Tutorat Associatif Toulousain Année universitaire 2013
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Tutorat Associatif Toulousain Année universitaire 2013 - 2014 PACES Rangueil ÉPREUVE Recherche/Physiologie 20 QCMs – 60 Minutes Lundi 03/03/2014 UE8 - Initiation à la Recherche 9 QCMs QCM 1 : On souhaite créer des bactéries transformées à partir d'un bout d'ADNc récupéré au cours d'expériences obscures et farfelues *rire démoniaque*. Le brin d'ADNc se présente comme ci: ATG STOP Cla I Bcl I Bam HI Le plasmide dans lequel on veut insérer cet ADNc présente la configuration (simplifiée) suivante : Promoteur Bam HI Xho I Cla I Sal I Bcl I Bgl II NB : Seuls les sites de restriction uniques sont représentés. On considère que le plasmide est un plasmide classique avec gène AmpR et gène LacZ, non représentés. Vous disposez des enzymes suivantes : Bam HI : Bcl I : Xho I : Cla II : 5' G/GATCC 3' 5' T/GATCA 3' 5' C/TCGAG 3' 5' AG/CGCT 3' Bgl II : Cla I : Sal I : 5' A/GATCT 3' 5' AT/CGAT 3' 5' G/TCGAC 3' Afin d'insérer correctement l'ADNc dans le plasmide, de façon à ce qu'il puisse être exprimé, on peut utiliser les couples d'enzymes suivants : A. Cla I/Bam HI. B. Sal I/Bgl II. C. Cla I/Bam HI pour l'insert et Cla I/Bgl II pour le plasmide. D. Cla I/Bcl I. E. Cla II/Bcl I pour l'insert et Cla I/Bgl II pour le plasmide. QCM 2 : La phase 2 du plan machiavélique consiste à infecter des cheese burgers d'une chaîne de fast-food pas très connue ayant un M pour logo... par les bactéries que vous aurez transformé. Ces bactéries produiront la protéine ZZT0P codée par le cDNA intégré dans le plasmide, ce qui transformera la population en ZOMBIE MUHUHUHAHAHAHA ! ! ! !... Hem... Pardon. Donc, pour pouvoir vérifier l'intégration de l'insert et la transformation des bactéries, il faut que dans le plasmide : A. Le gène LacZ (codant pour la β-galactosidase) ne soit pas affecté par l'intégration de l'insert. B. Les gènes AmpR (de résistance à l'ampiciline) et LacZ ne soient pas affectés par l'intégration de l'insert. C. Le gène AmpR doit être interrompu par l'insert tandis que le gène LacZ doit rester intacte. D. Le gène LacZ doit être interrompu par l'insert tandis que le gène AmpR doit rester intacte. E. AmpR permet de vérifier la transformation, LacZ l'intégration. QCM 3 : A propos des techniques d'analyse des protéines : A. La chromatographie échangeuse d'ions sépare les protéines en fonction de leurs charges. B. L' électrophorèse permet uniquement la séparation des protéines en fonction de leurs tailles. C. Le Western blot est une forme d'électrophorèse dans laquelle la révélation des protéines se fait par un anticorps spécifique. D. La chromatographie échangeuse d'ions consiste à échanger des protéines adsorbées sur le support par des ions de même charge. E. Lors d'une chromatographie d'affinité les petites protéines sortent avant les grosses protéines. QCM 4: Techniques d'analyse des protéines : A. La chromatographie par gel filtration utilise des billes pleines qui ralentissent les grosses protéines. B. Lors de la méthode gel filtration les molécules de petit poids moléculaires sortent après les molécules de plus grand poids moléculaires. C. Lors de chromatographie, il faut essayer d'éviter le plus possible la précipitation et la formation d’agrégats (formation de polymères et d’édifices multimériques). D. La dialyse pemet de concentrer un mélange de protéines en solution. E. L'ultracentrifugation permet la séparation des molécules selon leur densité. QCM 5 : Le(s) quel(s) de ce(s) acide(s) aminé(s) est(sont) élué(s) le(s) premier(s) par un tampon à pH 2 lors d’une chromatographie échangeuse d’anions : A. Trp. B. Asp. C. Arg. D. Ala. E. Ser. QCM 6 : Rendement d'extraction : Après une étape de broyage de testicule de rat, le rendement d’extraction des protéines est de 90% ; on effectue une centrifugation à l’issue de la quelle le rendement est de 80%, puis une séparation chromatographique dont le rendement est de 60%.Il y avait au départ 100 mg de protéines, nous obtiendrons donc à l’issue de la 3ème étape : A. 72 mg de protéines. B. 25,4 mg de protéines. C. 43,2 mg de protéines. D. 53,2 mg de protéines. E. 47 mg de protéines. QCM 7 : En Centre Afrique, une équipe de chercheurs locale a observé une population d’éléphant ayant une trompe sous dimensionnée. On appellera ce type d’éléphant BOOBA. Après analyse de leur génome, les chercheurs africains ont découvert l’existence, chez ce type d'éléphant, d’un gène codant pour une protéine nommée GIMS, qui est absente chez les éléphants normaux (à trompe de taille normale). On admet que la protéine GIMS est à l’origine de la réduction de la taille de la trompe chez les éléphants BOOBA. On cherche à créer, à partir d’éléphants BOOBA, des éléphants transgéniques n’exprimant plus cette protéine GIMS, pour qu’ils puissent avoir une descendance ayant une trompe de taille normale et que les autres éléphants ne se moquent plus d’eux. Ainsi l’ordre sera rétablit dans la nature et tout sera pour le mieux dans le meilleur des mondes (peace and love <3). Quelle(s) stratégie(s) peut-on adopter pour créer directement ou indirectement une lignée d'éléphants qui n’exprimeraient pas (ou très peu) de protéines GIMS : A. On peut réaliser une inactivation insertionnelle par ciblage du gène de la protéine GIMS (éléphant KO pour ce gène). B. On peut réaliser une recombinaison homologue aboutissant au floxage du gène de la protéine GIMS et croiser l’éléphant obtenu avec un autre éléphant exprimant le gène GIMS sous contrôle d'un promoteur inducible. C. On peut réaliser une transgénèse classique par injection du gène GIMS dans le pronucléus mâle au stade 1 cellule. D. On peut réaliser une transgenèse classique par injection d'une séquence donnant un ARN antisens par rapport à l'ARN du gène GIMS. E. Si après KO du gène de la protéine GIMS vous ne parvenez pas à obtenir d’éléphant homozygote pour l’inactivation du gène, il est possible que cette protéine joue un rôle essentiel dans le développement embryo-fœtal. QCM 8: On choisit finalement la technique d’intégration ciblée par recombinaison homologue afin d’inactiver le gène de GIMS. On utilise donc le système de double sélection neoR/HSV-tk. On considère que chez ces éléphants de type BOOBA, l’inactivation d’un allèle de GIMS suffit pour avoir phénotype d’éléphant normal (une trompe de taille normal) : A. La cassette neoR va permettre la sélection positive (au G418) des cellules ayant intégré le vecteur. B. Le remplacement du gène GIMS par un homologue contenant la cassette NeoR permettra d’inactiver le gène de la protéine GIMS. C. La présence de la cassette HSV-tk (qui code pour la thymidine kinase) entraine la phosphorylation du G418 et donc la mort des cellules ayant eu une intégration aléatoire (et non par recombinaison homologue). D. Après sélection par la Néomycine et le Gancylclovir, il ne restera que les cellules ES ayant le gène de GIMS inactivé par recombinaison homologue. E. L’intégration du transgène se fait le plus souvent de façon aléatoire dans le génome. QCM 9 : Dans une dernière expérience, on cherche à créer un éléphant BOOBA KO du gène de la protéine GIMS grâce au système Cre-Lox P. Le gène GIMS est floxé au niveau de son exon 2 chez un éléphant BOOBA, puis ce dernier est croisé à un éléphant « normal » exprimant la recombinase Cre sous contrôle d’un promoteur tissu spécifique de la trompe. A propos du bébé éléphant obtenu après croisement et de ses parents éléphants : A. Les cellules hépatiques de l'éléphanteau ont le gène de GIMS floxé. B. La recombinasse Cre sera présente dans toutes les cellules de l’éléphanteau. C. Le gène codant pour la recombinase Cre et son promoteur ont pu être intégrés par transgénèse additionnelle (ou classique) chez l’éléphant normal (quand il était donc au stade 1 cellule). D. Dans les cellules de la trompe de l'éléphanteau, le gène de GIMS sera excisé en totalité. E. Dans cette expérience on peut parler de transgénèse car la modification est transmissible à la descendance. UE3bis - Biophysique – Physiologie 11 QCMs QCM 10 : A propos de la communication cellulaire : A. La communication endocrine s'organise autour d'un réseau étendu de cellules. B. Le système nerveux est un système très robuste car il accepte une réduction de plus de 50% de la masse cellulaire qui le compose. C. La communication endocrine peut être mimée par opothérapie substitutive. D. La communication autocrine correspond à la sécrétion de facteurs locaux dont la cponcentration circulante peut atteindre des valeurs efficaces en situation pathologique. E. Certains nutriments ou produits de métabolisme agissent comme des molécules signal après diffusion par voie humorale. QCM 11 : QCM : A propos de l'homéothermie : A. Un animal ectotherme a une mauvaise adaptation au froid du fait de sa faible conductance thermique. B. L'Homme est considéré comme un animal endotherme. Il est donc capable de maintenir stable sa température centrale. C. On est au printemps, il fait 22°C dehors ; une femme de 42 ans promène tranquillement son chien. Cette femme ne fait appel qu'à son métabolisme basal car elle se situe au niveau de la zone de neutralité thermique. D. Mr Dupont arrive aux urgences ; une infirmière lui prend les constantes et relève une température auriculaire à 36°C. Ce monsieur est donc en hypothermie. E. Le noyau thermique du corps comprend: le tronc, les vaisseaux du cou et les zones intracraniennes. QCM 12 : Un pehun de 70kg présente, après avoir mangé un sandwich du distributeur, une diarrhée aiguë depuis 2jours. Il boit 1 litre d'eau par jour et ça diurèse est de 0,5l/j. Il arrive aux urgences, sa température est de 39° et il pèse 65kg. L'eau endogène est estimé à 0,5l/j, l'eau apporté par l'alimentation à 0,5l/j et la perte de matière maigre est de 1kg en 2 jour. Après une piqure maladroite effectuée par un pédeux en stage, le bilan sanguin montre les résultats suivant : Protidémie = 95g/l, Hématocrite = 70% Ionogramme : Sodium = 156 ; Potassium = 4 ; Chlore = 105 ; Bicarbonate = 25, Urée = 5 mmol/l ; Glycémie = 5mmol/l Il est exact que : A. Au cours des 2 jours, les pertes de fluide auront représenté 4 litres. B. Les pertes insensibles représentent 3 l/j. C. Les gains hydriques sont de 1,5 l/j. D. L'osmolalité totale calculé est de 322mOsm/kg d'eau E. Le volume du secteur plasmatique de ce jeune péhun est diminuée. QCM 13 : Après avoir fêté dignement la post concours des PACES, un pédeux se retrouve en état d'insuffisance hépatique. Il pèse 90kg pour 1m70 et présente un diabète insulino dépendant. Le bilan sanguin montre : Ionogramme plasmatique : Sodium = 115, Potassium = 4, Bicarbonate = 20, Chlore = 90 ; Urée = 10 mmol/l ; Glycémie = 10 mmol/l. Il est exacte que : A. L'osmolalité total calculée est de 250 mOsm/kg d'eau. B. L'osmolalité efficace calculée est de 230 mOsm/kg d'eau. C. Son plasma est hypertonique par rapport au plasma normal. D. Toutes les molécules présentent dans le plasma sont osmotiquement actives. E. Le Trou anionique est de 5 mq/l. QCM 14 : A propos des compartiments liquidiens : A. Un litre de plasma contient 930ml d'eau et 70 ml de protéines. B. La molalité est le nombre de moles de substance par litre de solvant. C. Pour passer de la molarité à la molalité on divise le nombre de moles par litre de solution par 0,93. D. L'équivalence électrochimique est le pouvoir de combinaison d'un ion avec un autre ion de charge opposé. E. L'équivalent est la masse en grammes d'un élément qui se combine ou remplace 2g d'ions H + QCM 15 : A propos des variations du volume liquidien : A. L'eau totale représente 65% de la masse corporelle. B. Pour un adulte de 70kg la quantité d'eau totale est de 42L. C. Le volume intra-cellulaire contient 2/3 de l'eau totale. D. Le volume extra-cellulaire comprend le plasma, l'interstitium mais pas la lymphe canalisée E. Le volume trans-cellulaire augmente dans le cas d'accumulation de liquide péritonéal. QCM 16 : A propos de l'action paracrine du monoxyde d'azote : A. Le NO sécrété possède à la fois une action de relaxation et de contraction sur les cellules musculaires appelée « action paracrine » du NO. B. La NOSe présente dans le muscle permet la relaxation de la tension musculaire. C. La synthèse de NO est activée par la présence de potassium. D. L'endothéline agit à la fois sur la cellule endothéliale et sur la cellule musculaire avec une action finale opposée, c'est donc une hormone paracrine. E. L'angiotensine via la NOSe permet une contraction musculaire mais permet aussi une relaxation en agissant directement sur les cellules musculaires. QCM 17 : A propos de la communication paracrine NO dépendante : A. Lors d'un effort, le courant sanguin s'accelère et les forces de cisallement augmentent, ce qui entraine une entrée de calcium dans la cellule endothéliale et active la NOsynthase. B. L'acéthylcholine est un activiteur direct de la NOsynthase. C. La NOsynthase est une enzyme soluble dans le cytosol de la cellule musculaire lisse. D. Le NO produit dans la cellule endotheliale active la production de GMPc dans la cellule musculaire lisse à la base de la relaxation. E. La voie NO dépendante est essentiellement vasodilatatrice des cellules endothéliales. QCM 18 : A propos des échanges transcapillaires : A. La diffusion est le principal mode de transfert et est quantitativement le plus important. B. La diffusion dépend de la perméabilité capillaire, du gradient de concentration de part et d'autre de la paroi capillaire et de la caractéristique des molécules à échanger. Ce phénomène est régie par l'équation de Starling. C. Une majoration de pression hydrostatique capillaire a tendance à augmenter le flux transcapillaire. D. Une majoration de la pression oncotique capillaire a tendance à diminuer le flux transcapillaire. E. Une majoration des pressions hydrostatiques et oncotiques interstitielles ont toutes deux tendance à augmenter le flux capillaire. QCM 19 : Alceste, 18 ans, étudiant en PACES, vit reclus dans une chambre universitaire de 9 m², à 5 minutes à pied des amphis. N'étant pas un grand cuisto dans l'âme et ne voulant pas perdre de temps en faisant la queue au RU, il préfère commander des burgers et des pizzas à chaque repas. Voilà maintenant 4 mois qu'il vit ainsi. Ce week-end il est rentré chez papamaman, cette dernière lui conseille de se peser, et , horreur, la balance indique 90 kg, alors qu'à la fin de l'été il ne pesait que 85 kg. Dans ces conditions il est exact que : A. Si l'on admet qu'avant de prendre du poids, la répartition des compartiments liquidiens d'Alceste était normale, son volume intracellulaire représentait 3,4 litres. B. Si l'on admet qu'actuellement la répartition des compartiments liquidiens est normale, son volume plasmatique est de 3,6 litres. C. L'eau totale d'Alceste peut être mesurée directement grâce à l'eau lourde ou l'urée. D. Si l'on admet que la répartition actuelle des compartiments liquidiens est normale chez Alceste, on devrait mesurer un volume de distribution du Bleu Evans de 3,6 litres. E. Le volume interstitiel peut être mesuré directement grâce à l'inuline. QCM 20 : Une patiente âgée de 30 ans et pesant 50 kg, vient d'être admise aux urgences suite à un malaise survenu lors d'un marathon. Son ionogramme plasmatique donne les résultats suivants (mmol/L) : Sodium = 145; Potassium = 4; Calcium = 2,5; Bicarbonates = 25; Chlore = 107. Dans le cas présent, il est exact que : A. La kaliémie est normale. B. La patiente présente un trou anionique augmenté. C. La natrémie est anormalement élevée, ceci peut faire penser à une déshydratation. D. Si la valeur du volume de distribution de l'EDTA est de 1,8 litres, on en déduit qu'elle présente une diminution du volume plasmatique. E. Le volume plasmatique de la patiente peut être déterminé par la méthode de dilution des hématies marquées au Cr51.