTREPOSAGE DE L'ECHANTILLON
Après avoir bien fermé le tube, le secouer 1-2 fois. L'échantillon est à présent prêt pour être expédié ou
bien conservé. Dans le même temps, toutes les bactéries sont tuées et l'envoi est alors possible. Toute
contamination devient alors impossible.
Important:
il n'est pas nécessaire de stocker le tube au frais ou à la chaleur, éviter cependant les rayons directs du soleil.
Entreposer le tube ni au dessus d'un chauffage ni dans un périmètre chaud. L'échantillon peut être entreposé au
minimum 8 semaines dans de bonnes conditions de conservation.
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QUANTITE OPTIMALE DE MATIERE ANALYSABLE
La Suspension de selles ne doit pas dépasser la bordure supérieure du champ blanc du tube. Après avoir
bien secoué le tube, se dégage alors, de facon homogène et en quantité suffisante, la matière, nécessaire
pour l'analyse: le concentré de parasites.
Important:
éviter la surcharge du tube de transport. De cette facon, vous allègerez le travail en laboratoire tout en permettant de
faire des recherches en parasitologie d'une qualité optimale.
LE TRAITEMENT EN LABORATOIRE
Ouvrir le tube de transport. S' il est nécessaire, remuer la suspension de selles en soulevant la petite
cuillère à 10 ou 15 mm du bord du tube, puis la rabaisser.
Important:
ne pas soulever la petite cuillère au dessus du liquide. Aucun risque de contamination en cas d'éclaboussure. Les
parties concernées seront simplement nettoyées avec de l'alcool dilué dans de l'eau.
ELIMINATION DU BOUCHON DU TUBE DE TRANSPORT
Se débarasser du bouchon et de sa petite cuillère maintenant vide.
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PHASE DE SEPARATION
Verser avec précaution et lentement, 1,25 ml de médium B dans le tube de transport.
Important:
le médium B est inflammable, éviter tout contact avec une flamme. Les vapeurs ne doivent pas être inhalées. La
conservation au froid est recommandée.
PHASE DE COLORATION DES PARASITES
Ajouter 0,2 ml de médium C
ASSEMBLAGE DU TUBE DE TRANSPORT ET DU TUBE DE TRAITEMENT
Assembler au tube de transport à présent rempli, le tube de traitement avec son filtre.
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DÉBUT DE LA FILTRATION ACTIVE, PROCEDURE POUR SECOUER
Tourner à 180° tout le système et le secouer avec un appareil en un nombre maximal de tours pendant
environ 10-15 secondes. Il est suffisant si vous pressez legèrment le côté supérieur du tube en tenant
fèrme le système dans le même temps.
Au bout de cette procédure vous avez déjà la moitié de la suspension dans le fond du tube pour la
transformation.
Si vous n´avez pas dáppareil pour secouer, secouez le système couplé avec la main pendant environ 30
secondes (sans illustration).
FIN DE LA PHASE DE FILTRATION
Afin de vider entièrement le contenu du tube de transport dans le tube de traitement le secouer (comme un
thermomètre). La filtration continue et permet d'accroître encore la quantité de concentration de parasites. La
suspension se maintient 1 à 2 minutes.
SEPARATION DES DIFFERENTES PHASES
La suspension ainsi filtrée doit être pendant 5 à 10 minutes centrifugée à 1500 g ou bien laisser simplement le
système pendant quelques heures reposer afin que les différentes parties se distinguent clairement.
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FORMATION DE LA PHASE
Après avoir centrifugé, 4 différentes couches se forment dans le tube de traitement.
SEPARATION DU TUBE DE TRANSPORT ET DU FILTRE
Se débarasser du tube de transport et du filtre une fois la filtration terminée.
ISOLATION DU CONCENTRE DE PARASITES
La couche supérteure du tube doit être enlevée à l'aide d'un coton tige. Laisser décanter le tube de traitement et le
laisser bien égoutter. Ne surtout pas secouer sinon le concentré de parasites pourrait être de nouveau mélangé.
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SUSPENSION DU CONCENTRE DE PARASITES
Pour la diluition remplir environ 0,1-0,2 ml de solution phisiologique NaCl. Pour conserver la préparation à long
terme à sa place Medium A. Si on désire d´obtenir une coloration successive des parasites il faut ajouter un peu de
Medium C (1-2 gouttes).
A présent bien mélanger le concentré de parasites se trouvant dans le fond du tube à l'aide d'une pipette en aspirant
de facon répétée.
Important:
si le concentré est trop épais, le diluer.
PREPARATION POUR LE DIAGNOSTIC AU MICROSCOPE
Pour le diagnostic il faudrait examiner au moins deux porteurs par objectif.
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PRELEVEMENT SOUS DE CONDITIONS PARTICULIERES
Le prélèvement peut s'effectuer à l'aide d'une cuillère en bois. Le matériel utilisé se désagrège tres vite au contact de
l'eau et n'est pas nocif pour l'environnement.
Important:
la cuillère ne peut en aucun cas être de nouveau utilisée, pour n'importe quelle phase de travail.
PRELEVEMENTS DE SELLES LIQUIDES, RECHERCHES EN PARASITOLOGIE A PARTIR
D'URINE ET AUTRES LIQUIDES CORPORELS
Le prélèvement de selles liquides ou d'urine peut s'effectuer à l'aide d'une pipette. Le contenu de la
pipette doit être vidé avec précaution dans le tube de transport qui contient déjà le médium A. En ce qui
concerne les selles accompagnées de sang et de glaires, utiliser la cuillère en bois pour les introduire
dans le tube de transport. Procéder de la même manière pour l'urine et le liquide duodénal: centrifuger
pendant 5 minutes maximum entre 10 et 20 ml de matière fécale fraîche. Par la suite, prélever 0,5 ml à
l'aide de la pipette et verser dans le tube de transport déjà rempli de médium A.
Important:
la pipette doit être remplie au maximum à 0,5 ml. Elle ne doit en aucun cas être de nouveau réemployée. Après
usage, la pipette doit être enveloppée dans du papier ou bien dans un sac en plastique et ainsi jetée. Le matériel peut
sans risque être brûlé car il ne contient pas de matière halogène.
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REMPLISSAGE DU TUBE DE TRANSPORT AVEC LE MEDIUM A
Si le tube de transport est livré vide; procéder de la facon suivante pour le remplir: ouvrir le tube de
transport et y verser avec précaution 3,5 ml de médium A.
Important:
la qualité des recherches sera d'autant meilleure si Ies doses sont respectées.
COMPATIBLE AVEC LES MOYENS D'ACTIONS
Le système Biosepar est ainsi concu que toutes les parties peuvent ètre comme n'importe quel tube à essai utilisées.
Avantage:
un maximum de recherches avec le système Biosepar peuvent être menées dans un espace restreint.
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COMPATIBLE AVEC LE MATERIEL DE LABORATOIRE
Le système Biosepar est adapté pour pouvoir être utilisé par le matériel destiné à centrifuger le sang.
Prener des appareils à centrifuger qui sont appropriés pour des tubes ayant 25-26 mm de diamétre, ou
bien des appareils qui peuvent recevoir des tubes standarts d'analyses sanguines et dont le bord
supérieur ne dépasse pas 55 mm.
Si vous avez des questions à ce sujet, contactez votre vendeur de centrifugeuse, un magasin
spécialisé en appareils de laboratoire ou l'entreprise Biosepar.
LES MEDIUMS A, B ET C
Afin de doser correctement les différents médiums A, B et C est nécessaire d'utiliser un appareil
particulièrement adapté, avec un doseur réglable, que l'entreprise Biosepar peut fournir.
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ENVOI DE LA MATIERE FECALE DANS LE TUBE DE TRANSPORT
Le système Biosepar est conforme à la règlementation postale au niveau européen. Les tubes
Biosepar sont fabriqués dans une matière particulièrement résistante et incassable. Pour plus de
sécurité, il est recommandé d'expédier les tubes dans un récipient clos (conforme à la règlementation
postale en Europe). Les conteneurs de tubes à essai les plus usités peuvent contenir 2 tubes de
transport.
Important:
si le tube est endommagé pendant le transport ou s'il fuit, aucun risque de contamination possible:
toutes les bactéries ont été tubes par le médium A. Ce fait est particulièrement important lorsque les
prélèvements sont contaminés par des virus comme celui du SIDA, tour Ies virus de I'hépatite, la
salmonelle, amibes et shigelles etc.
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